Эффективность провоспалительных цитокинов при первичной молярной пульпотомии

Кариес зубов – часто встречающееся хроническое инфекционное заболевание у детей. Лечение коронарной пульпотомии обычно предпочтительнее для зубов с глубокими кариесными поражениями, которые клинически и рентгенологически бессимптомны. Успех этого метода лечения во многом зависит от воспалительного статуса пульпы и используемых материалов. Для прогнозирования клинического успеха лечения пульпотомии необходимо также оценить тяжесть воспаления пульпы. Молекулярный подход, который помогает провести клиническое различие между обратимым и необратимым пульпитом, может повысить вероятность успеха терапии витальной пульпы за счет точной оценки статуса воспаления пульпы. Хотя усиление различных медиаторов при запущенном воспалении пульпы изучалось во многих предыдущих исследованиях, роль многих биомолекул, участвующих в воспалении пульпы, еще не определена. Из-за сложной природы воспалительного заболевания пульпы маловероятно, что небольшое количество медиаторов предоставит достаточную информацию для диагностики запущенного воспалительного заболевания. Поэтому исследования, направленные на выявление новых медиаторов, остаются актуальными в стоматологии. Пресепсин, открытый в 2004 году, представляет собой биомаркер высокой чувствительности и специфичности, имеющий большое значение для ранней диагностики бактериальных заболеваний в медицине. При просмотре стоматологической литературы отмечается, что пресепсин не оценивался для выявления бактериального воспаления в пульпе, и считается, что этот биомаркер можно использовать для раннего выявления воспаления пульпы. Таким образом, благодаря возможности измерять уровни пресепсина с помощью наборов для пациентов можно количественно оценить воспаление пульпы, что помогает обеспечить точное лечение пульпы. Цель нашего исследования — выяснить, является ли пресепсин, новый биомаркер, который можно быстро обнаружить в бактериальных инфекций, также может быть использован в качестве медиатора при выявлении инфекций пульпы и для оценки уровней надежных маркеров воспаления пульпы, IL-8 и IL-6, сравнивая влияние этих медиаторов на успех лечения с Наиболее успешные материалы, используемые при лечении пульпотомии, — MTA, Neo MTA, биодентин и оксид цинка-эвгенол.

Это исследование было проведено в соответствии с одобрением Комитета по этике медицинского факультета Университета Ататюрка (Дата: 05.2021/Сессия №:04/Решение №:66) и руководящими принципами Хельсинкской декларации. Также родители детей-пациентов были подробно проинформированы о процедурах перед началом лечения и получены их письменные согласия. Первоначально в исследование были включены в общей сложности 75 детей в возрасте 4–9 лет (36 девочек и 39 мальчиков) без системных заболеваний и с по крайней мере одним молочным вторым моляром, показанным для пульпотомии, и 4 препаратами для пульпотомии (MTA, Biodentine™, NeoMTA™ и ZOE) были случайным образом разделены на четыре исследовательские группы по 30 зубов, и пульпотомия была применена в общей сложности к 120 зубам.

Для случайного распределения исследовательских групп используется компьютерное программное обеспечение Research Randomizer (версия 4.0) с сайта http://www.randomizer.org/. использовался для создания списка перед началом пульпотомии, и соответственно использовались агенты для пульпотомии.

Протоколы обработки и хранения образцов:

Для лучшей видимости на зуб накладывают коффердам, требующий пульпотомии под местной анестезией. Доступ к эндодонтической полости осуществлялся путем сначала удаления кариозной ткани, вскрытия пульповой камеры с помощью алмазного круглого бора (№:18), удаления коронковой ткани с помощью стерильного круглого бора из карбида вольфрама (№:14), установки низкоскоростного углового наконечника и очистка оставшейся ткани пульпы экскаватором.

Перед остановкой кровоизлияния в пульпу на ткань пульпы на 30-45 секунд помещали стерильный ватный тампон. Для получения образцов крови из пульпы и образцы собирали в покрытые гепарином пробирки (Vacutainer, BD, США) с 1 мг физиологического раствора и хранили при -20 oC (-4,0°F) в течение 6 месяцев до дня тестирования.

Затем осуществляли гемостаз пульпы, помещая 0,5 % NaOCl на устья каналов на 30 секунд. Первичные моляры, у которых удалось остановить кровоизлияние в пульпу, были случайным образом распределены в 4 различные исследовательские группы (ProRoot MTA, Biodentine™, NeoMTA™ и ZOE соответственно) и им была проведена пульпотомия. Стеклоиономерный цемент был нанесен поверх всех препаратов для пульпотомии, использованных в исследовании, а пульпотомированные зубы были восстановлены коронками из нержавеющей стали (SSC).

Процесс оттаивания и оценка:

Образцы оттаивали при комнатной температуре и центрифугировали при 4000 об/мин в течение 15 мин. Затем ватные тампоны извлекали из пробирок и измеряли уровни пресепсина, IL-6 и IL-8 с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) [Набор для ИФА на пресепсин человека (Кат.№:E3754Hu, BT LAB, Китай), Human Набор IL-6 ELISA (Кат. №: E0090Hu, BT LAB, Китай), Набор ELISA для человеческого IL-8 (Кат. №: E0089Hu, BT LAB, Китай)] тестируют в соответствии с инструкциями производителя. Диапазоны измерения пресепсина, IL-6 и IL-8 в наборе составляли 5–1000 нг/л, 2–600 нг/л и 5–1000 нг/л соответственно. Межанализовый коэффициент вариации составлял <10% для всех биомаркеров.

Метод клинической и рентгенологической оценки:

Первичные вторые моляры оценивались клинически и рентгенологически через 6 и 12 месяцев после лечения.

Клинически оценивались спонтанная или стимулированная боль, припухлость вестибулярной борозды, свищ, патологическая подвижность, чувствительность к перкуссии и пальпации, регионарная лимфаденопатия, прилегающая к пульпотомированным зубам, и наличие любого из этих симптомов расценивалось как неудавшаяся пульпотомия.

Рентгенологически оценивали рентгенопрозрачность в периапикальной области или области фуркации, внутреннюю и внешнюю резорбцию корня, кальцинирование корневых каналов, расширение периодонтальной связки, и наличие любого из этих симптомов также расценивалось как неудача.

Кроме того, наличие поражений в периапикальных или фуркационных областях на рентгенограммах также считалось неудачей, и эти зубы подвергались лечению или удалению корневых каналов. Кроме того, зубы с внутренней резорбцией корня считались рентгенологически неудачными, и их просто наблюдали до появления каких-либо симптомов.

Статистический анализ Описательная статистика (подсчет, соотношение, среднее значение, стандартное отклонение, минимальные и максимальные переменные) использовалась для обобщения набора данных в настоящем исследовании. Точный тест Фишера использовался для анализа взаимосвязи между клиническими данными до лечения и стоматологическими патологиями, развившимися на 12-м месяце после лечения, когда патологии стали более очевидными. Взаимосвязь между средними уровнями воспалительных биомаркеров пульпы и стоматологическими патологиями, возникшими через 12 месяцев после лечения, анализировали с помощью U-критерия Манна-Уитни. U-тест Манна-Уитни также использовался для сравнения средних уровней воспалительных биомаркеров и клинических данных. Тест Крускала-Уоллиса использовался для сравнения различий между средними показателями воспалительных биомаркеров в зависимости от использованных агентов для пульпотомии.

Пороговые значения рассчитывались с помощью анализа рабочих характеристик приемника (ROC), а затем эти полученные значения использовались для определения самых высоких показателей биомаркеров в группах материалов для пульпотомии. Весь анализ исследования проводился с помощью IBM® SPSS®Statistics 25 при уровне значимости 0,05.