Разработка ксенотрансплантатов, полученных от пациентов (PDX), и анализ экспрессии тирозинкиназных рецепторов у пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи (HNSCC) для изучения механизмов резистентности, индуцированных стандартной терапией (SPAR)

1. Идентификация протокола и административный статус Акроним исследования: SPAR Дата протокола: 04-02-2026 Версия: 3 (заменяет версию 1 от 26/11/2025) Продолжительность исследования: 6,5 лет в общей сложности (5 лет набор/отбор, 8-12 месяцев для экспансии PDX, 3 месяца молекулярного анализа, 2 месяца анализа данных) Главный исследователь: Маттиа Лаурьола Координирующее учреждение: IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna (Policlinico S. Orsola) 2. Научная база и обоснование Плоскоклеточный рак головы и шеи (HNSCC) остается глобальной проблемой здравоохранения, являясь седьмым по распространенности раком с примерно 890 000 новых случаев и 450 000 смертей ежегодно. Проблема резистентности Хотя стандартные методы лечения включают хирургию, химиотерапию и лучевую терапию, недавние инновации, такие как ингибиторы PD-1 (пембролизумаб, ниволумаб), приносят пользу только 20-30% пациентов. Цетуксимаб (CTX), моноклональное антитело против EGFR, является стандартным лечением, но приобретенная резистентность представляет собой частый барьер. Биологическая гипотеза Резистентность часто обусловлена: Обход RTK: Активация альтернативных рецепторных тирозинкиназ (RTK), таких как MET, AXL, IGFR1 и MERTK. Взаимодействия семейства ERBB: Семейство ERBB (EGFR, HER2, HER3, HER4) использует сложную гетеродимеризацию для поддержания сигнализации, несмотря на ингибирование EGFR. Сигнальные пути: Даунстрим-активация путей RAS и PI3K/AKT, а также изменения в микроокружении опухоли (например, цитокины, маркеры EMT). Проект SPAR направлен на решение этой проблемы путем разработки уникальных итальянских моделей ксенотрансплантатов, полученных от пациентов (PDX), для изучения этих конкретных механизмов резистентности. 3. Цели исследования и конечные точки Основная цель Задача: Разработать набор моделей PDX для HNSCC. Метод: Имплантация хирургических образцов опухоли в иммунодефицитных мышей. Оценка: Успех оценивается через 2-3 месяца после имплантации. Вторичные цели Молекулярная характеристика: Комплексный анализ экспрессии RTK (EGFR, HER2, HER3, HER4, MET, AXL, IGFR1, MERTK) и их лигандов (например, NRG1-4, EGF, HGF). Технологический охват: Использование NGS (геномный и транскриптомный), RT-qPCR, ddPCR, ELISA, Вестерн-блоттинга и технологии QF-Pro для картирования ландшафта опухоли. Вирусология: Выявление генотипов ВПЧ и наличие транскриптов вирусных онкогенов (E6). 4. Дизайн исследования и методология Это некоммерческое, обсервационное, поперечное исследование с использованием как ретроспективных, так и проспективных когорт. Ретроспективная фаза (n = 40) Источник образцов: Архивные материалы FFPE (формалин-фиксированные, парафин-включенные) за последние 10 лет в IRCCS AOU Bologna. Популяция: Пациенты, получавшие лечение Цетуксимабом (как с локально распространенным, так и с рецидивирующим/метастатическим заболеванием). Критерии включения: У пациентов должен быть достаточный биологический материал для иммуногистохимического/молекулярного анализа. Проспективная фаза (n = 80) Продолжительность: Набор в течение 5 лет. Источник: Пациенты, перенесшие операцию по поводу HNSCC в IRCCS S. Orsola. Разработка PDX: Свежие образцы опухоли/крови, собранные в рамках стандартного лечения. Осуществимость: Исследователи оценивают 30% успешность разработки PDX, стремясь получить достаточное количество моделей для надежного биобанка. 5. Клинические процедуры и управление данными Клиническая оценка Это исследование не вводит экспериментальные фармакологические методы лечения; оно соответствует "обычному уходу" пациента. Пациенты, находящиеся на терапии, наблюдаются каждые 2-3 недели; пациенты, не получающие активную терапию, наблюдаются каждые 3 месяца в течение первых 2 лет, затем каждые 6 месяцев в течение следующих 3 лет. Управление данными Платформа: Данные регистрируются в псевдонимизированной электронной Карте наблюдения за пациентом (eCRF) с использованием платформы REDCap. Персонал: Главный исследователь ведет журнал делегирования обязанностей по управлению данными. Статистический анализ: Проводится с использованием GraphPad Prism (v.9.5.0). Демографические данные представляются в виде частот (категориальные) или среднего/медианы (непрерывные). 6. Этические и регуляторные аспекты Информированное согласие Письменное информированное согласие обязательно для участия. Особый случай (умершие/недоступные пациенты): Для ретроспективной когорты, если пациенты умерли или недоступны, несмотря на разумные усилия, исследователи могут продолжить работу без явного согласия в соответствии со ст. 110, D.Lgs 196/2003, при условии соблюдения требований Итальянского органа по защите данных. Страхование и изменения Поскольку это обсервационное исследование, специальное страховое покрытие не требуется. Любые изменения протокола должны быть представлены Этическому комитету в качестве формальных поправок. 7. Распространение и воспроизводимость Открытая наука: Исследование будет зарегистрировано на таких платформах, как clinicaltrials.gov или osf.io. Публикация: Исследователь обязуется представить результаты в рецензируемый журнал в течение 12 месяцев после завершения исследования, независимо от результатов. Обмен данными: Анонимные данные будут предоставлены только после публикации.