脂蛋白(a)对动脉僵硬度、内皮功能和心肌变形的影响 (Lpa_endo)

1. 引言 脂蛋白(a)，或称Lp(a)，是一种在结构上与低密度脂蛋白（LDL）相似，但携带一种称为载脂蛋白(a)的额外蛋白质的脂蛋白。 近期数据证实Lp(a)是心血管疾病（如冠状动脉疾病、中风和主动脉瓣狭窄）的易感风险因素。 Lp(a)水平升高通过促进动脉粥样硬化而导致这些疾病。 其水平主要由遗传决定，饮食和生活方式的影响微乎其微。 这使其成为评估心血管风险的重要因素，尤其对于有冠状动脉疾病家族史的个体，或尽管血脂水平正常却出现早期心血管问题的患者。

   虽然Lp(a)水平可能差异很大，但普遍接受的心血管风险增加阈值为50 mg/dL（或125 nmol/L）。 水平超过此限值的个体发生心血管事件的风险更高。 据估计，一般人群中20-30%的人Lp(a)水平升高，使其成为一种常见的风险因素。 目前，尚无广泛可用的专门针对Lp(a)水平的治疗方法，尽管PCSK9抑制剂和inclisiran在临床试验中已显示出有希望的结果。

2. 研究目的 目前关于Lp(a)对动脉僵硬度、内皮功能以及左心房和左心室形变影响的文献资料不足。

   本研究的主要目的是在6个月的随访期内，研究Lp(a)水平对动脉僵硬度、内皮功能以及左心房（LA）和左心室（LV）形变的影响。

   其次，本研究将调查：

   • a) 主要不良心血管事件（MACE）的发生率，包括心血管死亡、急性心肌梗死和急性中风。
   • b) MACE发生率与动脉僵硬度、内皮功能和LA/LV形变参数之间的相关性。
   • c) 氧化负荷标志物的水平。
3. 材料与方法

这项观察性研究将纳入访问“Attikon”总医院第二大学心脏病学门诊部的18-75岁成年人（不限性别）。 所有参与者将签署知情同意书。 每次访视时，将进行完整的病史采集、临床检查和血液采集，以测定总胆固醇、LDL-C、HDL-C、甘油三酯和Lp(a)的水平。 参与者将被分为三组：

• 组A：Lp(a) ≥50 mg/dL 且 总胆固醇 <200 mg/dL
• 组B：Lp(a) <50 mg/dL 且 总胆固醇 >200 mg/dL
• 组C（对照组）：Lp(a) <50 mg/dL 且 总胆固醇 <200 mg/dL

排除标准包括：1. 自身免疫/自身炎症性疾病史，2. 严重瓣膜性心脏病，3. 严重慢性肾脏病（eGFR <60 ml/min/1.73 m²），4. 活动性妊娠，5. 严重肝功能不全。

预计每组参与者数 n ≥ 100。

将在基线时以及入组后6个月和12个月对每组进行以下测量：

• 动脉僵硬度：使用Complior SP设备测定颈-股动脉脉搏波传导速度（cf-PWV），并使用Mobil-O-Graph设备进行24小时脉搏波分析。 脉搏波传导速度是评估动脉僵硬度的金标准[21,22]。 研究者将使用两个无创压力传感器记录颈动脉和股动脉波形。 研究者将使用卷尺测量两个动脉部位之间的距离。 PWV通过距离除以波间传播时间（m/s）计算。 在将默认PWV输出值乘以0.8后，应用了适当的PWV校正[22]。 将使用Complior测量中心收缩压（cSBP, mmHg）和中心舒张压（cDBP, mmHg）。
• 内皮功能：研究者将使用侧流暗场（SDF）成像（Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., 美国犹他州盐湖城）测量舌下动脉微血管（范围4至25µm）的灌注边界区域（PBR）[18]。 该技术能够使用无创方法评估内皮糖萼。 PBR是细胞贫乏层，由流动的红细胞与微血管管腔表面的血浆之间的相分离形成。 PBR包括糖萼最靠近管腔的部分，该部分允许细胞渗透。 因此，PBR增加与红细胞更深地渗透入糖萼一致，表明糖萼屏障特性丧失，是糖萼厚度减少的标志。 使用SDF成像测量内皮糖萼厚度易于执行（持续3分钟），且不受操作者技能影响。 此外，它具有标准化的方法学，提供多个采样部位（>3,000个舌下微血管段）的测量，具有非常好的可重复性，因此被欧洲心脏病学会外周循环工作组提议为评估内皮完整性的有效方法。 PBR测量独立于血管段的红细胞填充（血细胞比容），因为软件仅包含填充百分比超过50%的血管段[9,18]。 因此，只有当21个线标记中至少有11个对红细胞存在有阳性信号时，才会选择血管段。 因此，PBR值独立于血细胞比容，反映了更容易被循环红细胞接触的受损糖萼。
• 心脏形变：在所有参与者中，研究者将使用专用软件（EchoPac 206, GE Healthcare）从标准二维（2D）采集（帧率：70-80/秒）测量纵向收缩期应变。 整体纵向应变（GLS）使用从心尖腔切面（4腔、2腔和3腔切面）成像的17段LV模型计算。 基底段、心室中段和心尖段的心肌形变被平均为GLS。 所有变量代表连续三个心动周期测量的平均值。 GLS的观察者间和观察者内变异性分别为8%和5%。 LA功能将使用经胸超声心动图斑点追踪应变成像评估。 将斑点追踪算法应用于心尖4腔和2腔切面的LA心肌。 感兴趣区宽度根据LA壁厚度调整，心动周期通过指示QRS起始点来界定。 LA储库应变，作为LA顺应性的度量，在心室收缩期测量为峰值纵向应变（心尖4腔和2腔切面所有12个节段的平均值），以QRS起始点为参考点。 在通过解剖M型定义二尖瓣和主动脉瓣开放与关闭以及心房收缩后，将通过2D应变获得的LA纵向应变在所有三个心房时相（储库期、导流期和心房收缩期）测量如下：储库期定义为二尖瓣关闭至二尖瓣开放之间的间隔，导流期定义为二尖瓣开放至心房收缩开始（通过解剖M型评估）之间的间隔，收缩期定义为心房收缩开始（通过解剖M型评估）至二尖瓣关闭之间的间隔。 随后，通过测量各时相的应变差值（结束时值减去开始时值）计算每个时相的心房形变。
• 氧化负荷：测定作为氧化应激标志物的丙二醛（MDA）和蛋白质羰基（PCs）水平。 MDA将使用商业试剂盒（Oxford Biomedical Research, Rochester Hills, MI）通过分光光度法估算，该试剂盒用于脂质过氧化的比色测定（测量范围：1-20 nmol/L）。 对于PCs（nmol/mL）的测定，研究者使用了PCs的2,4-二硝基苯肼衍生物的分光光度评估。
• 统计分析：统计分析将使用SPSS 29版（IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL）进行。 所有连续变量，如果呈正态分布（由Kolmogorov-Smirnov和Shapiro-Wilk正态性检验指示），将以均值±标准差表示。 在非正态分布的情况下，将进行秩转换。 名义变量以百分比表示。 相关分析将根据数据分布通过Spearman或Pearson相关性检验进行。 分类变量将根据情况通过卡方检验或Fisher精确检验进行分析。 重复测量方差分析将用于（1）上述变量在开始时、6个月和12个月的测量（这被视为受试者内因素），以及（2）不同组之间的差异（作为受试者间因素）。 事后比较将使用Bonferroni校正进行。 将计算不同测量时间点之间的F值和相应的P值。 此外，将估计生物标志物测量时间与所检查组之间的F值和P值。 当Mauchly检验评估的球形假设不满足时，将使用Greenhouse-Geisser、Huynh-Feldt或Lower-Bound校正。 干预后所检查变量的百分比变化也将通过单因素方差分析进行比较。 所有统计检验均为双尾检验，P值<0.05被认为具有统计学显著性。