Evaluación de geles de propóleo de administración local en periodontitis

Treinta y dos pacientes elegibles con periodontitis en estadio II y Grado B fueron asignados aleatoriamente a 2 grupos:

• El grupo 1 (grupo de intervención) fue tratado con SRP combinado con aplicación intrasulcular de gel de propóleo al 1%.
• El grupo 2 (grupo control) fue tratado con SRP combinado con aplicación intrasulcular de gel placebo.

Criterios de elegibilidad:

Los pacientes fueron reclutados según los siguientes criterios:

Criterios de inclusión

1. Ambos sexos con edades comprendidas entre 30 y 50 años.
2. Los pacientes sistémicamente sanos se clasificaron como ASA clase I, II como lo demuestra (índice médico de Cornell modificado)
3. Pacientes con periodontitis en estadio II, grado B, según el taller mundial de 2017 sobre la clasificación de enfermedades y afecciones periodontales y periimplantarias. CAL interdental en el sitio de mayor profundidad 3-4 mm, sangrado al sondaje (BOP), PD máxima ≤5 mm y pérdida ósea horizontal radiológica relacionada con el tercio coronal de la raíz (15%-33%), sin antecedentes de terapia periodontal o uso de antibióticos en los 6 meses anteriores
4. Paciente sin antecedentes de terapia periodontal ni uso de antibióticos o antiinflamatorios en los 6 meses anteriores.
5. Paciente dispuesto a cumplir con las instrucciones de higiene bucal. Criterios de exclusión

1. Pacientes con alergia conocida al propóleo.
2. Pacientes fumadores o alcohólicos.
3. Hembras gestantes y lactantes.

Diseño del estudio, aleatorización y cegamiento:

Este estudio fue diseñado como un ensayo clínico aleatorizado, controlado, de 2 brazos paralelos, triple ciego y de un solo centro.

Treinta y dos pacientes elegibles con periodontitis en estadio II y Grado B fueron asignados aleatoriamente a 2 grupos:

• El grupo 1 (grupo de intervención) fue tratado con SRP combinado con aplicación intrasulcular de gel de propóleo al 1%.
• El grupo 2 (grupo control) fue tratado con SRP combinado con aplicación intrasulcular de gel placebo.

Los participantes fueron asignados aleatoriamente para recibir una fórmula medicada de propóleo o placebo mediante un procedimiento de aleatorización con una proporción de asignación de 1:1. Una lista de aleatorización generada por computadora usando randomizer.org El sitio web fue ejecutado por el cosupervisor que no participó en el reclutamiento con el fin de ocultar la asignación. El cosupervisor (D. A.) que tenía la lista de aleatorización logró la ocultación de la asignación y fue contactado por teléfono después de confirmar la elegibilidad del participante para participar. se asignará al grupo de propóleo o al grupo de placebo de acuerdo con la secuencia aleatoria conocida por el cosupervisor.

El ensayo actual fue un ensayo clínico triple ciego. El cegamiento incluyó a los pacientes, al investigador principal y a los evaluadores de resultados.

Los pacientes que cumplieron con los criterios de elegibilidad fueron evaluados clínicamente para los siguientes parámetros clínicos utilizando la sonda de la Universidad de Carolina del Norte (UNC15)1 (Figura 2). Los parámetros clínicos se registraron en la tabla periodontal coloreada en línea del Departamento de Periodoncia de la Universidad de Berna 20102 (

Intervenciones:

Preparación de gel de propóleo y placebo.

• Se prepararon 100 ml de gel de placebo mezclando 3,344 g de sal sódica de carboximetilcelulosa (CMC; El Nasr Pharmaceutical Chemicals Co., Egipto).
• 200 mg de sal sódica de hidroxibenzoato de metilo (Loba Chemie, India) como conservante en 81,77 ml de agua bidestilada (dDW).
• 18,22 ml de etanol de calidad HPLC (Merck, Alemania) con agitación continua durante la noche para asegurar la solubilización completa de la CMC.
• Para preparar 100 ml de gel de extracto de propóleo, se extrajo 1 g de propóleo (Imtnan, Egipto) usando 18,22 ml de etanol.
• luego se agregaron 10 g de propilenglicol al extracto etanólico para mejorar su solubilidad en la fase acuosa.
• Luego se preparó el gel de propóleo mediante el mismo método que el del gel placebo añadiendo 3,344 g de CMC disueltos en agua a la mezcla anterior y completando el peso total a 100 g usando agua destilada.

El gel se introdujo en 20 jeringas (5 ml) y se guardó en el frigorífico.

Protocolo de tratamiento:

1. Terapia periodontal de fase I y gráficos periodontales:

   • Se realizó un examen inicial que incluyó un sondaje bucal completo utilizando una sonda periodontal UNC15 seguido de un examen radiográfico periapical de los sitios seleccionados (PPD ≤5 mm).
   • La motivación y educación del paciente para instrucciones adecuadas de higiene bucal incluyeron el cepillado de dientes dos veces al día con un cepillo de dientes suave utilizando una técnica de cepillado bajo modificada y una limpieza interdental una vez al día con hilo dental y cepillos interdentales para espacios amplios de troneras interproximales.
   • El desbridamiento supragingival y subgingival de toda la boca se realizó utilizando un dispositivo ultrasónico4 con puntas de raspado supragingival seguido de curetas universales y de Gracey5 para un desbridamiento subgingival adecuado. Se utilizó anestesia local6 para comodidad del paciente siempre que fue necesario.
   • Después de 48 horas desde la última visita de instrumentación periodontal, se llamó a los pacientes para registrar los parámetros clínicos iniciales y recolectar la muestra de GCF inicial, luego la aplicación local del medicamento.
2. Muestreo de líquido crevicular gingival:

Se recolectaron muestras de líquido crevicular gingival (GCF) de treinta y dos (32) sitios seleccionados, uno en cada paciente; Los sitios seleccionados se aislaron usando rollos de algodón y se secaron suavemente. Se insertó una tira de papel estándar7 en el surco hasta que se sintió resistencia durante 30 segundos y luego se retiró, después de la recolección del líquido gingival, las tiras se colocaron en tubos Eppendorf estériles que contenían 100 ul de tampón fosfato PH 7,4 y se almacenaron a -20 o C hasta el momento de análisis.

Las muestras de GCF se almacenaron a -20 C hasta su posterior análisis después de recolectar todas las muestras al inicio, 1 mes y 3 meses de duración para todos los pacientes para la evaluación biológica.

1- intervenciones:

Después de recolectar muestras del GCF, se lleva a cabo la aplicación de las intervenciones; ya sea propóleo o placebo según la secuencia aleatoria.

Se llenó una microjeringa9 estéril de 1 ml con el medicamento y luego se inyectó con una punta de plástico en el surco, llenando toda el área interdental.

1- Parámetros clínicos:

Todos los parámetros periodontales clínicos se evaluaron al inicio del estudio, después de 3 y 6 meses.

Se evaluaron preoperatoriamente los siguientes parámetros:

1. Nivel de apego clínico (CAL).(Ramfjord 1967)
2. Profundidad de sondeo (PD). (Listgarten 1980)
3. Índice gingival (IG) (Löe 1967)).
4. Índice de placa (PI). (Loé 1964)

1. Nivel de apego clínico (CAL) (Ramfjord, 1967):

   CAL se midió como la distancia entre los puntos de referencia fijos, es decir, CEJ hasta la base de la bolsa y se registró manualmente para seis sitios en cada diente.

   o Se registraron dos parámetros referentes a CAL:

   - CAL medio: se midió el CAL para cada paciente (CAL total en todos los sitios/número de superficies).

   - Sitio de CAL medio más alto: se registró la medida de pérdida de inserción clínica más alta para cada paciente y se calculó la media del CAL más alto para cada grupo, y esto se consideró como el resultado primario.

2. Profundidad de la bolsa periodontal (PPD) (Listgarten, 1980):

   Para medir la PPD, se insertó la sonda paralela al eje longitudinal del diente para alcanzar el punto más profundo de la bolsa, y la distancia entre la base de la bolsa y el margen gingival se registró manualmente con precisión milimétrica. Se registraron seis lecturas para cada diente.

   o Se registraron dos parámetros relacionados con el PPD:

   - PPD media: Se midió el PPD para cada paciente (PD total/número de superficies).

   - PPD media más profunda: se registró la medida de la bolsa más profunda para cada paciente y se calculó la media de la bolsa más profunda para cada grupo.

3. Índice gingival (IG) (Löe 1967)):

   Los criterios gingivales se evaluaron mediante la siguiente puntuación:

   • 0 = encía normal.

   • 1 = inflamación leve: ligero cambio de color, ligero edema, sin sangrado al sondaje.

   • 2 = inflamación moderada: enrojecimiento, edema y vidriado o sangrado al sondaje.

   • 3 = inflamación severa: enrojecimiento y edema marcados, tendencia al sangrado espontáneo, ulceración.

     • El GI se midió en dos superficies de los dientes (bucal y lingual) y se tomó una media para todos los dientes y se registró para cada paciente.
4. Índice de placa (PI) (Loe 1964)):

Los depósitos de placa en la superficie de los dientes se evaluaron y calificaron de la siguiente manera:

• 0=Sin placa
• 1= Una película de placa adherida al margen gingival libre y zona adyacente del diente. La placa puede verse in situ sólo después de la aplicación de una solución reveladora o utilizando la sonda en la superficie del diente.
• 2= ​​Acumulación moderada de depósitos blandos dentro de la bolsa gingival, o el diente y el margen gingival que se pueden ver a simple vista.

• 3= Abundancia de materia blanda dentro de la bolsa gingival y/o sobre el diente y margen gingival.

  • El PI se midió en dos superficies de los dientes (bucal y lingual) y se tomó una media para todos los dientes y se registró para cada paciente.

Evaluación biomecánica cuantitativa:

El área examinada se secará con una suave corriente de aire y se aislará con rollos de algodón para evitar la contaminación con saliva. A continuación, con unas pinzas esterilizadas se insertará un papel perio en el bolsillo seleccionado y se dejará in situ durante 30 segundos. El papel Perio se coloca en tubos Eppendorf estériles que contienen 100 ul de tampón fosfato PH 7,4 y se almacenan a -20 o C hasta el momento del análisis.

Las muestras se analizarán para evaluar el nivel de prostaglandina E2 (PGE2) mediante el uso de kits ELISA disponibles comercialmente siguiendo las instrucciones del fabricante. Para todos los pacientes, se tomarán y analizarán muestras de líquido crevicular gingival (GCF) al inicio del estudio y tres meses después del tratamiento periodontal.