Valutazione della contaminazione batterica e dell'efficacia antimicrobica sulle setole di spazzolino in nylon standard vs. infuse con carbone attivo.

Disegno dello Studio e Randomizzazione Questo studio utilizza un disegno microbiologico randomizzato, a gruppi paralleli, ex-vivo per valutare la ritenzione batterica e l'efficacia antimicrobica. I partecipanti sono stratificati per età (bambini e adulti) e randomizzati per ricevere uno spazzolino da denti ecologico infuso di carbone o uno spazzolino da denti standard in nylon. L'allocazione è gestita utilizzando sequenze casuali generate al computer, nascoste in buste opache numerate sequenzialmente. Per mantenere l'incondizionamento, i valutatori dei risultati in laboratorio non sono a conoscenza dell'assegnazione del gruppo, e ai partecipanti viene istruito di non rivelare il proprio intervento al team di valutazione.

Protocollo di Utilizzo Standardizzato

Per minimizzare la variabilità del carico batterico dovuta a fattori comportamentali, tutti i partecipanti aderiscono a un protocollo igienico rigoroso:

• Tecnica di Spazzolamento: I partecipanti si spazzolano due volte al giorno (mattina e sera) per due minuti utilizzando un metodo standardizzato (angolo di 45 gradi rispetto alla gengiva con brevi movimenti avanti e indietro, e movimenti verticali per le superfici linguali anteriori).
• Conservazione e Manutenzione: Dopo lo spazzolamento, le setole vengono sciacquate sotto l'acqua corrente senza manipolazione digitale. Gli spazzolini devono essere conservati in posizione verticale, scoperti e posizionati ad almeno due piedi di distanza da sanitari (es. water) per minimizzare la contaminazione da aerosol.
• Restrizioni: L'uso di collutori antimicrobici, dentifrici medicati o coprisetole è vietato durante le fasi attive dello studio.

Cronologia della Raccolta dei Campioni

Lo studio coinvolge due periodi di utilizzo distinti separati da una fase di washout:

1. Fase 1 (Valutazione delle 24 Ore): I partecipanti utilizzano lo spazzolino assegnato per un giorno, seguito dal ritorno immediato in una busta sterile.
2. Washout: Si verifica un periodo di 7 giorni in cui i partecipanti tornano alla loro routine di igiene orale non di studio.
3. Fase 2 (Valutazione dei 7 Giorni): I partecipanti ricevono un nuovo spazzolino della stessa allocazione, lo utilizzano per 7 giorni e lo restituiscono in una busta sterile per l'analisi.

Analisi Microbiologica I campioni restituiti vengono processati in condizioni di laboratorio asettiche. Circa un terzo del campo delle setole viene asportato utilizzando strumentazione sterile e trasferito in provette contenenti 5 mL di soluzione salina sterile. Le provette vengono agitate per eluire i microrganismi aderenti in sospensione. Un'aliquota di 0,1 mL viene inoculata su piastre di agar sangue utilizzando un spatolino sterile.

Le piastre vengono incubate in barattoli con pacchetto di gas anaerobici a 37°C. Le Unità Formanti Colonie (UFC) vengono quantificate dopo 48 ore di incubazione per determinare il carico batterico totale. Inoltre, l'attività antimicrobica intrinseca delle setole viene valutata misurando la zona di inibizione (in millimetri) attorno ai campioni di setole posti su piastre di agar dopo 7 giorni di incubazione.