Vývoj pacientem odvozených xenograftů (PDX) a analýza exprese tyrosinkinázových receptorů u pacientů se spinocelulárním karcinomem hlavy a krku (HNSCC) ke studiu rezistenčních mechanismů indukovaných standardní terapií (SPAR)

1. Identifikace protokolu a administrativní statusZkratka studie: SPAR Datum protokolu: 04-02-2026 Verze: 3 (nahrazuje verzi 1 ze dne 26/11/2025) Doba trvání studie: Celkem 6,5 roku (5 let nábor/výběr, 8-12 měsíců pro PDX expanzi, 3 měsíce molekulární analýza, 2 měsíce analýza dat) Hlavní výzkumník: Mattia Lauriola Koordinační instituce: IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna (Policlinico S. Orsola) 2. Vědecké pozadí a zdůvodněníSpinocelulární karcinom hlavy a krku (HNSCC) zůstává globální zdravotní výzvou, představuje sedmý nejčastější nádor s přibližně 890 000 novými případy a 450 000 úmrtími ročně.Problém rezistenceZatímco standardní terapie zahrnují chirurgii, chemoterapii a radioterapii, nedávné inovace jako inhibitory PD-1 (pembrolizumab, nivolumab) prospívají pouze 20-30 % pacientů.Cetuximab (CTX), monoklonální protilátka proti EGFR, je standardní léčbou, ale získaná rezistence je častou překážkou.Biologická hypotézaRezistence je často poháněna:Obejití RTK: Aktivací alternativních receptorových tyrozinkináz (RTK) jako MET, AXL, IGFR1 a MERTK.Interakce rodiny ERBB: Rodina ERBB (EGFR, HER2, HER3, HER4) využívá komplexní heterodimerizaci k udržení signalizace navzdory inhibici EGFR.Signalizační dráhy: Downstream aktivace drah RAS a PI3K/AKT, stejně jako změny v mikroprostředí nádoru (např. cytokiny, markery EMT).Projekt SPAR si klade za cíl toto řešit vývojem unikátních italských modelů xenograftů odvozených od pacienta (PDX) pro studium těchto specifických mechanismů rezistence.3. Cíle a výsledky studiePrimární cílCíl: Vyvinout soubor modelů PDX pro HNSCC.Metoda: Implantace chirurgických vzorků nádoru do imunokompromitovaných myší.Hodnocení: Úspěch je hodnocen 2-3 měsíce po implantaci.Sekundární cíleMolekulární charakterizace: Komplexní analýza exprese RTK (EGFR, HER2, HER3, HER4, MET, AXL, IGFR1, MERTK) a jejich ligandů (např. NRG1-4, EGF, HGF).Technologický rozsah: Využití NGS (genomické a transkriptomické), RT-qPCR, ddPCR, ELISA, Western Blot a technologie QF-Pro k mapování nádorového prostředí.Virologie: Detekce genotypů HPV a přítomnosti transkriptů virových onkogenů (E6).4. Design a metodologie studieJedná se o neziskovou, observační, průřezovou studii využívající retrospektivní i prospektivní kohorty.Retrospektivní fáze (n = 40)Zdroj vzorků: Archivované materiály FFPE (fixované formalinem a zalité v parafinu) z posledních 10 let v IRCCS AOU Bologna.Populace: Pacienti léčení Cetuximabem (jak lokálně pokročilí, tak R/M).Zařazení: Pacienti musí mít dostatečný biologický materiál pro imunohistochemickou/molekulární analýzu.Prosperktivní fáze (n = 80)Doba trvání: Nábor po dobu 5 let.Zdroj: Pacienti podstupující chirurgický zákrok pro HNSCC v IRCCS S. Orsola.Vývoj PDX: Čerstvé vzorky nádoru/krve odebrané během standardní péče.Proveditelnost: Výzkumníci odhadují 30% úspěšnost vývoje PDX, cílem je dostatek modelů pro robustní biobanku.5. Klinické postupy a správa datKlinické hodnoceníTato studie nezavádí experimentální farmakologické léčby; je v souladu s "obvyklou péčí" o pacienta.Pacienti v terapii jsou viděni každé 2-3 týdny; pacienti ne v aktivní terapii jsou sledováni každé 3 měsíce po první 2 roky, poté každých 6 měsíců po další 3 roky.Správa datPlatforma: Data jsou zaznamenávána v pseudonymizovaném elektronickém záznamu o případu (eCRF) pomocí platformy REDCap.Personál: Hlavní výzkumník vede záznam o pověření pro úkoly správy dat.Statistická analýza: Prováděna pomocí GraphPad Prism (v.9.5.0).Demografické údaje jsou uváděny jako frekvence (kategorické) nebo průměr/medián (spojité).6. Etika a regulační shodaInformovaný souhlasPísemný informovaný souhlas je pro účast povinný.Zvláštní případ (zemřelí/nedosažitelní pacienti): Pro retrospektivní kohortu, pokud jsou pacienti zemřelí nebo nedosažitelní navzdory přiměřenému úsilí, mohou výzkumníci pokračovat bez výslovného souhlasu podle čl. 110, D.Lgs 196/2003, za předpokladu, že splní požadavky italského úřadu pro ochranu údajů.Pojištění a změnyJako observační studie nevyžaduje žádné studie specifické pojištění.Jakékoli změny protokolu musí být předloženy etické komisi jako formální dodatky.7. Šíření a reprodukovatelnostOtevřená věda: Studie bude registrována na platformách jako clinicaltrials.gov nebo osf.io.Publikace: Výzkumník se zavazuje předložit zjištění recenzovanému časopisu do 12 měsíců od ukončení studie, bez ohledu na výsledky.Sdílení dat: Anonymizovaná data budou zpřístupněna až po publikaci.