Bewertung lokal verabreichter Propolis-Gele bei Parodontitis

Zweiunddreißig geeignete Patienten mit Parodontitis im Stadium II und B wurden nach dem Zufallsprinzip in zwei Gruppen eingeteilt:

• Gruppe 1 (Interventionsgruppe) wurde mit SRP kombiniert mit intrasulkulärer Anwendung von 1 % Propolis-Gel behandelt.
• Gruppe 2 (Kontrollgruppe) wurde mit SRP in Kombination mit der intrasulkulären Anwendung von Placebo-Gel behandelt.

Zulassungskriterien:

Die Patienten wurden nach folgenden Kriterien rekrutiert:

Einschlusskriterien

1. Beide Geschlechter im Alter von 30–50 Jahren
2. Systemisch gesunde Patienten wurden gemäß dem modifizierten medizinischen Cornell-Index in die ASA-Klassen I und II eingestuft.
3. Patienten mit Parodontitis im Stadium II, Grad B, gemäß dem Weltworkshop 2017 zur Klassifizierung parodontaler und periimplantärer Erkrankungen und Zustände. Interdentaler CAL an der Stelle mit der größten Tiefe von 3–4 mm, Blutung beim Sondieren (BOP), maximale PD ≤ 5 mm und radiologischer horizontaler Knochenverlust im koronalen Drittel der Wurzel (15–33 %), ohne Vorgeschichte einer Parodontaltherapie oder Einnahme von Antibiotika in den letzten 6 Monaten
4. Patient ohne Vorgeschichte einer Parodontaltherapie oder Anwendung von Antibiotika oder entzündungshemmenden Mitteln in den letzten 6 Monaten.
5. Der Patient ist bereit, die Anweisungen zur Mundhygiene einzuhalten. Ausschlusskriterien

1. Patienten mit bekannter Allergie gegen Propolis.
2. Raucher oder Alkoholiker.
3. Schwangere und stillende Weibchen

Studiendesign, Randomisierung und Verblindung:

Diese Studie wurde als randomisierte, kontrollierte, dreifach verblindete klinische Studie mit zwei parallelen Armen und einem Zentrum konzipiert.

Zweiunddreißig geeignete Patienten mit Parodontitis im Stadium II und B wurden nach dem Zufallsprinzip in zwei Gruppen eingeteilt:

• Gruppe 1 (Interventionsgruppe) wurde mit SRP kombiniert mit intrasulkulärer Anwendung von 1 % Propolis-Gel behandelt.
• Gruppe 2 (Kontrollgruppe) wurde mit SRP in Kombination mit der intrasulkulären Anwendung von Placebo-Gel behandelt.

Den Teilnehmern wurde nach einem Randomisierungsverfahren mit einem Zuteilungsverhältnis von 1:1 nach dem Zufallsprinzip eine medizinische Formel aus Propolis oder Placebo zugewiesen. Eine computergenerierte Randomisierungsliste mit randomizer.org Die Website wurde von dem Co-Supervisor durchgeführt, der nicht an der Rekrutierung zum Zweck der Verschleierung beteiligt war. Die Verschleierung der Zuordnung wurde durch den Co-Supervisor (D. A.) erreicht, der über die Randomisierungsliste verfügte und nach Bestätigung der Berechtigung des Teilnehmers telefonisch kontaktiert wurde entsprechend der dem Co-Supervisor bekannten zufälligen Reihenfolge entweder der Propolis-Gruppe oder der Placebo-Gruppe zugeordnet werden.

Bei der aktuellen Studie handelte es sich um eine dreifach verblindete klinische Studie. Die Verblindung umfasste Patienten, den Hauptprüfer und die Ergebnisprüfer.

Patienten, die die Zulassungskriterien erfüllten, wurden mit der University of North Carolina-Sonde (UNC15)1 klinisch auf die folgenden klinischen Parameter untersucht (Abbildung 2). Die klinischen Parameter wurden im Online-Farbparodontaldiagramm der Abteilung für Parodontologie der Universität Bern 20102 erfasst (

Interventionen:

Propolis- und Placebo-Gel-Zubereitung

• 100 ml Placebo-Gel wurden durch Mischen von 3,344 g Carboxymethylcellulose-Natriumsalz (CMC; El Nasr Pharmaceutical Chemicals Co., Ägypten) hergestellt.
• 200 mg Methylhydroxybenzoat-Natriumsalz (Loba Chemie, Indien) als Konservierungsmittel in 81,77 ml doppelt destilliertem Wasser (dDW).
• 18,22 ml Ethanol in HPLC-Qualität (Merck, Deutschland) unter kontinuierlichem Rühren über Nacht, um eine vollständige Solubilisierung der CMC sicherzustellen.
• Zur Herstellung von 100 ml Propolis-Extraktgel wurde 1 g Propolis (Imtnan, Ägypten) mit 18,22 ml Ethanol extrahiert.
• Anschließend wurden dem ethanolischen Extrakt 10 g Propylenglykol zugesetzt, um seine Löslichkeit in der wässrigen Phase zu erhöhen.
• Das Propolis-Gel wurde dann nach der gleichen Methode wie das Placebo-Gel hergestellt, indem 3,344 g in Wasser gelöstes CMC zu der obigen Mischung gegeben und das Gesamtgewicht mit destilliertem Wasser auf 100 g aufgefüllt wurde.

Das Gel wurde in 20 Spritzen (5 ml) abgefüllt und im Kühlschrank aufbewahrt.

Behandlungsprotokoll:

1. Phase-I-Parodontaltherapie und Parodontaldiagnostik:

   • Die Erstuntersuchung erfolgte einschließlich der Sondierung des gesamten Mundes mit der parodontalen Sonde UNC15, gefolgt von einer periapikalen Röntgenuntersuchung der ausgewählten Stellen (PPD ≤ 5 mm).
   • Zur Motivation und Aufklärung der Patienten über die richtige Mundhygiene gehörte zweimal tägliches Zähneputzen mit einer weichen Zahnbürste unter Verwendung der modifizierten Bass-Bürsttechnik und einmal tägliche Reinigung der Zahnzwischenräume mit Zahnseide und Interdentalbürsten für große Zwischenräume zwischen den Zahnzwischenräumen.
   • Das gesamte supra- und subgingivale Debridement im Mund wurde mit einem Ultraschallgerät4 mit supragingivalen Scaling-Spitzen durchgeführt, gefolgt von Universal- und Gracey-Küretten 5 für ein ordnungsgemäßes subgingivales Debridement. Zur Beruhigung des Patienten wurde bei Bedarf eine Lokalanästhesie6 eingesetzt.
   • 48 Stunden nach dem letzten parodontalen Instrumentierungsbesuch wurden die Patienten zurückgerufen, um die klinischen Ausgangsparameter aufzuzeichnen, die GCF-Ausgangsprobe zu entnehmen und dann das Medikament lokal zu verabreichen.
2. Probenahme von Zahnfleischspaltflüssigkeit:

Proben der Zahnfleischspaltenflüssigkeit (GCF) wurden an zweiunddreißig (32) ausgewählten Stellen entnommen, eine bei jedem Patienten; Ausgewählte Stellen wurden mit Watterollen isoliert und schonend getrocknet. Ein Standard-Papierstreifen7 wurde in den Sulkus eingeführt, bis 30 Sekunden lang ein Widerstand zu spüren war, und dann entfernt. Nach dem Sammeln der Zahnfleischflüssigkeit wurden die Streifen in sterile Eppendorf-Röhrchen mit 100 μl Phosphatpuffer PH 7,4 gegeben und bis zum Zeitpunkt des Eingriffs bei –20 °C gelagert Analyse.

GCF-Proben wurden bis zur weiteren Analyse bei -20 °C gelagert, nachdem alle Proben zu Beginn, 1 Monat und 3 Monate für alle Patienten zur biologischen Beurteilung gesammelt worden waren.

1- Interventionen:

Nach der Entnahme von GCF-Proben erfolgt die Anwendung der Interventionen; entweder Propolis oder Placebo entsprechend der zufälligen Reihenfolge.

Eine sterile 1-ml-Mikrospritze9 wurde mit dem Medikament gefüllt und dann mit einer Kunststoffspitze in den Sulcus injiziert, wodurch der gesamte Interdentalbereich ausgefüllt wurde

1- Klinische Parameter:

Alle klinischen parodontalen Parameter wurden zu Studienbeginn, nach 3 Monaten und nach 6 Monaten beurteilt.

Folgende Parameter wurden präoperativ beurteilt:

1. Klinisches Bindungsniveau (CAL).(Ramfjord 1967)
2. Sondierungstiefe (PD). (Listgarten 1980)
3. Gingivaler Index (GI) (Löe 1967).
4. Plaque-Index (PI). (Loe 1964)

1. Klinisches Bindungsniveau (CAL) (Ramfjord, 1967):

   CAL wurde als Abstand zwischen den festen Referenzpunkten, d. h. CEJ, zum Taschengrund gemessen und manuell für sechs Stellen an jedem Zahn aufgezeichnet.

   o In Bezug auf CAL wurden zwei Parameter aufgezeichnet:

   - Mittlerer CAL: Der CAL wurde für jeden Patienten gemessen (Gesamt-CAL an allen Stellen/Anzahl der Oberflächen).

   - Mittlerer höchster CAL-Standort: Für jeden Patienten wurde das höchste Maß für den klinischen Bindungsverlust aufgezeichnet und der Mittelwert des höchsten CAL für jede Gruppe berechnet. Dies wurde als primäres Ergebnis betrachtet

2. Parodontale Taschentiefe (PPD) (Listgarten, 1980):

   Um die PPD zu messen, wurde die Sonde parallel zur Längsachse des Zahns eingeführt, um den tiefsten Punkt der Tasche zu erreichen, und der Abstand zwischen der Basis der Tasche und dem Zahnfleischrand wurde manuell auf die nächste Millimetermarkierung genau aufgezeichnet. Für jeden Zahn wurden sechs Messwerte aufgezeichnet.

   o Zwei Parameter bezüglich PPD wurden erfasst:

   - Mittlerer PPD: Der PPD wurde für jeden Patienten gemessen (Gesamt-PD/Anzahl der Oberflächen).

   - Mittlerer tiefster PPD: Das Maß der tiefsten Tasche für jeden Patienten wurde aufgezeichnet und der Mittelwert der tiefsten Tasche wurde für jede Gruppe berechnet.

3. Gingivaindex (GI) (Löe 1967)):

   Die gingivalen Kriterien wurden anhand des folgenden Scores bewertet:

   • 0 = normales Zahnfleisch.

   • 1 = leichte Entzündung: leichte Farbveränderung, leichtes Ödem, keine Blutung beim Sondieren.

   • 2 = mäßige Entzündung: Rötung, Ödem und Verglasung oder Blutung beim Sondieren.

   • 3 = schwere Entzündung: deutliche Rötung und Ödem, Neigung zu spontanen Blutungen, Ulzeration.

     • Der GI wurde auf zwei Zahnoberflächen (bukkal und lingual) gemessen und ein Mittelwert für alle Zähne gebildet und für jeden Patienten aufgezeichnet.
4. Plaque-Index (PI) (Loe 1964)):

Die Plaqueablagerungen auf der Zahnoberfläche wurden wie folgt beurteilt und bewertet:

• 0=Keine Plakette
• 1= Ein Plaquefilm, der am freien Zahnfleischrand und im angrenzenden Bereich des Zahns haftet. Die Plaque kann in situ erst nach Auftragen der Aufhellungslösung oder durch Verwendung der Sonde auf der Zahnoberfläche sichtbar sein.
• 2= ​​Mäßige Ansammlung weicher Ablagerungen in der Zahnfleischtasche oder am Zahn- und Zahnfleischrand, die mit bloßem Auge sichtbar sind.

• 3= Überfluss an weicher Substanz in der Zahnfleischtasche und/oder am Zahn und Zahnfleischrand.

  • Der PI wurde auf zwei Zahnoberflächen (bukkal und lingual) gemessen und ein Mittelwert für alle Zähne gebildet und für jeden Patienten aufgezeichnet

Quantitative biomechanische Bewertung:

Der untersuchte Bereich wird durch einen sanften Luftstrom getrocknet und mit Watterollen isoliert, um eine Kontamination mit Speichel zu verhindern. Anschließend wird mit einer sterilen Pinzette ein Perio-Papier in die ausgewählte Tasche eingeführt und 30 Sekunden lang dort belassen. Perio-Papier wird in sterile Eppendorf-Röhrchen mit 100 μl Phosphatpuffer pH 7,4 gegeben und bis zum Zeitpunkt der Analyse bei –20 °C gelagert.

Die Proben werden analysiert, um den Prostaglandin-E2-Spiegel (PGE2) mithilfe kommerziell erhältlicher ELISA-Kits und unter Befolgung der Anweisungen des Herstellers zu bestimmen. Bei allen Patienten werden zu Studienbeginn und drei Monate nach der parodontalen Behandlung Proben der Zahnfleischspaltflüssigkeit (GCF) entnommen und analysiert.