歯周炎に対する局所投与プロポリスジェルの評価

ステージ II およびグレード B の歯周炎を患う適格な患者 32 人が、無作為に 2 つのグループに割り当てられました。

• グループ 1 (介入グループ) は、1% プロポリス ゲルの歯肉内適用と組み合わせた SRP で治療されました。
• グループ 2 (対照グループ) は、プラセボゲルの歯肉内適用と組み合わせた SRP で治療されました。

資格基準:

患者は次の基準に従って募集されました。

包含基準

1. 男女問わず30代～50代まで
2. 全身的に健康な患者は、（修正されたコーネル医学指数）によって証明されるように、ASA クラス I、II に分類されました。
3. 歯周およびインプラント周囲の疾患および状態の分類に関する 2017 年の世界ワークショップによる、ステージ II、グレード B の歯周炎の患者。 最大深さ 3 ～ 4 mm の部位の歯間 CAL、プロービング時出血（BOP）、最大 PD ≤ 5 mm、および歯根の冠状 3 分の 1 に関連する X 線水平骨損失（15% ～ 33%）、歯周治療歴なしまたは過去6ヶ月間の抗生物質の使用
4. 過去6ヶ月以内に歯周病治療や抗生物質や抗炎症薬の使用歴がない患者。
5. 患者は口腔衛生指示に従うことに意欲的である。 除外基準

1. プロポリスに対する既知のアレルギーのある患者。
2. 喫煙者またはアルコール依存症患者。
3. 妊娠中および授乳中の女性

研究デザイン、無作為化、盲検化:

この研究は、無作為化、対照、2並列群、三重盲検、単一施設臨床試験として設計されました。

ステージ II およびグレード B の歯周炎を患う適格な患者 32 人が、無作為に 2 つのグループに割り当てられました。

• グループ 1 (介入グループ) は、1% プロポリス ゲルの歯肉内適用と組み合わせた SRP で治療されました。
• グループ 2 (対照グループ) は、プラセボゲルの歯肉内適用と組み合わせた SRP で治療されました。

参加者は、1:1 の割り当て比率でランダム化手順を使用して、プロポリスまたはプラセボの薬用処方を受け取るようにランダムに割り当てられました。 randomizer.org を使用してコンピューターで生成されたランダム化リスト ウェブサイトの公開は、募集に関与していない共同監督者によって隠蔽目的で実行された。 割り当ての隠蔽は、ランダム化リストを持っていた共同監督者（D.A.）によって行われ、参加者の適格性を確認した後、電話で連絡された。共同監督者が知っているランダムな順序に従って、プロポリスグループまたはプラセボグループのいずれかに割り当てられます。

現在の試験は三重盲検臨床試験でした。 盲検化には、患者、主任研究者、および転帰評価者が含まれた。

適格基準を満たす患者は、ノースカロライナ大学プローブ (UNC15)1 を使用して、以下の臨床パラメーターについて臨床的に評価されました (図 2)。 臨床パラメーターは、2010 年にベルン大学歯周病科によってオンラインのカラー歯周病チャートに記録されました (

介入:

プロポリスとプラセボのジェルの準備

• ３．３４４ｇのカルボキシメチルセルロースナトリウム塩（ＣＭＣ；Ｅｌ Ｎａｓｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｃｏ．、エジプト）を混合することによって、１００ｍｌのプラセボゲルを調製した。
• 200 mg のヒドロキシ安息香酸メチル ナトリウム塩 (Laba Chemie、インド) を保存剤として 81.77 mL の再蒸留水 (dDW) に溶かしたもの。
• １８．２２ｍｌのＨＰＬＣグレードエタノール（メルク、ドイツ）を一晩連続撹拌して、ＣＭＣの完全な可溶化を確実にする。
• 100mlのプロポリス抽出ゲルを調製するために、1gのプロポリス(Imtnan、エジプト)を18.22mlのエタノールを使用して抽出した。
• 次いで、１０ｇのプロピレングリコールをエタノール抽出物に添加して、水相への溶解度を高めた。
• 次いで、水に溶解したＣＭＣ３．３４４ｇを上記混合物に添加し、蒸留水を使用して全重量を１００ｇにすることにより、プラセボゲルと同じ方法でプロポリスゲルを調製した。

ゲルを２０本のシリンジ（５ｍｌ）に充填し、冷蔵庫に保管した。

治療プロトコル:

1. 第 I 相の歯周治療と歯周チャート:

   • UNC15歯周プローブを使用した口全体のプロービングとその後の選択された部位（PPD≤5mm）の根尖周囲X線検査を含む初期検査が行われました。
   • 適切な口腔衛生指導に対する患者の動機付けと教育には、修正バスブラッシング技術を使用した柔らかい歯ブラシを使用した 1 日 2 回の歯磨きと、広い歯間の埋込みスペース用のデンタルフロスと歯間ブラシを使用した 1 日 1 回の歯間清掃が含まれていました。
   • 適切な歯肉縁下デブリードマンを行うために、歯肉縁上スケーリングチップを備えた超音波装置 4 に続いてユニバーサルキュレット 5 とグレーシーキュレット 5 を使用して、口全体の上および歯肉縁下のデブリードマンを実施しました。 必要なときはいつでも、患者の快適さのために局所麻酔6が使用されました。
   • 最後の歯周器具の訪問から 48 時間後、患者はベースラインの臨床パラメーターを記録し、ベースラインの GCF サンプルを収集し、その後局所的に薬剤を塗布するために呼び戻されました。
2. 歯肉溝液のサンプリング:

歯肉溝液（GCF）サンプルは、各患者に 1 つずつ、32 の選択された部位から収集されました。選択した部位を綿ロールを使用して分離し、穏やかに乾燥させました。 標準的な紙ストリップ 7 を、30 秒間抵抗が感じられるまで歯溝に挿入し、その後取り外します。歯肉液を収集した後、ストリップを 100 μl リン酸緩衝液 PH 7.4 を含む滅菌エッペンドルフチューブに置き、終了するまで -20℃ で保管しました。分析。

GCFサンプルは、生物学的評価のためにすべての患者についてベースライン、1ヶ月および3ヶ月の期間ですべてのサンプルを収集した後、さらなる分析まで-20℃で保管した。

1- 介入:

GCF サンプルを収集した後、介入の適用が行われます。ランダムな順序に従ってプロポリスまたはプラセボのいずれか。

滅菌した 1 ml マイクロシリンジ 9 に薬剤を充填し、プラスチックの先端を使用して歯溝に注入し、歯間領域全体を満たしました。

1- 臨床パラメータ:

すべての臨床歯周パラメーターは、ベースライン、3 か月後、6 か月後に評価されました。

以下のパラメーターが術前に評価されました。

1. 臨床愛着レベル (CAL)。(ラムフィヨルド) 1967)
2. プロービング深さ (PD)。 (リストガーデン 1980)
3. 歯肉指数 (GI) (Löe 1967))。
4. プラークインデックス (PI)。 (ロー 1964)

1. 臨床愛着レベル (CAL) (ラムフィヨルド、1967):

   CAL は、固定基準点間の距離、つまり CEJ からポケットの基部までの距離として測定され、各歯の 6 つの部位について手動で記録されました。

   o CAL に関して 2 つのパラメータが記録されました。

   - 平均 CAL: CAL は各患者について測定されました (すべての部位の合計 CAL / 表面の数)。

   - 最高 CAL 部位の平均：各患者の最高の臨床的愛着喪失測定値が記録され、各グループの最高 CAL の平均が計算され、これが主要転帰とみなされました。

2. 歯周ポケットの深さ (PPD) (Listgarten、1980):

   PPDを測定するために、プローブを歯の長軸に平行してポケットの最深点に到達するように挿入し、ポケットの基部と歯肉縁との間の距離を最も近いミリメートルのマークまで手動で記録した。 各歯について 6 つの測定値が記録されました。

   o PPD に関して 2 つのパラメータが記録されました。

   - 平均 PPD: PPD は各患者について測定されました (合計 PD/表面の数)。

   - 最も深い PPD の平均: 各患者の最も深いポケットの測定値が記録され、各グループの最も深いポケットの平均が計算されました。

3. 歯肉指数 (GI) (Löe 1967)):

   歯肉の基準は、次のスコアを使用して評価されました。

   • 0 = 正常な歯肉。

   • 1 = 軽度の炎症: わずかな色の変化、わずかな浮腫、プロービングによる出血はありません。

   • 2 = 中程度の炎症: 発赤、浮腫、光沢、またはプロービング時の出血。

   • 3 = 重度の炎症: 顕著な発赤と浮腫、自然出血の傾向、潰瘍形成。

     • GI は歯の 2 つの表面 (頬側と舌側) で測定され、すべての歯の平均値が取られ、各患者について記録されました。
4. プラークインデックス (PI) (Loe 1964)):

歯の表面の歯垢沈着は次のように評価され、スコア付けされました。

• 0=プラークなし
• 1= 自由歯肉縁および歯の隣接領域に付着した歯垢の膜。 歯垢は、検出溶液を塗布した後、または歯の表面にプローブを使用することによってのみ、その場で観察される場合があります。
• 2= 肉眼で確認できる歯肉ポケット、または歯と歯肉縁内に軟らかい沈着物が中程度に蓄積している。

• 3= 歯肉ポケット内および/または歯と歯肉縁上に軟質物質が豊富にある。

  • PI は歯の 2 つの表面 (頬側と舌側) で測定され、すべての歯の平均値が取られ、各患者について記録されました。

定量的な生体力学的評価:

検査部位は穏やかな空気流で乾燥され、唾液による汚染を防ぐために綿のロールで隔離されます。 次に、滅菌ピンセットを使用して、1 枚のペリオ紙を選択したポケットに挿入し、その場で 30 秒間放置します。 ペリオペーパーを、１００μｌのリン酸緩衝液（ＰＨ７．４）を含む滅菌エッペンドルフチューブに入れ、分析時まで−２０℃で保存する。

メーカーの指示に従い、市販の ELISA キットを使用してサンプルを分析し、プロスタグランジン E2 (PGE2) のレベルを評価します。 すべての患者について、ベースライン時と歯周治療の 3 か月後に歯肉溝液 (GCF) サンプルが採取され、分析されます。