Evaluación de la Contaminación Bacteriana y Eficacia Antimicrobiana en Cerdas de Cepillo de Dientes de Nailon Estándar vs. Infundidas con Carbón.

Diseño del Estudio y Aleatorización Este estudio emplea un diseño microbiológico aleatorizado, de grupos paralelos y ex vivo para evaluar la retención bacteriana y la eficacia antimicrobiana. Los participantes se estratifican por edad (niños y adultos) y se asignan aleatoriamente para recibir un cepillo dental ecológico infundido con carbón vegetal o un cepillo dental estándar de nailon. La asignación se gestiona mediante secuencias aleatorias generadas por ordenador, ocultas en sobres opacos numerados secuencialmente. Para mantener el cegamiento, los evaluadores de resultados de laboratorio desconocen la asignación de grupo, y se instruye a los participantes para que no divulguen su intervención al equipo de evaluación.

Protocolo de Uso Estandarizado

Para minimizar la variabilidad en la carga bacteriana debido a factores conductuales, todos los participantes se adhieren a un estricto protocolo de higiene:

• Técnica de Cepillado: Los participantes se cepillan dos veces al día (mañana y noche) durante dos minutos utilizando un método estandarizado (ángulo de 45 grados respecto a la encía con movimientos cortos de ida y vuelta, y movimientos verticales para las superficies linguales anteriores).
• Almacenamiento y Mantenimiento: Después del cepillado, se enjuagan las cerdas bajo agua corriente sin manipulación digital. Los cepillos dentales deben almacenarse en posición vertical, sin cubrir y colocados al menos a dos pies de distancia de los accesorios sanitarios (por ejemplo, inodoros) para minimizar la contaminación por aerosoles.
• Restricciones: El uso de enjuagues bucales antimicrobianos, pastas dentales medicadas o cubiertas para cerdas está prohibido durante las fases activas del estudio.

Cronograma de Recolección de Muestras

El estudio implica dos períodos de uso distintos separados por una fase de lavado:

1. Fase 1 (Evaluación de 24 Horas): Los participantes utilizan el cepillo dental asignado durante un día, seguido de su devolución inmediata en una bolsa estéril.
2. Lavado: Ocurre un período de 7 días durante el cual los participantes vuelven a su rutina de higiene bucal no relacionada con el estudio.
3. Fase 2 (Evaluación de 7 Días): Los participantes reciben un nuevo cepillo dental de la misma asignación, lo utilizan durante 7 días y lo devuelven en una bolsa estéril para su análisis.

Análisis Microbiológico Las muestras devueltas se procesan en condiciones de laboratorio asépticas. Aproximadamente un tercio del campo de cerdas se extrae utilizando instrumentación estéril y se transfiere a tubos de ensayo que contienen 5 mL de solución salina estéril. Los tubos se agitan para eluir los microorganismos adheridos en suspensión. Una alícuota de 0,1 mL se inocula en placas de agar sangre utilizando un esparcidor estéril.

Las placas se incuban en frascos con paquetes de gas anaeróbicos a 37°C. Las Unidades Formadoras de Colonias (UFC) se cuantifican después de 48 horas de incubación para determinar la carga bacteriana total. Adicionalmente, la actividad antimicrobiana intrínseca de las cerdas se evalúa midiendo la zona de inhibición (en milímetros) que rodea las muestras de cerdas colocadas en placas de agar después de 7 días de incubación.