木炭配合ナイロン歯ブラシ毛先と標準ナイロン歯ブラシ毛先における細菌汚染と抗菌効果の評価

研究デザインとランダム化 本研究では、細菌保持と抗菌効果を評価するために、ランダム化、並行群、体外微生物学的デザインを採用しています。 参加者は年齢（小児と成人）で層別化され、環境に優しい炭素配合歯ブラシまたは標準ナイロン歯ブラシのいずれかを受け取るようにランダム化されます。 割り付けは、連番の不透明な封筒に隠されたコンピューター生成のランダムシーケンスを使用して管理されます。 盲検化を維持するため、実験室のアウトカム評価者はグループ割り付けを知らず、参加者は介入内容を評価チームに開示しないよう指示されます。

標準化された使用プロトコル

行動要因による細菌負荷の変動を最小限に抑えるため、すべての参加者は厳格な衛生プロトコルに従います：

• ブラッシング技術：参加者は標準化された方法（歯肉に対して45度の角度で短い往復ストローク、前歯舌側面には垂直ストローク）を使用して、1日2回（朝と夜）2分間ブラッシングします。
• 保管とメンテナンス：ブラッシング後、毛先を手で触らずに流水で洗浄します。 歯ブラシは直立させ、カバーなしで保管し、エアロゾル汚染を最小限に抑えるため、衛生設備（例：トイレ）から少なくとも60cm離して配置する必要があります。
• 制限：研究の活性フェーズ中、抗菌性洗口液、薬用歯磨き粉、または毛先カバーの使用は禁止されています。

サンプル収集タイムライン

本研究は、ウォッシュアウト期間で区切られた2つの異なる使用期間を含みます：

1. フェーズ1（24時間評価）：参加者は割り当てられた歯ブラシを1日間使用し、その後すぐに滅菌パウチで返却します。
2. ウォッシュアウト：参加者が研究外の口腔衛生ルーチンに戻る7日間の期間があります。
3. フェーズ2（7日間評価）：参加者は同じ割り付けの新しい歯ブラシを受け取り、7日間使用し、分析のために滅菌パウチで返却します。

微生物学的分析 返却されたサンプルは無菌実験室条件下で処理されます。 毛先領域の約3分の1が無菌器具を使用して切除され、5 mLの滅菌生理食塩水を含む試験管に移されます。 試験管は振盪され、付着微生物を懸濁液に溶出させます。 0.1 mLのアリコートが無菌スプレッダーを使用して血液寒天プレートに接種されます。

プレートは37°Cの嫌気性ガスパックジャーで培養されます。 コロニー形成単位（CFU）は48時間培養後に定量化され、総細菌負荷を決定します。 さらに、毛先の内在性抗菌活性は、7日間培養後に寒天プレート上に配置された毛先サンプル周辺の阻止円（ミリメートル単位）を測定することで評価されます。