Влияние липопротеина (а) на жесткость артерий, эндотелиальную функцию и деформацию миокарда (Lpa_endo)

1. Введение Липопротеин(а), или Лп(а), представляет собой тип липопротеина, который структурно схож с ЛПНП (липопротеинами низкой плотности), но несёт дополнительный белок, называемый аполипопротеин(а). Недавние данные устанавливают Лп(а) как предрасполагающий фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний, таких как ишемическая болезнь сердца, инсульт и аортальный стеноз. Повышенные уровни Лп(а) способствуют этим состояниям, способствуя атеросклерозу. Его уровни в основном определяются генетически, с минимальным влиянием диеты и образа жизни. Это делает его значимым фактором для оценки сердечно-сосудистого риска, особенно у лиц с семейной историей ишемической болезни сердца или пациентов, испытывающих ранние сердечно-сосудистые проблемы, несмотря на нормальные уровни липидов.

   Хотя уровни Лп(а) могут сильно варьироваться, общепринятый порог для повышенного сердечно-сосудистого риска составляет 50 мг/дл (или 125 нмоль/л). Лица с уровнями выше этого предела подвержены более высокому риску сердечно-сосудистых событий. По оценкам, 20-30% общей популяции имеет повышенные уровни Лп(а), что делает его распространённым фактором риска. В настоящее время нет широко доступных методов лечения, специфически направленных на уровни Лп(а), хотя ингибиторы PCSK9 и инклисиран показали многообещающие результаты в клинических испытаниях.

2. Цель исследования В настоящее время недостаточно библиографической документации относительно влияния Лп(а) на артериальную жёсткость, функцию эндотелия и деформацию левого предсердия и левого желудочка.

   Основная цель данного исследования — изучить влияние уровней Лп(а) на артериальную жёсткость, функцию эндотелия и деформацию левого предсердия (ЛП) и левого желудочка (ЛЖ) в течение 6-месячного периода наблюдения.

   Вторично исследование будет изучать:

   • а) Частоту основных неблагоприятных сердечно-сосудистых событий (MACE), включая сердечно-сосудистую смерть, острый инфаркт миокарда и острый инсульт.
   • б) Корреляцию между частотой MACE и параметрами артериальной жёсткости, функции эндотелия и деформации ЛП/ЛЖ.
   • в) Уровни маркеров окислительной нагрузки.
3. Материалы и методы

В это обсервационное исследование будут включены взрослые в возрасте 18-75 лет (независимо от пола), посещающие амбулаторные клиники 2-й университетской кардиологической клиники в общей больнице «Аттикон». Все участники подпишут форму согласия. На каждом визите будет проводиться полный сбор анамнеза, клиническое обследование и забор крови для определения уровней общего холестерина, ЛПНП-Х, ЛПВП-Х, триглицеридов и Лп(а). Участники будут разделены на три группы:

• Группа А: Лп(а) ≥50 мг/дл с общим холестерином <200 мг/дл
• Группа В: Лп(а) <50 мг/дл с общим холестерином >200 мг/дл
• Группа С (Контрольная): Лп(а) <50 мг/дл с общим холестерином <200 мг/дл Критерии исключения включают: 1. История аутоиммунного/аутоиммунного заболевания, 2. Тяжёлое клапанное заболевание сердца, 3. Тяжёлая хроническая болезнь почек (СКФ <60 мл/мин/1,73 м²), 4. Активная беременность и 5. Тяжёлое нарушение функции печени.

В каждой группе ожидается ≥100 участников.

Следующие измерения будут проводиться для каждой группы на исходном уровне, а также через 6 и 12 месяцев после включения:

• Артериальная жёсткость: Определение скорости пульсовой волны по сонно-бедренному участку (cf-PWV) с использованием устройства Complior SP и 24-часовой анализ пульсовой волны с устройством Mobil-O-Graph. Скорость пульсовой волны является золотым стандартом для оценки артериальной жёсткости [21,22]. Исследователи будут использовать два неинвазивных датчика давления для записи сонной и бедренной волн. Исследователи измерят расстояние между двумя артериальными точками с помощью рулетки. PWV рассчитывается путём деления расстояния на время прохождения между волнами (м/с). Были применены соответствующие поправки PWV после умножения стандартных значений вывода PWV на 0,8 [22]. Центральное систолическое артериальное давление (cSBP, мм рт.ст.) и центральное диастолическое артериальное давление (cDBP, мм рт.ст.) будут измеряться с использованием Complior.
• Функция эндотелия: Исследователи будут измерять область перфузионной границы (PBR) субъязычных артериальных микрососудов (диапазон от 4 до 25 мкм) с использованием визуализации бокового тёмного поля (SDF) (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Солт-Лейк-Сити, Юта, США) [18]. Этот метод позволяет оценить эндотелиальный гликокаликс, используя неинвазивный метод. PBR — это бедный клетками слой, который возникает в результате фазового разделения между текущими эритроцитами и плазмой на поверхности просвета микрососуда. PBR включает самую просветную часть гликокаликса, которая позволяет проникновение клеток. Таким образом, увеличенный PBR соответствует более глубокому проникновению эритроцитов в гликокаликс, указывая на потерю барьерных свойств гликокаликса и является маркером уменьшения толщины гликокаликса. Измерение толщины эндотелиального гликокаликса с использованием SDF-визуализации легко выполнить (продолжительность 3 минуты) и не зависит от навыков оператора. Более того, он имеет стандартизированную методологию, предоставляет измерения множества участков выборки (>3 000 сосудистых сегментов субъязычной микрососудистой сети), обладает очень хорошей воспроизводимостью и поэтому предлагается в качестве достоверного метода оценки целостности эндотелия Рабочей группой Европейского общества кардиологов по периферическому кровообращению. Измерения PBR не зависят от заполнения сегментов сосудов эритроцитами (гематокрит), потому что программное обеспечение включает только сегменты сосудов, имеющие процент заполнения более 50% [9,18]. Следовательно, сегменты сосудов выбираются только тогда, когда по крайней мере 11 из 21 маркера линии имеют положительный сигнал на наличие эритроцита. Таким образом, значения PBR не зависят от гематокрита, отражая повреждённый гликокаликс, который более доступен для циркулирующих эритроцитов.
• Сердечная деформация: У всех участников исследователи будут измерять продольную систолическую деформацию из стандартных двухмерных (2D) записей (частота кадров: 70-80/секунду) с использованием специализированного программного обеспечения (EchoPac 206, GE Healthcare). Глобальная продольная деформация (GLS) рассчитывается с использованием 17-сегментной модели ЛЖ, полученной из апикальных видов камер (4-, 2- и 3-камерные виды). Миокардиальные деформации в базальных, средних желудочковых и апикальных сегментах усреднялись до GLS. Все переменные представляют собой средние значения измерений, взятых в трёх последовательных сердечных циклах. Меж- и внутри-наблюдательная вариабельность GLS составляла 8 и 5% соответственно. Функция ЛП будет оцениваться с использованием трансторакальной эхокардиографической визуализации деформации с отслеживанием спеклов. Алгоритм отслеживания спеклов применялся к миокарду ЛП в апикальных 4- и 2-камерных видах. Ширина области интереса была скорректирована по толщине стенки ЛП, а сердечный цикл был обозначен указанием начала QRS. Деформация резервуара ЛП, показатель податливости ЛП, измерялась как пиковая продольная деформация (среднее значение всех 12 сегментов в апикальных 4- и 2-камерных видах) во время систолы желудочков, принимая начало QRS в качестве точки отсчёта. После определения с помощью анатомического М-режима открытия и закрытия митрального и аортального клапанов, а также сокращения предсердия, продольная деформация ЛП, полученная с помощью 2D-деформации, будет измеряться во всех трёх фазах предсердия (резервуар, проводник и сокращение предсердия) следующим образом: период резервуара определялся как интервал между закрытием митрального клапана и открытием митрального клапана, период проводника как интервал между открытием митрального клапана и началом сокращения предсердия, как оценено анатомическим М-режимом, и сократительный период как интервал между началом сокращения предсердия, как оценено анатомическим М-режимом, и закрытием митрального клапана. Впоследствии деформация предсердия каждого периода рассчитывалась путём измерения соответствующей разницы деформации (значения в конце минус значения в начале).
• Окислительная нагрузка: Определение уровней малонового диальдегида (MDA) и карбонилов белков (PCs) в качестве маркеров окислительного стресса. MDA будет оцениваться спектрофотометрически с использованием коммерческого набора (Oxford Biomedical Research, Рочестер Хиллс, Мичиган) колориметрического анализа на перекисное окисление липидов (диапазон измерений, 1-20 нмоль/л). Для определения PCs (нмоль/мл) исследователи использовали спектрофотометрическую оценку 2,4-динитрофенилгидразиновых производных PCs.
• Статистический анализ: Статистический анализ будет проводиться с использованием SPSS версии 29 (IBM SPSS Statistics, Inc., Чикаго, Иллинойс). Все непрерывные переменные будут представлены как среднее ± стандартное отклонение, если они распределены нормально, как указано тестами нормальности Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. В случае ненормального распределения будет выполнено преобразование в ранги. Номинальные переменные представлены в процентах. Корреляционный анализ будет проводиться с помощью тестов корреляции Спирмена или Пирсона, в зависимости от распределения данных. Категориальные переменные анализируются с помощью критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера, в зависимости от ситуации. Дисперсионный анализ для повторных измерений будет использоваться для (1) измерений вышеупомянутого в начале, через 6 и через 12 месяцев (что считается внутрисубъектным фактором) и (2) также разницы между разными группами, как межсубъектный фактор). Пост-хок сравнения будут проводиться с поправкой Бонферрони. Будут рассчитаны F и соответствующие значения P между разными временными периодами измерений. Кроме того, будут оценены F и P значения между временем измерения биомаркеров и исследуемыми группами. Поправки Гринхауса-Гейссера, Хюна-Фельдта или Нижней границы будут использоваться, когда предположение сферичности, оцененное тестом Мочли, не будет выполнено. Процентные изменения исследуемых переменных после вмешательства также будут сравниваться с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Все статистические тесты двусторонние, и значение p < 0,05 считается статистически значимым.