木炭注入与标准尼龙牙刷毛的细菌污染评估及抗菌功效对比

研究设计与随机化 本研究采用随机、平行组、体外微生物学设计来评估细菌滞留和抗菌效果。 参与者按年龄（儿童和成人）分层，并随机分配接受环保型炭刷毛牙刷或标准尼龙牙刷。 分配通过计算机生成的随机序列进行管理，这些序列隐藏于顺序编号、不透明的信封中。 为保持盲法，实验室结果评估人员不了解分组情况，并指示参与者不得向评估团队透露其干预措施。

标准化使用方案

为最大限度地减少行为因素导致的细菌负荷变异性，所有参与者均遵守严格的卫生方案：

• 刷牙技巧：参与者每天早晚各刷牙两分钟，采用标准化方法（与牙龈成45度角进行短距离来回刷动，前牙舌面采用垂直刷动）。
• 存放与维护：刷牙后，刷毛在流动水下冲洗，无需手指操作。 牙刷必须直立存放，不加盖，并放置在距卫生设施（如马桶）至少两英尺远的位置，以最大限度地减少气溶胶污染。
• 限制：在研究的活跃阶段，禁止使用抗菌漱口水、药用牙膏或刷毛套。

样本收集时间线

本研究涉及两个不同的使用期，中间间隔一个洗脱期：

1. 阶段1（24小时评估）：参与者使用分配的牙刷一天，随后立即将其装入无菌袋中归还。
2. 洗脱期：为期7天，期间参与者恢复其非研究口腔卫生常规。
3. 阶段2（7天评估）：参与者收到相同分配的新牙刷，使用7天，然后将其装入无菌袋中归还进行分析。

微生物学分析 归还的样本在无菌实验室条件下进行处理。 使用无菌器械切除约三分之一的刷毛区域，并转移到含有5 mL无菌生理盐水的试管中。 振荡试管以将附着的微生物洗脱到悬浮液中。 使用无菌涂布棒将0.1 mL等分试样接种到血琼脂平板上。

平板在37°C的厌氧气囊罐中孵育。 孵育48小时后，对菌落形成单位（CFUs）进行计数以确定总细菌负荷。 此外，通过测量放置在琼脂平板上的刷毛样本在孵育7天后周围的抑菌圈（以毫米计）来评估刷毛的固有抗菌活性。