Valutazione dei gel di propoli somministrati localmente nella parodontite

Trentadue pazienti eleggibili con parodontite di stadio II e grado B sono stati assegnati in modo casuale in 2 gruppi:

• Il gruppo 1 (gruppo di intervento) è stato trattato con SRP combinato con l'applicazione intrasulculare di gel di propoli all'1%.
• Il gruppo 2 (gruppo di controllo) è stato trattato con SRP combinato con l'applicazione intrasulculare di gel placebo.

Criteri di ammissibilità:

I pazienti sono stati reclutati secondo i seguenti criteri:

Criteri di inclusione

1. Entrambi i sessi di età compresa tra 30 e 50 anni
2. I pazienti sistemicamente sani sono stati classificati come classe ASA I, II come evidenziato da (indice medico Cornell modificato)
3. Pazienti con parodontite di stadio II, grado B, secondo il workshop mondiale del 2017 sulla classificazione delle malattie e delle condizioni parodontali e perimplantari. CAL interdentale nel sito di massima profondità 3-4 mm, sanguinamento al sondaggio (BOP), PD massimo ≤ 5 mm e perdita ossea orizzontale radiografica correlata al terzo coronale della radice (15%-33%), senza storia di terapia parodontale o uso di antibiotici nei 6 mesi precedenti
4. Paziente senza storia di terapia parodontale o uso di antibiotici o antinfiammatori nei 6 mesi precedenti.
5. Paziente disposto a rispettare le istruzioni di igiene orale. Criteri di esclusione

1. Pazienti con allergia nota alla propoli.
2. Pazienti fumatori o alcolisti.
3. Femmine in gravidanza e in allattamento

Disegno dello studio, randomizzazione e accecamento:

Questo studio è stato concepito come uno studio clinico randomizzato, controllato, a 2 bracci paralleli, in triplo cieco, in un unico centro.

Trentadue pazienti eleggibili con parodontite di stadio II e grado B sono stati assegnati in modo casuale in 2 gruppi:

• Il gruppo 1 (gruppo di intervento) è stato trattato con SRP combinato con l'applicazione intrasulculare di gel di propoli all'1%.
• Il gruppo 2 (gruppo di controllo) è stato trattato con SRP combinato con l'applicazione intrasulculare di gel placebo.

I partecipanti sono stati assegnati in modo casuale a ricevere una formula medicata di Propoli o Placebo utilizzando una procedura di randomizzazione con un rapporto di assegnazione 1:1. Un elenco di randomizzazione generato dal computer utilizzando randomizer.org sito web è stato eseguito dal co-supervisore che non era coinvolto nel reclutamento ai fini dell'occultamento L'occultamento dell'assegnazione è stato ottenuto dal co-supervisore (D. A.) che aveva l'elenco di randomizzazione ed è stato contattato telefonicamente dopo aver confermato l'idoneità del partecipante a essere assegnato al gruppo Propolis o al gruppo Placebo secondo la sequenza casuale conosciuta dal co-supervisore.

Lo studio attuale era uno studio clinico in triplo cieco. Il cieco includeva i pazienti, il ricercatore principale e i valutatori dei risultati.

I pazienti che soddisfacevano i criteri di idoneità sono stati valutati clinicamente per i seguenti parametri clinici utilizzando la sonda dell'Università della Carolina del Nord (UNC15)1 (Figura 2). I parametri clinici sono stati registrati nella cartella parodontale colorata online dal Dipartimento di Parodontologia dell'Università di Berna 20102 (

Interventi:

Preparazione Gel Propoli e Placebo

• 100 ml di gel Placebo sono stati preparati mescolando 3,344 g di sale sodico di carbossimetilcellulosa (CMC; El Nasr Pharmaceutical Chemicals Co., Egitto).
• 200 mg di metilidrossibenzoato di sale sodico (Loba Chemie, India) come conservante in 81,77 mL di acqua bidistillata (dDW).
• 18,22 ml di etanolo di grado HPLC (Merck, Germania) sotto agitazione continua durante la notte per garantire la completa solubilizzazione della CMC.
• Per preparare 100 ml di gel di estratto di propoli, 1 g di propoli (Imtnan, Egitto) è stato estratto utilizzando 18,22 ml di etanolo.
• all'estratto etanolico sono stati poi aggiunti 10 g di glicole propilenico per aumentarne la solubilità in fase acquosa.
• Il gel di propoli è stato quindi preparato con lo stesso metodo del gel placebo aggiungendo alla miscela di cui sopra 3,344 g di CMC sciolti in acqua e portando il peso totale a 100 g utilizzando acqua distillata.

Il gel è stato riempito in 20 siringhe (5 ml) e conservato in frigorifero.

Protocollo di trattamento:

1. Terapia parodontale di fase I e grafici parodontali:

   • L'esame iniziale è stato effettuato includendo il sondaggio dell'intera bocca utilizzando la sonda parodontale UNC15, seguito da un esame radiografico periapicale per i siti selezionati (PPD ≤ 5 mm).
   • La motivazione e l'educazione del paziente per una corretta igiene orale includevano lo spazzolamento dei denti due volte al giorno con uno spazzolino morbido utilizzando la tecnica di bass brushing modificata e la pulizia interdentale una volta al giorno con filo interdentale e spazzolini interdentali per ampi spazi interprossimali.
   • Lo sbrigliamento sopra e sottogengivale dell'intera bocca è stato eseguito utilizzando un dispositivo a ultrasuoni4 con punte per ablazione sopragengivale seguite da curette universali e di Gracey 5 per un corretto sbrigliamento sottogengivale. L'anestesia locale6 è stata utilizzata per il comfort del paziente ogni volta che era necessario.
   • Dopo 48 ore dall'ultima visita strumentale parodontale, i pazienti sono stati richiamati per registrare i parametri clinici di base e raccogliere il campione GCF di base, quindi applicare il farmaco locale.
2. Fluido crevicolare gengivale Campionamento:

Campioni di fluido crevicolare gengivale (GCF) sono stati raccolti da trentadue (32) siti selezionati, uno in ciascun paziente; i siti selezionati sono stati isolati utilizzando rulli di cotone e asciugati delicatamente. Una striscia di carta standard7 è stata inserita nel solco fino a quando non si è avvertita resistenza per 30 secondi e poi rimossa, dopo aver raccolto il fluido gengivale, le strisce sono state collocate in provette Eppendorf sterili contenenti 100 ul di tampone fosfato PH 7,4 e conservate a -20°C fino al momento della rimozione. analisi.

I campioni GCF sono stati conservati a -20 C fino a ulteriori analisi dopo aver raccolto tutti i campioni al basale, per una durata di 1 mese e 3 mesi per tutti i pazienti per la valutazione biologica.

1- interventi:

Dopo la raccolta dei campioni GCF avviene l'applicazione degli interventi; o Propoli o Placebo secondo la sequenza casuale.

Una microsiringa sterile da 1 ml9 è stata riempita con il farmaco e poi è stato iniettato utilizzando la punta di plastica nel solco, riempiendo l'intera area interdentale

1- Parametri clinici:

Tutti i parametri clinici parodontali sono stati valutati al basale, dopo 3 mesi e 6 mesi.

Prima dell’intervento sono stati valutati i seguenti parametri:

1. Livello di attaccamento clinico (CAL).(Ramjord 1967)
2. Profondità di sondaggio (PD). (Listgarten 1980)
3. Indice gengivale (GI) (Löe 1967)).
4. Indice di placca (PI). (Loè 1964)

1. Livello di attaccamento clinico (CAL) (Ramjord, 1967):

   Il CAL è stato misurato come la distanza tra i punti di riferimento fissi, vale a dire, dalla CEJ alla base della tasca e registrato manualmente per sei siti su ciascun dente.

   o Sono stati registrati due parametri relativi al CAL:

   - CAL medio: il CAL è stato misurato per ciascun paziente (CAL totale in tutti i siti/numero di superfici).

   - Sito medio del CAL più alto: è stata registrata la misura di perdita di attacco clinico più alta per ciascun paziente ed è stata calcolata la media del CAL più alto per ciascun gruppo, e questo è stato considerato come risultato primario

2. Profondità delle tasche parodontali (PPD) (Listgarten, 1980):

   Per misurare la PPD, la sonda è stata inserita parallelamente all'asse lungo del dente per raggiungere il punto più profondo della tasca, e la distanza tra la base della tasca e il margine gengivale è stata registrata manualmente fino alla tacca millimetrica più vicina. Sono state registrate sei letture per ciascun dente.

   o Sono stati registrati due parametri riguardanti la PPD:

   - PPD media: la PPD è stata misurata per ciascun paziente (PD totale/numero di superfici).

   - PPD media più profonda: è stata registrata la misura della tasca più profonda per ciascun paziente ed è stata calcolata la media della tasca più profonda per ciascun gruppo.

3. Indice gengivale (GI) (Löe 1967)):

   I criteri gengivali sono stati valutati utilizzando il seguente punteggio:

   • 0 = gengivale normale.

   • 1 = lieve infiammazione: leggero cambiamento di colore, leggero edema, nessun sanguinamento al sondaggio.

   • 2 = infiammazione moderata: arrossamento, edema e patina o sanguinamento al sondaggio.

   • 3 = grave infiammazione: marcato rossore ed edema, tendenza al sanguinamento spontaneo, ulcerazione.

     • L'IG è stato misurato su due superfici dei denti (vestibolare e linguale) ed è stata presa una media per tutti i denti e registrata per ciascun paziente.
4. Indice di placca (PI) (Loe 1964)):

I depositi di placca sulla superficie dei denti sono stati valutati e classificati come segue:

• 0=Nessuna placca
• 1= Un film di placca aderente al margine gengivale libero e all'area adiacente del dente. La placca può essere vista in situ solo dopo l'applicazione della soluzione rivelatrice o utilizzando la sonda sulla superficie del dente.
• 2= ​​Moderato accumulo di depositi molli all'interno della tasca gengivale o del dente e del margine gengivale che possono essere visti ad occhio nudo.

• 3=Abbondanza di materia molle all'interno della tasca gengivale e/o sul dente e sul margine gengivale.

  • Il PI è stato misurato su due superfici dei denti (vestibolare e linguale) ed è stata presa una media per tutti i denti e registrata per ciascun paziente

Valutazione biomeccanica quantitativa:

L'area esaminata verrà asciugata con un leggero flusso d'aria e isolata con rulli di cotone per prevenire la contaminazione con la saliva. Successivamente, con una pinzetta sterile, una carta parodontale verrà inserita nella tasca selezionata e lasciata in situ per 30 secondi. Le carte Perio vengono poste in provette Eppendorf sterili contenenti 100 ul di tampone fosfato PH 7,4 e conservate a -20 o C fino al momento dell'analisi.

I campioni verranno analizzati per valutare il livello di prostaglandina E2 (PGE2) utilizzando kit ELISA disponibili in commercio seguendo le istruzioni del produttore. Per tutti i pazienti, i campioni di fluido crevicolare gengivale (GCF) verranno prelevati e analizzati al basale e tre mesi dopo il trattamento parodontale.