Effekten av Lipoprotein (a) på arteriell stivhet, endotelfunksjon og myokard deformasjon (Lpa_endo)

1. Introduksjon Lipoprotein(a), eller Lp(a), er en type lipoprotein som er strukturelt lik LDL (lavtetthetslipoprotein), men bærer et ekstra protein kalt apolipoprotein (a). Nylige data etablerer Lp(a) som en predisponerende risikofaktor for kardiovaskulære sykdommer, som koronar arterie sykdom, hjerneslag og aortaklaffstenose. Forhøyede nivåer av Lp(a) bidrar til disse tilstandene ved å fremme aterosklerose. Nivåene bestemmes primært genetisk, med minimal påvirkning fra kosthold og livsstil. Dette gjør det til en betydelig faktor for å vurdere kardiovaskulær risiko, spesielt hos personer med familiehistorikk av koronar arterie sykdom eller pasienter som opplever tidlige kardiovaskulære problemer til tross for normale lipidnivåer.

   Mens Lp(a)-nivåer kan variere stort, er den generelt aksepterte terskelen for økt kardiovaskulær risiko 50 mg/dL (eller 125 nmol/L). Personer med nivåer over denne grensen har høyere risiko for kardiovaskulære hendelser. Det estimeres at 20-30 % av den generelle befolkningen har forhøyede Lp(a)-nivåer, noe som gjør det til en vanlig risikofaktor. For øyeblikket er det ingen bredt tilgjengelige behandlinger som spesifikt retter seg mot Lp(a)-nivåer, selv om PCSK9-hemmere og inclisiran har vist lovende resultater i kliniske studier.

2. Formålet med studien Det er for tiden utilstrekkelig bibliografisk dokumentasjon angående effekten av Lp(a) på arteriell stivhet, endotelfunksjon og deformasjon av venstre atrium og venstre ventrikkel.

   Hovedformålet med denne studien er å undersøke effekten av Lp(a)-nivåer på arteriell stivhet, endotelfunksjon og venstre atriums (LA) og venstre ventrikkels (LV) deformasjon over en 6-måneders oppfølgingsperiode.

   Sekundært vil studien undersøke:

   • a) Forekomsten av store uønskede kardiovaskulære hendelser (MACE), inkludert kardiovaskulær død, akutt hjerteinfarkt og akutt hjerneslag.
   • b) Korrelasjonen mellom MACE-forekomst og parametere for arteriell stivhet, endotelfunksjon og LA/LV-deformasjon.
   • c) Nivåene av oksidativ belastningsmarkører.
3. Materialer og Metoder

Denne observasjonsstudien vil inkludere voksne i alderen 18-75 år (uavhengig av kjønn) som besøker poliklinikkene ved 2. universitetskardiologiklinikk ved "Attikon" generelle sykehus. Alle deltakere vil signere et samtykkeskjema. En full medisinsk historie, klinisk undersøkelse og blodprøvetaking vil bli utført for å bestemme nivåene av total kolesterol, LDL-C, HDL-C, triglyserider og Lp(a) ved hvert besøk. Deltakerne vil bli delt inn i tre grupper:

• Gruppe A: Lp(a) ≥50 mg/dL med total kolesterol <200 mg/dl
• Gruppe B: Lp(a) <50 mg/dL med total kolesterol >200 mg/dl
• Gruppe C (Kontroll): Lp(a) <50 mg/dL med total kolesterol <200 mg/dl Eksklusjonskriteriene omfatter: 1. Historikk med autoimmun/autoinflammatorisk sykdom, 2. Alvorlig hjerteklaffsykdom, 3. Alvorlig kronisk nyresykdom (eGFR <60 ml/min/1.73 m²), 4. Aktiv graviditet og 5. Alvorlig leversvikt.

I hver gruppe forventes det n ≥ 100 deltakere.

Følgende målinger vil bli utført for hver gruppe ved baseline og etter 6 og 12 måneder etter inkludering:

• Arteriell stivhet: Bestemmelse av carotid-femoral pulsbolgehastighet (cf-PWV) ved bruk av Complior SP-enheten og 24-timers pulsbolgeanalyse med Mobil-O-Graph-enheten. Pulsbolgehastighet er gullstandarden for vurdering av arteriell stivhet [21,22]. Forskerne vil bruke to ikke-invasive trykksensorer for å registrere carotid- og femoralbolgeformene. Forskerne vil måle avstanden mellom de to arterielle stedene med et målebånd. PWV beregnes ved å dele avstanden med overføringstiden mellom bølger (m/s). De passende korreksjonene av PWV ble anvendt, etter å ha multiplisert standard PWV-utgangsverdiene med 0,8 [22]. Sentralt systolisk blodtrykk (cSBP, mmHg) og sentralt diastolisk blodtrykk (cDBP, mmHg) vil bli målt ved bruk av Complior.
• Endotelfunksjon: Forskerne vil måle den perfuserte grenseområdet (PBR) av de sublinguale arterielle mikrovaskulærene (i området 4 til 25 μm) ved bruk av Sidestream Darkfield (SDF)-avbildning (Microscan, Glycocheck, Microvascular Health Solutions Inc., Salt Lake City, Utah, USA) [18]. Denne teknikken muliggjør vurdering av endotelglycocalyx ved bruk av en ikke-invasiv metode. PBR er det cell-fattige laget, som oppstår fra faseadskillelsen mellom de flytende røde blodlegemene og plasma på overflaten av mikrovesselumen. PBR inkluderer den mest luminale delen av glycocalyx som tillater cellepenetrasjon. Derfor er en økt PBR konsistent med dypere penetrasjon av erytrocytter inn i glycocalyx, noe som indikerer et tap av glycocalyx-barriereeenskaper og er en markør for redusert glycocalyx-tykkelse. Målingen av endotelglycocalyx-tykkelse ved bruk av SDF-avbildning er enkel å utføre (varighet 3 minutter) og er ikke påvirket av operatørens ferdigheter. Dessuten har den en standardisert metodikk, gir målinger av flere prøvesteder (>3 000 vaskulære segmenter av sublingual mikrovaskulatur), har svært god reproduserbarhet og foreslås derfor som en gyldig metode for å vurdere endotelintegritet av European Society of Cardiology Working Group on Peripheral Circulation. PBR-målingene er uavhengige av RBC-fyllingen av vaskulære segmenter (hematokrit), fordi programvaren bare inkluderer vaskulære segmenter som har en fyllingsprosent på mer enn 50 % [9,18]. Derfor velges vaskulære segmenter bare når minst 11 av de 21 linjemarkørene har et positivt signal for tilstedeværelse av et erytrocytt. Dermed er PBR-verdier uavhengige av hematokrit, og reflekterer en skadet glycocalyx som er mer tilgjengelig for sirkulerende erytrocytter.
• Kardiell deformasjon: I alle deltakere vil forskerne måle longitudinell systolisk strain fra standard todimensjonal (2D) opptak (bildefrekvens: 70-80/sekund) med bruk av dedikert programvare (EchoPac 206, GE Healthcare). Global longitudinell strain (GLS) beregnes ved bruk av 17 LV-segmentmodellen avbildet fra apikale kammerutsikter (4-, 2- og 3-kammerutsikt). Myokarddeformasjonene ved basale, midtventrikulære og apikale segmenter ble gjennomsnittet til GLS. Alle variabler representerer middelverdien av målinger tatt i tre påfølgende hjertesykler. Inter- og intraobservatørvariabilitet for GLS var henholdsvis 8 og 5 %. LA-funksjon vil bli evaluert ved bruk av transtorakal ekkokardiografisk speckle-tracking strain-avbildning. En speckle-tracking-algoritme ble anvendt på LA-myokardiet i apikale 4- og 2-kammerutsikter. Region of interest-bredden ble justert til tykkelsen av LA-veggen, og hjertesyklusen ble avgrenset ved å indikere QRS-start. LA-reservoar strain, en måling av LA-komplians, ble målt som topp longitudinell strain (gjennomsnitt av alle 12 segmenter i apikale 4- og 2-kammerutsikter) under ventrikulær systole, med QRS-start som referansepunkt. Etter å ha definert ved anatomisk M-mode mitral- og aortaklaffåpning og -lukking samt atriell kontraksjon, vil LA-longitudinal strain, oppnådd ved 2D strain, bli målt i alle tre atriefaser (reservoar, leder og atriell kontraksjon) som følger: reservoarperiode ble definert som intervallet mellom mitralklafflukking og mitralklaffåpning, lederperiode som intervallet mellom mitralklaffåpning og starten av atriell kontraksjon, som vurdert ved anatomisk M-mode, og kontraktil periode som intervallet mellom starten av atriell kontraksjon, som vurdert ved anatomisk M-mode, og mitralklafflukking. Deretter ble atriell deformasjon for hver periode beregnet ved å måle den respektive forskjellen i strain (verdier ved slutten minus verdier ved begynnelsen).
• Oksidativ belastning: Bestemmelse av malondialdehyd (MDA) og proteinkarbonyler (PCs)-nivåer som markører for oksidativt stress. MDA vil bli estimert spektrofotometrisk med et kommersielt kit (Oxford Biomedical Research, Rochester Hills, MI) av kolorimetrisk assay for lipidperoksidasjon (måleområde, 1-20 nmol/l). For bestemmelse av PCs (nmol/mL) brukte forskerne den spektrofotometriske vurderingen av 2,4-dinitrofenylhydrazinderivater av PCs.
• Statistisk analyse: Statistisk analyse vil bli utført ved å bruke SPSS versjon 29 (IBM SPSS Statistics, Inc., Chicago, IL). Alle kontinuerlige variabler vil bli presentert som gjennomsnitt ±SD hvis de er normalfordelte, som indikert av Kolmogorov-Smirnov og Shapiro-Wilk normalitetstester. Ved ikke-normal fordeling vil transformasjon til ranger bli utført. Nominelle variabler presenteres som prosenter. Korrelasjonsanalyse vil bli utført via Spearman- eller Pearson-korrelasjonstester, basert på datadistribusjon. Kategoriske variabler analyseres via enten Chi-kvadrat-tester eller Fishers eksakte tester, som passende. ANOVA for gjentatte målinger vil bli brukt for (1) målinger av ovennevnte i begynnelsen, ved 6 og ved 12 måneder (som betraktes som en within-subject faktor) og (2) også forskjellene mellom ulike grupper, som en between-subject faktor). Post-hoc-sammenligninger vil bli utført med Bonferronis korreksjon. F-verdien og de respektive P-verdiene mellom de ulike tidsperiodene for målinger vil bli beregnet. Videre vil F- og P-verdiene mellom måletidspunktet for biomarkørene og de undersøkte gruppene bli estimert. Greenhouse-Geisser-, Huynh-Feldt- eller Lower-Bound-korreksjoner vil bli brukt når sfærisitetsantagelsen, som evaluert av Mauchlys test, ikke blir oppfylt. Prosentvise endringer av de undersøkte variablene etter intervensjon vil også bli sammenlignet ved enveis ANOVA. Alle statistiske tester er tosidige og en p-verdi < 0,05 betraktes som statistisk signifikant.