標準治療によって誘発される耐性メカニズムを研究するための、扁平上皮頭頸部癌（HNSCC）患者における患者由来異種移植片（PDX）の開発とチロシンキナーゼ受容体発現の解析 (SPAR)

1. プロトコル識別および管理状況研究略称：SPAR プロトコル日付：2026年2月4日 バージョン：3（2025年11月26日のバージョン1を置き換える）研究期間：合計6.5年（5年間の登録・選択、8-12か月のPDX拡大、3か月の分子分析、2か月のデータ分析）主任研究者：マッティア・ラウリオーラ調整機関：IRCCS アツィエンダ・オスペダリエロ・ウニヴェルシタリア・ディ・ボローニャ（ポリクリニコ・サン・オルソラ）2. 科学的背景および理論的根拠頭頸部扁平上皮癌（HNSCC）は依然として世界的な健康課題であり、年間約89万件の新規症例と45万件の死亡を伴う7番目に多いがんである。耐性の問題標準治療には手術、化学療法、放射線療法が含まれるが、PD-1阻害剤（ペムブロリズマブ、ニボルマブ）などの最近の革新は患者のわずか20-30%にしか有益ではない。セツキシマブ（CTX）は抗EGFRモノクローナル抗体として標準治療であるが、獲得耐性が頻繁な障壁となる。生物学的仮説耐性はしばしば以下によって駆動される：RTKバイパス：MET、AXL、IGFR1、MERTKなどの代替受容体型チロシンキナーゼ（RTK）の活性化。ERBBファミリー相互作用：ERBBファミリー（EGFR、HER2、HER3、HER4）は、EGFR阻害にもかかわらずシグナル伝達を維持するために複雑なヘテロ二量体化を利用する。シグナル伝達経路：RASおよびPI3K/AKT経路の下流活性化、ならびに腫瘍微小環境（例：サイトカイン、EMTマーカー）の変化。SPARプロジェクトは、これらの特定の耐性メカニズムを研究するために、独自のイタリア人患者由来異種移植（PDX）モデルを開発することでこの問題に取り組むことを目的としている。3. 研究目的およびアウトカム主要目的目標：一連のHNSCC PDXモデルを開発すること。方法：外科的腫瘍サンプルを免疫不全マウスに移植する。評価：移植後2-3か月で成功が評価される。副次的目的分子特性解析：RTK発現（EGFR、HER2、HER3、HER4、MET、AXL、IGFR1、MERTK）およびそのリガンド（例：NRG1-4、EGF、HGF）の包括的分析。技術的範囲：NGS（ゲノムおよびトランスクリプトミクス）、RT-qPCR、ddPCR、ELISA、ウェスタンブロット、およびQF-Proテクノロジーを活用して腫瘍の状況をマッピングする。ウイルス学：HPV遺伝子型およびウイルス発癌遺伝子転写産物（E6）の検出。4. 研究デザインおよび方法論これは、非営利、観察的、横断的研究であり、遡及的および前向きコホートの両方を使用する。遡的フェーズ（n = 40）サンプル源：IRCCS AOUボローニャの過去10年間のアーカイブされたFFPE（ホルマリン固定パラフィン包埋）材料。対象集団：セツキシマブで治療された患者（局所進行および再発・転移の両方）。適格条件：患者は免疫組織化学的・分子分析に十分な生物学的材料を持っている必要がある。前向きフェーズ（n = 80）期間：5年間にわたる登録。源：IRCCS サン・オルソラでHNSCCの手術を受ける患者。PDX開発：標準治療中に収集された新鮮な腫瘍・血液サンプル。実現可能性：研究者はPDX開発の成功率を30%と推定し、堅牢なバイオバンクのための十分なモデルを目指している。5. 臨床手順およびデータ管理臨床評価この研究は実験的な薬理学的治療を導入せず、患者の「通常のケア」に沿っている。治療中の患者は2-3週間ごとに診察される。積極的な治療を受けていない患者は、最初の2年間は3か月ごとに、その後3年間は6か月ごとにフォローアップされる。データガバナンスプラットフォーム：データはREDCapプラットフォームを使用して、仮名化された電子症例報告書（eCRF）に記録される。担当者：主任研究者はデータ管理業務の委任記録を維持する。統計分析：GraphPad Prism（v.9.5.0）を使用して実施される。人口統計学的データは頻度（カテゴリカル）または平均値・中央値（連続）として報告される。6. 倫理および規制遵守インフォームドコンセント参加には書面によるインフォームドコンセントが必須である。特別なケース（死亡・連絡不能患者）：遡的コホートにおいて、患者が死亡しているか、合理的な努力にもかかわらず連絡不能な場合、研究者はイタリアデータ保護当局の要件を遵守する限り、法律196/2003法令第110条に基づき、明示的な同意なしに進めることができる。保険および修正観察研究として、研究固有の保険は不要である。プロトコルの変更はすべて、正式な修正として倫理委員会に提出されなければならない。7. 普及および再現性オープンサイエンス：この研究はclinicaltrials.govやosf.ioなどのプラットフォームに登録される。出版：研究者は、結果に関わらず、研究終了後12か月以内に査読付きジャーナルに所見を提出することを約束する。データ共有：匿名化されたデータは出版後にのみ利用可能となる。