鳞状细胞头颈癌（HNSCC）患者来源异种移植模型（PDXs）的建立及酪氨酸激酶受体表达分析：研究标准治疗诱导的耐药机制 (SPAR)

1. 方案识别与行政状态 研究简称：SPAR 方案日期：2026年4月2日 版本：3（取代2025年11月26日的版本1） 研究时长：总计6.5年（5年入组/筛选，8-12个月用于PDX扩增，3个月分子分析，2个月数据分析） 首席研究员：Mattia Lauriola 协调机构：博洛尼亚大学医院IRCCS（圣奥索拉综合医院） 2. 科学背景与理论基础 头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）仍然是一个全球性健康挑战，是第七大常见癌症，每年约有890,000例新发病例和450,000例死亡。 耐药性问题 尽管标准治疗包括手术、化疗和放疗，但PD-1抑制剂（帕博利珠单抗、纳武利尤单抗）等近期创新仅使20-30%的患者受益。 西妥昔单抗（CTX）是一种抗EGFR单克隆抗体，是标准治疗，但获得性耐药是常见的障碍。 生物学假说 耐药性通常由以下因素驱动： RTK旁路：替代受体酪氨酸激酶（RTKs）的激活，如MET、AXL、IGFR1和MERTK。 ERBB家族相互作用：ERBB家族（EGFR、HER2、HER3、HER4）利用复杂的异二聚化在EGFR抑制下维持信号传导。 信号通路：RAS和PI3K/AKT通路的下游激活，以及肿瘤微环境的改变（如细胞因子、EMT标记物）。 SPAR项目旨在通过开发独特的意大利患者来源异种移植（PDX）模型来研究这些特定的耐药机制，以解决此问题。 3. 研究目标与结果 主要目标 目标：开发一套HNSCC PDX模型。 方法：将手术肿瘤样本植入免疫缺陷小鼠。 评估：在植入后2-3个月评估成功与否。 次要目标 分子表征：全面分析RTK表达（EGFR、HER2、HER3、HER4、MET、AXL、IGFR1、MERTK）及其配体（如NRG1-4、EGF、HGF）。 技术范围：利用NGS（基因组学和转录组学）、RT-qPCR、ddPCR、ELISA、Western Blot和QF-Pro技术绘制肿瘤图谱。 病毒学：检测HPV基因型和病毒癌基因转录本（E6）的存在。 4. 研究设计与方法学 这是一项非营利性、观察性、横断面研究，使用回顾性和前瞻性队列。 回顾性阶段（n = 40） 样本来源：博洛尼亚IRCCS AOU过去10年的存档FFPE（福尔马林固定石蜡包埋）材料。 人群：接受西妥昔单抗治疗的患者（包括局部晚期和复发/转移性）。 纳入标准：患者必须有足够的生物材料进行免疫组织化学/分子分析。 前瞻性阶段（n = 80） 时长：入组持续5年。 来源：在IRCCS圣奥索拉医院接受HNSCC手术的患者。 PDX开发：在标准护理期间收集新鲜肿瘤/血液样本。 可行性：研究人员估计PDX开发的成功率为30%，目标是获得足够的模型以建立稳健的生物库。 5. 临床程序与数据管理 临床评估 本研究不引入实验性药物治疗；它与患者的“常规护理”保持一致。 治疗中的患者每2-3周随访一次；非积极治疗的患者在前2年每3个月随访一次，随后3年每6个月随访一次。 数据治理 平台：数据使用REDCap平台记录在假名化电子病例报告表（eCRF）中。 人员：首席研究员维护数据管理职责的授权日志。 统计分析：使用GraphPad Prism（v.9.5.0）进行。 人口统计学数据以频率（分类）或均值/中位数（连续）报告。 6. 伦理与法规合规 知情同意 参与必须获得书面知情同意。 特殊情况（已故/无法联系的患者）：对于回顾性队列，如果患者已故或经过合理努力仍无法联系，研究人员可根据意大利《第196/2003号立法法令》第110条，在遵守意大利数据保护局要求的前提下，无需明确同意即可进行。 保险与修正 作为一项观察性研究，无需特定研究保险。 任何方案变更必须作为正式修正案提交给伦理委员会。 7. 传播与可重复性 开放科学：本研究将在clinicaltrials.gov或osf.io等平台注册。 发表：研究者承诺在研究结束后12个月内将结果提交给同行评审期刊，无论结果如何。 数据共享：匿名数据仅在发表后提供。