Wpływ lipoproteiny (a) na sztywność tętnic, funkcję śródbłonka i deformację mięśnia sercowego (Lpa_endo)

1. Wprowadzenie Lipoproteina(a), czyli Lp(a), to rodzaj lipoproteiny, która jest strukturalnie podobna do LDL (lipoproteiny o niskiej gęstości), ale przenosi dodatkowe białko zwane apolipoproteiną (a). Najnowsze dane ustanawiają Lp(a) jako predysponujący czynnik ryzyka chorób układu sercowo-naczyniowego, takich jak choroba wieńcowa, udar i zwężenie zastawki aortalnej. Podwyższone poziomy Lp(a) przyczyniają się do tych schorzeń poprzez promowanie miażdżycy. Jej poziomy są głównie determinowane genetycznie, z minimalnym wpływem diety i stylu życia. To czyni ją istotnym czynnikiem do oceny ryzyka sercowo-naczyniowego, szczególnie u osób z rodzinnym obciążeniem chorobą wieńcową lub pacjentów doświadczających wczesnych problemów sercowo-naczyniowych pomimo prawidłowych poziomów lipidów.

   Chociaż poziomy Lp(a) mogą się znacznie różnić, ogólnie przyjęty próg zwiększonego ryzyka sercowo-naczyniowego wynosi 50 mg/dL (lub 125 nmol/L). Osoby z poziomami powyżej tego limitu są narażone na większe ryzyko zdarzeń sercowo-naczyniowych. Szacuje się, że 20-30% ogólnej populacji ma podwyższone poziomy Lp(a), co czyni ją powszechnym czynnikiem ryzyka. Obecnie nie ma szeroko dostępnych terapii specyficznie ukierunkowanych na poziomy Lp(a), chociaż inhibitory PCSK9 i inclisiran wykazały obiecujące wyniki w badaniach klinicznych.

2. Cel badania Obecnie istnieje niewystarczająca dokumentacja bibliograficzna dotycząca wpływu Lp(a) na sztywność tętnic, funkcję śródbłonka oraz deformację lewego przedsionka i lewej komory.

   Podstawowym celem tego badania jest zbadanie wpływu poziomów Lp(a) na sztywność tętnic, funkcję śródbłonka oraz deformację lewego przedsionka (LA) i lewej komory (LV) w okresie obserwacji 6-miesięcznej.

   W drugiej kolejności badanie zbada:

   • a) Częstość występowania poważnych niepożądanych zdarzeń sercowo-naczyniowych (MACE), w tym śmierci sercowo-naczyniowej, ostrego zawału mięśnia sercowego i ostrego udaru.
   • b) Korelację między częstością występowania MACE a parametrami sztywności tętnic, funkcji śródbłonka oraz deformacji LA/LV.
   • c) Poziomy markerów obciążenia oksydacyjnego.
3. Materiały i metody

To badanie obserwacyjne obejmie dorosłych w wieku 18-75 lat (niezależnie od płci), którzy odwiedzają poradnie ambulatoryjne 2. Kliniki Kardiologii Uniwersyteckiej w Szpitalu Ogólnym "Attikon". Wszyscy uczestnicy podpiszą formularz zgody. Przeprowadzona zostanie pełna historia medyczna, badanie kliniczne oraz pobranie krwi w celu określenia poziomów cholesterolu całkowitego, LDL-C, HDL-C, trójglicerydów i Lp(a) podczas każdej wizyty. Uczestnicy zostaną podzieleni na trzy grupy:

• Grupa A: Lp(a) ≥50 mg/dL z cholesterolem całkowitym <200 mg/dL
• Grupa B: Lp(a) <50 mg/dL z cholesterolem całkowitym >200 mg/dL
• Grupa C (kontrolna): Lp(a) <50 mg/dL z cholesterolem całkowitym <200 mg/dL Kryteria wykluczenia obejmują: 1. Wywiad chorób autoimmunologicznych/autoimmunologicznych, 2. Ciężką wadę zastawkową serca, 3. ciężką przewlekłą chorobę nerek (eGFR <60 ml/min/1.73 m2), 4. Ciążę aktywną i 5. Ciężkie zaburzenie czynności wątroby.

W każdej grupie przewiduje się n ≥ 100 uczestników.

Następujące pomiary zostaną przeprowadzone dla każdej grupy na początku oraz po 6 i 12 miesiącach od rekrutacji:

• Sztywność tętnic: Określenie prędkości fali tętna szyjno-udowej (cf-PWV) przy użyciu urządzenia Complior SP oraz 24-godzinna analiza fali tętna z urządzeniem Mobil-O-Graph. Prędkość fali tętna jest złotym standardem w ocenie sztywności tętnic [21,22]. Badacze użyją dwóch nieinwazyjnych czujników ciśnienia do rejestracji fal szyjnych i udowych. Badacze zmierzą odległość między dwoma miejscami tętnic za pomocą taśmy mierniczej. PWV oblicza się, dzieląc odległość przez czas przejścia między falami (m/s). Zastosowano odpowiednie korekty PWV, po pomnożeniu domyślnych wartości wyjściowych PWV przez 0,8 [22]. Centralne skurczowe ciśnienie krwi (cSBP, mmHg) i centralne rozkurczowe ciśnienie krwi (cDBP, mmHg) zostaną zmierzone za pomocą Complior.
• Funkcja śródbłonka: Badacze zmierzą region graniczny perfuzji (PBR) podjęzykowych mikronaczyń tętniczych (zakres 4-25 μm) przy użyciu obrazowania Sidestream Darkfield (SDF) (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, Utah, Stany Zjednoczone) [18]. Ta technika umożliwia ocenę śródbłonkowego glikokaliksu przy użyciu metody nieinwazyjnej. PBR jest warstwą ubogą w komórki, która wynika z separacji faz między płynącymi erytrocytami a osoczem na powierzchni światła mikronaczynia. PBR obejmuje najbardziej świetlną część glikokaliksu, która pozwala na penetrację komórek. Zatem zwiększony PBR jest zgodny z głębszą penetracją erytrocytów do glikokaliksu, wskazując na utratę właściwości barierowych glikokaliksu i jest markerem zmniejszonej grubości glikokaliksu. Pomiar grubości śródbłonkowego glikokaliksu przy użyciu obrazowania SDF jest łatwy do wykonania (czas trwania 3 minut) i nie jest obciążony umiejętnościami operatora. Ponadto ma ustandaryzowaną metodologię, zapewnia pomiary wielu miejsc próbkowania (>3 000 segmentów naczyniowych podjęzykowego mikrokrążenia), ma bardzo dobrą powtarzalność i dlatego jest proponowany jako ważna metoda oceny integralności śródbłonka przez Grupę Roboczą Europejskiego Towarzystwa Kardiologicznego ds. Krążenia Obwodowego. Pomiary PBR są niezależne od wypełnienia segmentów naczyń erytrocytami (hematokryt), ponieważ oprogramowanie uwzględnia tylko segmenty naczyń, które mają procent wypełnienia większy niż 50% [9,18]. Stąd segmenty naczyń są wybierane tylko wtedy, gdy co najmniej 11 z 21 znaczników linii ma pozytywny sygnał obecności erytrocytu. Zatem wartości PBR są niezależne od hematokrytu, odzwierciedlając uszkodzony glikokaliks, który jest bardziej dostępny dla krążących erytrocytów.
• Deformacja serca: U wszystkich uczestników badacze zmierzą podłużne odkształcenie skurczowe ze standardowych dwuwymiarowych (2D) akwizycji (częstotliwość klatek: 70-80/sekundę) przy użyciu dedykowanego oprogramowania (EchoPac 206, GE Healthcare). Globalne odkształcenie podłużne (GLS) jest obliczane przy użyciu 17-segmentowego modelu LV obrazowanego z widoków jam serca z wierzchołka (widok 4, 2 i 3 komory). Deformacje mięśnia sercowego w segmentach podstawowych, środkowych komorowych i wierzchołkowych zostały uśrednione do GLS. Wszystkie zmienne reprezentują średnią wartość pomiarów wykonanych w trzech kolejnych cyklach serca. Zmienność międzyobserwacyjna i wewnątrzobserwacyjna GLS wynosiła odpowiednio 8 i 5%. Funkcja LA będzie oceniana przy użyciu przezklatkowego echokardiograficznego obrazowania odkształcenia śledzenia plam. Algorytm śledzenia plam został zastosowany do mięśnia sercowego LA w widokach wierzchołkowych 4- i 2-komorowych. Szerokość obszaru zainteresowania została dostosowana do grubości ściany LA, a cykl serca został wyznaczony przez wskazanie początku QRS. Odkształcenie rezerwuaru LA, metryka podatności LA, było mierzone jako szczytowe odkształcenie podłużne (średnia wszystkich 12 segmentów w widokach wierzchołkowych 4- i 2-komorowych) podczas skurczu komór, przyjmując początek QRS jako punkt odniesienia. Po zdefiniowaniu za pomocą anatomicznego M-mode otwarcia i zamknięcia zastawki mitralnej i aortalnej oraz skurczu przedsionka, odkształcenie podłużne LA, uzyskane przez odkształcenie 2D, będzie mierzone we wszystkich trzech fazach przedsionkowych (rezerwuar, przewód i skurcz przedsionka) w następujący sposób: okres rezerwuaru został zdefiniowany jako odstęp między zamknięciem zastawki mitralnej a otwarciem zastawki mitralnej, okres przewodu jako odstęp między otwarciem zastawki mitralnej a początkiem skurczu przedsionka, oceniany przez anatomiczny M-mode, oraz okres skurczowy jako odstęp między początkiem skurczu przedsionka, ocenianym przez anatomiczny M-mode, a zamknięciem zastawki mitralnej. Następnie deformacja przedsionka każdego okresu została obliczona przez zmierzenie odpowiedniej różnicy odkształcenia (wartości na końcu minus wartości na początku).
• Obciążenie oksydacyjne: Określenie poziomów malondialdehydu (MDA) i karbonylów białkowych (PCs) jako markerów stresu oksydacyjnego. MDA będzie szacowane spektrofotometrycznie z komercyjnym zestawem (Oxford Biomedical Research, Rochester Hills, MI) testu kolorymetrycznego na peroksydację lipidów (zakres pomiarów, 1-20 nmol/L). Do oznaczania PCs (nmol/mL) badacze użyli spektrofotometrycznej oceny pochodnych 2,4-dinitrofenylohydrazyny PCs.
• Analiza statystyczna: Analiza statystyczna zostanie przeprowadzona przy użyciu SPSS wersja 29 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL). Wszystkie zmienne ciągłe będą przedstawione jako średnia ± SD, jeśli są rozłożone normalnie, zgodnie z testami normalności Kolmogorowa-Smirnowa i Shapiro-Wilka. W przypadku rozkładu nienormalnego zostanie wykonana transformacja na rangi. Zmienne nominalne są przedstawione jako procenty. Analiza korelacji zostanie przeprowadzona za pomocą testów korelacji Spearmana lub Pearsona, w zależności od rozkładu danych. Zmienne kategoryczne są analizowane za pomocą testów chi-kwadrat lub dokładnych testów Fishera, w zależności od przypadku. ANOVA dla pomiarów powtarzanych zostanie użyta dla (1) pomiarów wyżej wymienionych na początku, po 6 i po 12 miesiącach (co jest uważane za czynnik wewnątrzpodmiotowy) i (2) również różnic między różnymi grupami, jako czynnik międzygrupowy). Porównania post-hoc zostaną przeprowadzone z korektą Bonferroniego. Zostaną obliczone wartości F i odpowiednie wartości P między różnymi okresami pomiarów. Ponadto zostaną oszacowane wartości F i P między czasem pomiaru biomarkerów a badanymi grupami. Korekty Greenhouse-Geisser, Huynh-Feldt lub Lower-Bound zostaną użyte, gdy założenie sferyczności, oceniane przez test Mauchly'ego, nie zostanie spełnione. Procentowe zmiany badanych zmiennych po interwencji również zostaną porównane za pomocą jednoczynnikowej ANOVA. Wszystkie testy statystyczne są dwustronne, a wartość p < 0,05 jest uważana za statystycznie istotną.