Hodnocení lokálně dodávaných propolisových gelů u parodontitidy

Třicet dva vhodných pacientů s parodontitidou stupně II a stupně B bylo náhodně rozděleno do 2 skupin:

• Skupina 1 (intervenční skupina) byla léčena SRP v kombinaci s intrasulkulární aplikací 1% propolisového gelu.
• Skupina 2 (kontrolní skupina) byla léčena SRP v kombinaci s intrasulkulární aplikací placeba gelu.

Kritéria způsobilosti:

Pacienti byli vybráni podle následujících kritérií:

Kritéria pro zařazení

1. Obě pohlaví ve věku 30-50 let
2. Systémově zdraví pacienti byli klasifikováni jako ASA třídy I, II, jak dokládá (modifikovaný Cornellův lékařský index)
3. Pacienti s parodontitidou II. stupně, stupně B, podle světového workshopu o klasifikaci onemocnění a stavů parodontu a periimplantátu z roku 2017. Interdentální CAL v místě největší hloubky 3–4 mm, krvácení při sondování (BOP), maximální PD ≤ 5 mm a radiografický horizontální úbytek kostní hmoty související s koronální třetinou kořene (15 %–33 %), bez anamnézy periodontální terapie nebo užívání antibiotik v předchozích 6 měsících
4. Pacient bez anamnézy periodontální terapie nebo užívání antibiotik nebo protizánětlivých látek v předchozích 6 měsících.
5. Pacient ochotný dodržovat pokyny pro ústní hygienu. Kritéria vyloučení

1. Pacienti se známou alergií na propolis.
2. Kuřáci nebo pacienti s alkoholem.
3. Březí a kojící samice

Návrh studie, randomizace a zaslepení:

Tato studie byla navržena jako randomizovaná, kontrolovaná, 2-paralelní, trojitě zaslepená klinická studie s jedním centrem.

Třicet dva vhodných pacientů s parodontitidou stupně II a stupně B bylo náhodně rozděleno do 2 skupin:

• Skupina 1 (intervenční skupina) byla léčena SRP v kombinaci s intrasulkulární aplikací 1% propolisového gelu.
• Skupina 2 (kontrolní skupina) byla léčena SRP v kombinaci s intrasulkulární aplikací placeba gelu.

Účastníci byli náhodně rozděleni tak, aby dostávali léčivou formuli Propolis nebo Placebo pomocí randomizační procedury s poměrem alokace 1:1. Počítačem generovaný seznam randomizace pomocí randomizer.org webovou stránku provedl spolusuper, který se nepodílel na náboru za účelem utajení Utajení přidělení bylo dosaženo spolusupervizorem (D. A.), který měl seznam randomizace, a byl kontaktován telefonicky po potvrzení způsobilosti účastníka k být přiděleny buď skupině propolisu nebo skupině placeba podle náhodné sekvence známé spoluvedoucímu.

Současná studie byla trojitě zaslepená klinická studie. Zaslepení zahrnovalo pacienty, hlavního zkoušejícího a hodnotitele výsledků.

Pacienti, kteří splnili kritéria způsobilosti, byli klinicky hodnoceni pro následující klinické parametry pomocí sondy University of North Carolina (UNC15)1 (obrázek 2). Klinické parametry byly zaznamenány do online barevného periodontálního diagramu oddělením parodontologie, University of Bern 20102 (

Zásahy:

Gelový přípravek propolisu a placeba

• 100 ml placeba gelu bylo připraveno smícháním 3,344 g sodné soli karboxymethylcelulózy (CMC; El Nasr Pharmaceutical Chemicals Co., Egypt).
• 200 mg sodné soli methylhydroxybenzoátu (Loba Chemie, Indie) jako konzervačního činidla v 81,77 ml dvakrát destilované vody (dDW).
• 18,22 ml ethanolu čistoty pro HPLC (Merck, Německo) za stálého míchání přes noc, aby se zajistilo úplné rozpuštění CMC.
• Pro přípravu 100 ml gelu s propolisovým extraktem byl extrahován 1 g propolisu (Imtnan, Egypt) pomocí 18,22 ml ethanolu.
• poté bylo k ethanolovému extraktu přidáno 10 g propylenglykolu pro zvýšení jeho rozpustnosti ve vodné fázi.
• Propolisový gel byl poté připraven stejným způsobem jako placebo gel přidáním 3,344 g CMC rozpuštěného ve vodě k výše uvedené směsi a doplnění celkové hmotnosti na 100 g pomocí destilované vody .

Gel byl naplněn do 20 injekčních stříkaček (5 ml) a uchováván v chladničce.

Protokol léčby:

1. Fáze I periodontální terapie a periodontální mapování:

   • Počáteční vyšetření bylo provedeno včetně sondování plných úst pomocí parodontální sondy UNC15 a následně periapikálního radiografického vyšetření pro vybraná místa (PPD ≤5 mm).
   • Motivace a výchova pacientů ke správné ústní hygieně zahrnovala čištění zubů dvakrát denně měkkým zubním kartáčkem s použitím modifikované techniky čištění basů a jednou denně čištění mezizubních prostor dentální nití a mezizubními kartáčky pro široké mezizubní prostory.
   • Svrchní a subgingivální débridement plných úst byl proveden pomocí ultrazvukového zařízení4 se supragingiválními škálovacími hroty následovanými univerzálními a Graceyho kyretami 5 pro správný subgingivální debridement. Lokální anestezie6 byla použita pro pohodlí pacienta, kdykoli to bylo potřeba.
   • Po 48 hodinách od poslední návštěvy periodontálního instrumentária byli pacienti odvoláni k zaznamenání základních klinických parametrů a odebrání základního vzorku GCF a poté lokální aplikace léku.
2. Odběr vzorků gingivální štěrbinové tekutiny:

Vzorky gingivální krevikulární tekutiny (GCF) byly odebrány z třiceti dvou (32) vybraných míst, po jednom od každého pacienta; vybraná místa byla izolována pomocí bavlněných smotků a šetrně vysušena. Standardní papírový proužek7 byl vložen do sulku, dokud nebyl pociťován odpor po dobu 30 sekund, a poté odstraněn, po odběru gingivální tekutiny byly proužky umístěny do sterilních Eppendorfových zkumavek obsahujících 100 ul fosfátového pufru PH 7,4 a skladovány při -20 °C do doby analýza.

Vzorky GCF byly skladovány při -20 °C až do další analýzy po odebrání všech vzorků ve výchozím stavu, 1 měsíc a 3 měsíce pro všechny pacienty pro biologické hodnocení.

1- zásahy:

Po odběru vzorků GCF následuje aplikace intervencí; buď propolis nebo placebo podle náhodného pořadí.

Sterilní 1ml mikrostříkačka9 byla naplněna léčivem a poté byla vstříknuta pomocí plastové špičky do sulcus, čímž byla vyplněna celá mezizubní oblast

1- Klinické parametry:

Všechny klinické parametry parodontu byly hodnoceny na začátku, po 3 měsících a 6 měsících.

Předoperačně byly hodnoceny následující parametry:

1. Úroveň klinického připojení (CAL). (Ramfjord 1967)
2. Hloubka snímání (PD). (Listgarten 1980)
3. Gingivální index (GI) (Löe 1967)).
4. Index plaku (PI). (Loe 1964)

1. Úroveň klinického připojení (CAL) (Ramfjord, 1967):

   CAL byla měřena jako vzdálenost mezi pevnými referenčními body, tj. CEJ k základně kapsy, a zaznamenána ručně pro šest míst u každého zubu.

   o Byly zaznamenány dva parametry týkající se CAL:

   - Průměrná CAL: CAL byla změřena pro každého pacienta (celková CAL na všech místech/počet povrchů).

   - Průměrné místo nejvyšší CAL: U každého pacienta byla zaznamenána nejvyšší míra klinické ztráty přilnutí a pro každou skupinu byl vypočten průměr nejvyšší CAL, což bylo považováno za primární výsledek

2. Hloubka periodontální kapsy (PPD) (Listgarten, 1980):

   Za účelem měření PPD byla sonda vložena rovnoběžně s dlouhou osou zubu, aby dosáhla nejhlubšího bodu kapsy, a vzdálenost mezi základnou kapsy a okrajem dásně byla zaznamenána ručně s přesností na milimetr. Pro každý zub bylo zaznamenáno šest měření.

   o Byly zaznamenány dva parametry týkající se PPD:

   - Průměrná PPD: PPD byla měřena pro každého pacienta (celková PD/počet povrchů).

   - Průměrná nejhlubší PPD: U každého pacienta byla zaznamenána míra nejhlubší kapsy a pro každou skupinu byl vypočítán průměr nejhlubší kapsy.

3. Gingivální index (GI) (Löe 1967)):

   Givální kritéria byla hodnocena pomocí následujícího skóre:

   • 0 = normální gingivální.

   • 1 = mírný zánět: mírná změna barvy, mírný edém, žádné krvácení při sondování.

   • 2 = střední zánět: zarudnutí, edém a zasklívání nebo krvácení při sondování.

   • 3 = těžký zánět: výrazné zarudnutí a edém, sklon ke spontánnímu krvácení, ulcerace.

     • GI byl měřen na dvou površích zubů (bukální a lingvální) a byl vzat průměr pro všechny zuby a zaznamenán pro každého pacienta.
4. Index plaku (PI) (Loe 1964)):

Usazeniny plaku na povrchu zubů byly hodnoceny a hodnoceny následovně:

• 0 = Žádný plak
• 1= Film plaku ulpívající na volném gingiválním okraji a přilehlé oblasti zubu. Plak lze vidět in situ pouze po aplikaci odhalovacího roztoku nebo pomocí sondy na povrch zubu.
• 2= ​​Střední nahromadění měkkých usazenin v gingivální kapse nebo zubu a okraji dásně, které lze vidět pouhým okem.

• 3= Množství měkké hmoty v gingivální kapse a/nebo na zubu a okraji dásně.

  • PI byl měřen na dvou površích zubů (bukální a lingvální) a byl vzat průměr pro všechny zuby a zaznamenán pro každého pacienta

Kvantitativní biomechanické hodnocení:

Vyšetřovaná oblast bude vysušena mírným proudem vzduchu a izolována bavlněnými smotky, aby se zabránilo kontaminaci slinami. Dále se sterilní pinzetou vloží jeden perio papír do vybrané kapsy a nechá se na místě po dobu 30 sekund. Perio papír se umístí do sterilních Eppendorfových zkumavek obsahujících 100 ul fosfátového pufru PH 7,4 a skladuje se při -20 °C do doby analýzy.

Vzorky budou analyzovány k posouzení hladiny prostaglandinu E2 (PGE2) pomocí komerčně dostupných souprav ELISA podle pokynů výrobce. Všem pacientům budou odebrány a analyzovány vzorky gingivální krevikulární tekutiny (GCF) na začátku a tři měsíce po periodontální léčbě.