Avaliação da Contaminação Bacteriana e da Eficácia Antimicrobiana em Cerdas de Escova de Dentes com Carvão Ativado vs. Cerdas de Nylon Padrão.

Desenho do Estudo e Randomização Este estudo emprega um desenho microbiológico randomizado, de grupos paralelos e ex-vivo para avaliar a retenção bacteriana e a eficácia antimicrobiana. Os participantes são estratificados por idade (crianças e adultos) e randomizados para receber uma escova de dentes ecológica infundida com carvão ou uma escova de dentes padrão em nylon. A alocação é gerida utilizando sequências aleatórias geradas por computador, ocultas em envelopes opacos numerados sequencialmente. Para manter o cegamento, os avaliadores de resultados laboratoriais desconhecem a atribuição de grupo, e os participantes são instruídos a não divulgar a sua intervenção à equipa de avaliação.

Protocolo de Utilização Padronizado

Para minimizar a variabilidade na carga bacteriana devido a fatores comportamentais, todos os participantes aderem a um protocolo de higiene rigoroso:

• Técnica de Escovagem: Os participantes escovam duas vezes por dia (manhã e noite) durante dois minutos utilizando um método padronizado (ângulo de 45 graus em relação à gengiva com movimentos curtos de vaivém, e movimentos verticais para as superfícies linguais anteriores).
• Armazenamento e Manutenção: Após a escovagem, as cerdas são enxaguadas sob água corrente sem manipulação digital. As escovas de dentes devem ser armazenadas na vertical, descobertas, e posicionadas a pelo menos dois pés de distância de instalações sanitárias (por exemplo, sanitas) para minimizar a contaminação por aerossóis.
• Restrições: A utilização de elixires bucais antimicrobianos, pastas de dentes medicadas ou capas para cerdas é proibida durante as fases ativas do estudo.

Cronograma de Recolha de Amostras

O estudo envolve dois períodos de utilização distintos, separados por uma fase de washout:

1. Fase 1 (Avaliação de 24 Horas): Os participantes utilizam a escova de dentes atribuída durante um dia, seguido de devolução imediata num saco estéril.
2. Washout: Ocorre um período de 7 dias durante o qual os participantes retomam a sua rotina de higiene oral não relacionada com o estudo.
3. Fase 2 (Avaliação de 7 Dias): Os participantes recebem uma nova escova de dentes da mesma alocação, utilizam-na durante 7 dias e devolvem-na num saco estéril para análise.

Análise Microbiológica As amostras devolvidas são processadas em condições laboratoriais assépticas. Aproximadamente um terço do campo de cerdas é excisado utilizando instrumentação estéril e transferido para tubos de ensaio contendo 5 mL de solução salina estéril. Os tubos são agitados para eluir os microorganismos aderentes para suspensão. Uma alíquota de 0,1 mL é inoculada em placas de ágar sangue utilizando um espalhador estéril.

As placas são incubadas em frascos de embalagem de gás anaeróbico a 37°C. As Unidades Formadoras de Colónias (UFCs) são quantificadas após 48 horas de incubação para determinar a carga bacteriana total. Adicionalmente, a atividade antimicrobiana intrínseca das cerdas é avaliada medindo a zona de inibição (em milímetros) em torno das amostras de cerdas colocadas em placas de ágar após 7 dias de incubação.