リポ蛋白(a)の動脈硬化、内皮機能および心筋変形への影響 (Lpa_endo)

1. リポプロテイン(a)、またはLp(a)は、構造的にLDL（低密度リポプロテイン）に似ていますが、アポリポプロテイン(a)と呼ばれる追加のタンパク質を運ぶリポプロテインの一種です。 最近のデータでは、Lp(a)は冠動脈疾患、脳卒中、大動脈弁狭窄症などの心血管疾患の素因となる危険因子であると確立されています。 Lp(a)の高値は、動脈硬化を促進することでこれらの状態に寄与します。 そのレベルは主に遺伝的に決定され、食事や生活習慣の影響は最小限です。 これにより、特に冠動脈疾患の家族歴を持つ個人や、脂質レベルが正常にもかかわらず早期に心血管問題を経験する患者において、心血管リスクを評価する上で重要な因子となっています。

   Lp(a)レベルは大きく変動する可能性がありますが、心血管リスクが増加する一般的に受け入れられている閾値は50 mg/dL（または125 nmol/L）です。 この限界を超えるレベルを持つ個人は、心血管イベントのリスクが高くなります。 一般人口の20〜30％がLp(a)レベルが高いと推定されており、これは一般的な危険因子となっています。 現在、Lp(a)レベルを特異的に標的とする広く利用可能な治療法はありませんが、PCSK9阻害剤やインクリシランは臨床試験で有望な結果を示しています。

2. 研究の目的 現在、Lp(a)が動脈硬化、内皮機能、左心房および左心室の変形に及ぼす影響に関する文献的資料は不十分です。

   本研究の主な目的は、6ヶ月の追跡期間におけるLp(a)レベルが動脈硬化、内皮機能、左心房（LA）および左心室（LV）の変形に及ぼす影響を調査することです。

   副次的に、本研究では以下を調査します：

   • a) 心血管死亡、急性心筋梗塞、急性脳卒中を含む主要心血管有害事象（MACE）の発生率。
   • b) MACE発生率と動脈硬化、内皮機能、LA/LV変形のパラメータとの相関。
   • c) 酸化負荷マーカーのレベル。

3. 材料と方法

この観察研究には、「アティコン」総合病院の第2大学心臓病学クリニックの外来を訪れる18〜75歳の成人（性別を問わず）が含まれます。 すべての参加者は同意書に署名します。 各訪問時に、総コレステロール、LDL-C、HDL-C、トリグリセリド、およびLp(a)のレベルを決定するために、完全な病歴、臨床検査、および血液採取が行われます。 参加者は次の3つのグループに分けられます：

• グループA：Lp(a) ≥50 mg/dL、総コレステロール<200 mg/dL
• グループB：Lp(a) <50 mg/dL、総コレステロール>200 mg/dL
• グループC（対照）：Lp(a) <50 mg/dL、総コレステロール<200 mg/dL 除外基準は以下の通りです：1. 自己免疫性/自己炎症性疾患の既往歴、2. 重度の弁膜性心疾患、3. 重度の慢性腎臓病（eGFR<60 ml/min/1.73 m²）、4. 妊娠中、5. 重度の肝機能障害。

各グループにはn ≥ 100人の参加者が予想されます。

各グループに対して、ベースライン時および登録後6ヶ月および12ヶ月後に以下の測定が実施されます：

• 動脈硬化：Complior SP装置を使用した頸動脈-大腿動脈脈波伝播速度（cf-PWV）の測定、およびMobil-O-Graph装置を使用した24時間脈波分析。 脈波伝播速度は動脈硬化評価のゴールドスタンダードです[21,22]。 研究者は2つの非侵襲性圧力センサーを使用して頸動脈および大腿動脈の波形を記録します。 研究者は巻尺を使用して2つの動脈部位間の距離を測定します。 PWVは、距離を波間の伝播時間で割ることによって計算されます（m/s）。 デフォルトのPWV出力値に0.8を乗算した後、PWVの適切な補正が適用されました[22]。 中心収縮期血圧（cSBP、mmHg）および中心拡張期血圧（cDBP、mmHg）はCompliorを使用して測定されます。
• 内皮機能：研究者は、Sidestream Darkfield（SDF）イメージング（Microscan、Glycocheck、Microvascular Health Solutions Inc.、ソルトレイクシティ、ユタ州、米国）を使用して、舌下動脈微小血管（4〜25µmの範囲）の灌流境界領域（PBR）を測定します[18]。 この技術は、非侵襲的方法を使用して内皮グリコカリックスを評価することを可能にします。 PBRは細胞の乏しい層であり、流れる赤血球と血漿の間の相分離が微小血管内腔の表面で生じた結果です。 PBRには、細胞浸透を許容するグリコカリックスの最も内腔側の部分が含まれます。 したがって、PBRの増加は赤血球のグリコカリックスへのより深い浸透と一致し、グリコカリックスバリア特性の喪失を示し、グリコカリックス厚の減少のマーカーとなります。 SDFイメージングを使用した内皮グリコカリックス厚の測定は簡単に実行可能（3分間の持続時間）であり、オペレーターの技能による偏りはありません。 さらに、標準化された方法論を持ち、複数のサンプル部位（>3,000の舌下微小血管セグメント）の測定を提供し、非常に良好な再現性があり、したがって欧州心臓病学会末梢循環作業部会によって内皮完全性を評価する有効な方法として提案されています。 PBR測定は、血管セグメントの赤血球充填（ヘマトクリット）に依存しません。なぜなら、ソフトウェアは充填率が50％以上の血管セグメントのみを含むからです[9,18]。 したがって、血管セグメントは、21個のラインマーカーのうち少なくとも11個が赤血球の存在に対して陽性信号を持つ場合にのみ選択されます。 したがって、PBR値はヘマトクリットに依存せず、循環赤血球によりアクセスしやすい損傷したグリコカリックスを反映します。
• 心臓変形：すべての参加者において、研究者は専用ソフトウェア（EchoPac 206、GE Healthcare）を使用して、標準的な二次元（2D）取得（フレームレート：70-80/秒）から縦方向収縮期ひずみを測定します。 全体的縦方向ひずみ（GLS）は、心尖部チャンバー視野（4、2、および3チャンバー視野）から画像化された17 LVセグメントモデルを使用して計算されます。 基底、中心室、および心尖部セグメントでの心筋変形はGLSに平均化されました。 すべての変数は、3つの連続する心周期で測定された平均値を表します。 GLSの観察者間および観察者内変動は、それぞれ8％および5％でした。 LA機能は、経胸壁心エコー法スペックルトラッキングひずみイメージングを使用して評価されます。 スペックルトラッキングアルゴリズムが、心尖部4チャンバーおよび2チャンバー視野のLA心筋に適用されました。 関心領域の幅はLA壁の厚さに調整され、心周期はQRS開始を示すことによって区切られました。 LAコンプライアンスの指標であるLA貯蔵ひずみは、QRS開始を基準点として、心室収縮期におけるピーク縦方向ひずみ（心尖部4チャンバーおよび2チャンバー視野のすべての12セグメントの平均）として測定されました。 解剖学的Mモードによって僧帽弁および大動脈弁の開閉および心房収縮を定義した後、2Dひずみによって得られたLA縦方向ひずみが、以下の3つの心房相（貯蔵、伝導、および心房収縮）で測定されます：貯蔵期は僧帽弁閉鎖から僧帽弁開放までの間隔として定義され、伝導期は僧帽弁開放から解剖学的Mモードによって評価される心房収縮開始までの間隔として定義され、収縮期は解剖学的Mモードによって評価される心房収縮開始から僧帽弁閉鎖までの間隔として定義されます。 その後、各期間の心房変形は、それぞれのひずみの差（終了時の値から開始時の値を引いた値）を測定することによって計算されました。
• 酸化負荷：酸化ストレスのマーカーとしてのマロンジアルデヒド（MDA）およびタンパク質カルボニル（PCs）レベルの測定。 MDAは、脂質過酸化の比色測定用の市販キット（Oxford Biomedical Research、ロチェスター・ヒルズ、ミシガン州）を使用して分光光度法により推定されます（測定範囲、1-20 nmol/l）。 PCs（nmol/mL）の測定には、研究者はPCsの2,4-ジニトロフェニルヒドラジン誘導体の分光光度法評価を使用しました。
• 統計分析：統計分析は、SPSSバージョン29（IBM SPSS Statistics, Inc.、シカゴ、イリノイ州）を使用して実施されます。 すべての連続変数は、コルモゴロフ-スミルノフおよびシャピロ-ウィルク正規性検定によって示されるように、正規分布している場合、平均±SDとして提示されます。 非正規分布の場合、順位への変換が行われます。 名義変数はパーセンテージとして提示されます。 相関分析は、データ分布に基づいてスピアマンまたはピアソン相関検定を介して実行されます。 カテゴリ変数は、適切にカイ二乗検定またはフィッシャーの正確検定によって分析されます。 反復測定ANOVAは、（1）前述の測定を開始時、6ヶ月時、および12ヶ月時（これは被験者内因子と見なされます）および（2）異なるグループの差（被験者間因子として）に対して使用されます。 事後比較はボンフェローニ補正で実施されます。 異なる測定期間間のF値およびそれぞれのP値が計算されます。 さらに、バイオマーカーの測定時間と調査対象グループ間のF値およびP値が推定されます。 球面性の仮定（マウクリ検定によって評価される）が満たされない場合、グリーンハウス-ガイサー、フイン-フェルト、またはロワーバウンド補正が使用されます。 介入後の調査変数のパーセント変化も一元配置分散分析によって比較されます。 すべての統計検定は両側であり、p値<0.05が統計的に有意と見なされます。