Utveckling av patientderiverade xenograftmodeller (PDX) och analys av tyrosinkinasreceptorexpression hos patienter med skivepitelcancer i huvud och hals (HNSCC) för att studera resistensmekanismer inducerade av standardbehandling (SPAR)

1. Protokollidentifiering och administrativ status Studieförkortning: SPAR Protokolldatum: 2026-02-04 Version: 3 (ersätter version 1 från 2025-11-26) Studielängd: 6,5 år totalt (5 år inskrivning/urval, 8-12 månader för PDX-expansion, 3 månader molekylär analys, 2 månader dataanalys) Huvudutredare: Mattia Lauriola Samordnande institution: IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna (Policlinico S. Orsola) 2. Vetenskaplig bakgrund och motivering Huvud- och halsplanscelligt karcinom (HNSCC) förblir en global hälsoutmaning och är den sjunde vanligaste cancerformen med cirka 890 000 nya fall och 450 000 dödsfall årligen. Resistensproblemet Även om standardbehandlingar inkluderar kirurgi, kemoterapi och strålbehandling, gynnar nyare innovationer som PD-1-hämmare (pembrolizumab, nivolumab) endast 20-30 % av patienterna. Cetuximab (CTX), en anti-EGFR monoklonal antikropp, är en standardbehandling, men förvärvad resistens är ett frekvent hinder. Den biologiska hypotesen Resistens drivs ofta av: RTK-kringgång: Aktivering av alternativa receptorstyrosinkinaser (RTK) såsom MET, AXL, IGFR1 och MERTK. ERBB-familjeinteraktioner: ERBB-familjen (EGFR, HER2, HER3, HER4) använder komplex heterodimerisering för att upprätthålla signalering trots EGFR-hämning. Signalvägar: Nedströms aktivering av RAS- och PI3K/AKT-vägar samt förändringar i tumörmikromiljön (t.ex. cytokiner, EMT-markörer). SPAR-projektet syftar till att hantera detta genom att utveckla unika italienska patientderiverade xenograft-modeller (PDX) för att studera dessa specifika resistensmekanismer. 3. Studiemål och utfall Primärt mål Mål: Att utveckla en uppsättning HNSCC PDX-modeller. Metod: Implantation av kirurgiska tumörprover i immunsupprimerade möss. Bedömning: Framgång utvärderas 2-3 månader efter implantation. Sekundära mål Molekylär karakterisering: Omfattande analys av RTK-uttryck (EGFR, HER2, HER3, HER4, MET, AXL, IGFR1, MERTK) och deras ligander (t.ex. NRG1-4, EGF, HGF). Teknologisk omfattning: Användning av NGS (genomisk och transkriptomisk), RT-qPCR, ddPCR, ELISA, Western Blot och QF-Pro-teknologi för att kartlägga tumörlandskapet. Virologi: Detektion av HPV-genotyper och förekomst av virala onkogentranskript (E6). 4. Studiedesign och metodologi Detta är en ideell, observationsstudie med tvärsnittsdesign som använder både retrospektiva och prospektiva kohorter. Retrospektiv fas (n = 40) Provkälla: Arkiverat FFPE-material (formalin-fixerat paraffin-inbäddat) från de senaste 10 åren vid IRCCS AOU Bologna. Population: Patienter behandlade med Cetuximab (både lokalt avancerade och R/M-scenarier). Inklusion: Patienter måste ha tillräckligt biologiskt material för immunhistokemisk/molekylär analys. Prospektiv fas (n = 80) Längd: Inskrivning över 5 år. Källa: Patienter som genomgår kirurgi för HNSCC vid IRCCS S. Orsola. PDX-utveckling: Färska tumör-/blodprover samlas in under standardvård. Genomförbarhet: Forskarna uppskattar en 30 % framgångsfrekvens för PDX-utveckling, med målet att få tillräckligt med modeller för en robust biobank. 5. Kliniska procedurer och datahantering Klinisk utvärdering Denna studie introducerar inga experimentella farmakologiska behandlingar; den överensstämmer med patientens "vanliga vård". Patienter i behandling ses var 2-3:e vecka; patienter som inte är i aktiv behandling följs upp var 3:e månad under de första 2 åren, sedan var 6:e månad under de följande 3 åren. Datastyrning Plattform: Data registreras i en pseudonymiserad elektronisk fallrapportformulär (eCRF) med hjälp av REDCap-plattformen. Personal: Huvudutredaren för en delegeringslogg för datahanteringsuppgifter. Statistisk analys: Genomförd med GraphPad Prism (v.9.5.0). Demografi rapporteras som frekvenser (kategoriska) eller medelvärde/median (kontinuerliga). 6. Etik och regelverksenlighet Informerat samtycke Skriftligt informerat samtycke är obligatoriskt för deltagande. Specialfall (avlidna/icke-åtkomliga patienter): För den retrospektiva kohorten, om patienter är avlidna eller icke-åtkomliga trots rimliga ansträngningar, kan forskarna fortsätta utan uttryckligt samtycke enligt art. 110, D.Lgs 196/2003, förutsatt att de följer de italienska dataskyddsmyndighetens krav. Försäkring och ändringar Som en observationsstudie krävs ingen studiespecifik försäkring. Eventuella protokolländringar måste lämnas in till etikprövningsnämnden som formella ändringar. 7. Spridning och reproducerbarhet Öppen vetenskap: Studien kommer att registreras på plattformar som clinicaltrials.gov eller osf.io. Publicering: Utredaren åtar sig att lämna in resultat till en peer-review-granskad tidskrift inom 12 månader efter studieavslut, oavsett resultat. Datadelning: Anonymiserade data kommer att göras tillgängliga först efter publicering.