Potilaisperäisten ksenograftien (PDX) kehittäminen ja tyrosiinikinaasireseptorien ilmentymisen analysointi pää- ja kaulansyöpäpotilailla (HNSCC) standardihoidon aiheuttamien vastustusmekanismien tutkimiseksi (SPAR)

1. Protokollan tunnistus ja hallinnollinen tilaTutkimuksen lyhenne: SPAR Protokollan päivämäärä: 04-02-2026 Versio: 3 (korvaa version 1 päivältä 26/11/2025) Tutkimuksen kesto: 6,5 vuotta yhteensä (5 vuotta rekrytointia/valintaa, 8-12 kuukautta PDX-kasvulle, 3 kuukautta molekyylianalyysia, 2 kuukautta tietojen analysointia) Päätutkija: Mattia Lauriola Koordinoiva laitos: IRCCS Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna (Policlinico S. Orsola) 2. Tieteellinen tausta ja perusteluPään ja kaulan levyepiteelisolu-karsinooma (HNSCC) on edelleen maailmanlaajuinen terveyshaaste, joka on seitsemänneksi yleisin syöpä noin 890 000 uuden tapauksen ja 450 000 kuoleman vuosittain.ResistanssiongelmaVaikka vakiintuneet hoidot sisältävät leikkaushoitoa, kemoterapiaa ja sädehoitoa, viimeaikaiset innovaatiot kuten PD-1-estäjät (pembrolizumab, nivolumab) hyödyttävät vain 20-30 % potilaista. Cetuksimabi (CTX), anti-EGFR-monoklonaalinen vasta-aine, on vakiintunut hoito, mutta hankittu resistanssi on yleinen este.Biologinen hypoteesiResistanssia ajavat usein:RTK-ohitus: Vaihtoehtoisten reseptorityrosiinikinaasien (RTK) kuten MET, AXL, IGFR1 ja MERTK aktivoituminen.ERBB-perheen vuorovaikutukset: ERBB-perhe (EGFR, HER2, HER3, HER4) hyödyntää monimutkaista heterodimerisaatiota signaalin ylläpitämiseksi EGFR-eston huolimatta.Signaaliradat: RAS- ja PI3K/AKT-signaalireittien alavirran aktivoituminen sekä kasvainmikroympäristön muutokset (esim. sytokiinit, EMT-merkkiaineet).SPAR-hanke pyrkii ratkaisemaan tämän kehittämällä ainutlaatuisia italialaisia potilasperäisiä ksenograftimalleja (PDX) näiden erityisten resistanssimekanismien tutkimiseen.3. Tutkimuksen tavoitteet ja tuloksetEnsisijainen tavoiteTavoite: Kehittää joukko HNSCC-PDX-malleja.Menetelmä: Kirurgisten kasvainnäytteiden istuttaminen immunokompromisoituihin hiiriin.Arviointi: Onnistuminen arvioidaan 2-3 kuukautta istutuksen jälkeen.Toissijaiset tavoitteetMolekyylikuvaus: Kattava analyysi RTK-ilmentymästä (EGFR, HER2, HER3, HER4, MET, AXL, IGFR1, MERTK) ja niiden ligandeista (esim. NRG1-4, EGF, HGF).Teknologinen laajuus: Hyödynnä NGS:ää (genomiikka ja transkriptomiikka), RT-qPCR:ää, ddPCR:ää, ELISA:ta, Western Blot:ia ja QF-Pro-teknologiaa kasvainmaiseman kartoittamiseen.Virologia: HPV-genotyyppien ja viruksen aiheuttaman onkogeenitranskriptien (E6) havaitseminen.4. Tutkimuksen suunnittelu ja metodologiaTämä on voittoa tavoittelematon, havainnollinen, poikkileikkaustutkimus, joka käyttää sekä retrospektiivistä että prospektiivista kohorttia.Retrospektiivinen vaihe (n = 40)Näytelähde: Arkistoituja FFPE-materiaaleja (formaliinilla kiinnitettyjä ja parafiiniin upotettuja) viimeiseltä 10 vuodelta IRCCS AOU Bolognassa.Väestö: Potilaat, joita on hoidettu setuksimabilla (sekä paikallisesti edenneissä että R/M-tilanteissa).Sisällyttäminen: Potilailla on oltava riittävästi biologista materiaalia immunohistokemiallista/molekyylianalyysia varten.Prospektiivinen vaihe (n = 80)Kesto: Rekrytointi 5 vuoden ajan.Lähde: Potilaat, joille tehdään HNSCC-leikkaus IRCCS S. Orsolassa.PDX-kehitys: Tuoreet kasvain-/verinäytteet kerätään rutiinihoidon aikana.Toteutettavuus: Tutkijat arvioivat 30 %:n onnistumisprosentin PDX-kehitykselle, tavoitteena riittävät mallit vankkaan biopankkiin.5. Kliiniset menettelyt ja tiedonhallintaKliininen arviointiTämä tutkimus ei käytä kokeellisia farmakologisia hoitoja; se on linjassa potilaan "tavallisen hoidon" kanssa.Hoidossa olevia potilaita nähdään 2-3 viikon välein; potilaita, jotka eivät ole aktiivisessa hoidossa, seurataan 3 kuukauden välein ensimmäisten 2 vuoden ajan ja sitten 6 kuukauden välein seuraavien 3 vuoden ajan.Tietojen hallintaAlusta: Tiedot tallennetaan pseudonymisoituun sähköiseen tapausraporttilomakkeeseen (eCRF) REDCap-alustan avulla.Henkilöstö: Päätutkija ylläpitää valtuutuslokitiedostoja tiedonhallintatehtävistä.Tilastollinen analyysi: Suoritetaan GraphPad Prism -ohjelmistolla (v.9.5.0). Demografiset tiedot raportoidaan taajuuksina (luokiteltu) tai keskiarvona/mediaanina (jatkuva).6. Etiikka ja sääntelyn noudattaminenTietoinen suostumusKirjallinen tietoinen suostumus on pakollinen osallistumiseen.Erikoistapaus (kuolleet/olemaattomat potilaat): Retrospektiiviselle kohortille, jos potilaat ovat kuolleet tai olemaattomia kohtuullisista yrityksistä huolimatta, tutkijat voivat edetä ilman nimenomaista suostumusta Art. 110, D.Lgs 196/2003:n mukaisesti, mikäli he noudattavat Italian tietosuojaviranomaisen vaatimuksia.Vakuutus ja muutoksetHavainnollisena tutkimuksena ei tarvita tutkimukseen liittyvää vakuutusta.Kaikki protokollamuutokset on toimitettava eettiselle toimikunnalle virallisina muutoksina.7. Leviäminen ja toistettavuusAvoin tiede: Tutkimus rekisteröidään alustoille kuten clinicaltrials.gov tai osf.io.Julkaisu: Tutkija sitoutuu lähettämään tulokset vertaisarvioituun lehteen 12 kuukauden kuluessa tutkimuksen päättymisestä tuloksista riippumatta.Tietojen jakaminen: Anonyymit tiedot tehdään saatavilla vasta julkaisun jälkeen.