肺がんの普及に関する洞察 (LUCID)

手術単独または多様式治療の一部として手術を受けた切除可能NSCLC患者において、再発パターンおよび長期転帰との関連性を評価するために、CTC、ctDNA、STAS、およびリンパ節微小転移のレベルが評価される。

この目的を達成するため、3つの時点（術前、術後、フォローアップ中）に採取された末梢静脈血サンプルから、CTCおよびctDNAの存在とカウントが分析される。さらに、以下の側面が副次的目標として評価される：

1. 原発性肺腫瘍内の腫瘍細胞とSTASおよび/またはリンパ節転移内の腫瘍細胞との間の空間的トランスクリプトミクスの一貫性、ならびに原発性肺腫瘍細胞と循環腫瘍細胞との間の分子プロファイルの差異を評価する。
2. 周術期変数が血液中へのCTCおよびctDNAの放出に及ぼす影響を定量化する。

主な周術期変数は以下の通り：

• 肺門構造の切除順序（例：静脈優先対動脈優先）。
• 肺操作技術（開胸手術、VATS、RATS）。
• 切除範囲（区域切除、葉切除、肺全摘）。CTCは現在のゴールドスタンダードプラットフォーム（CellSearchシステム、Menarini Silicon Biosystems、イタリア）を用いて分析され、ctDNAは次世代シーケンシング（NGS）技術（ILLUMINAプラットフォーム）を用いて評価される。

空間的トランスクリプトミクス評価については、原発腫瘍およびSTASおよび/またはリンパ節転移のエオシン・ヘマトキシリン染色スライドをXeniumプラットフォーム（10x Genomics、米国）を用いて分析し、Xenium Human Immuno-OncologyプロファイリングパネルによりmRNA種を空間的に定量化する。

プロジェクトのエンドポイントについては、連続変数は中央値（IQR）で記述され、t検定またはマンホイットニー検定で比較される。カテゴリ変数はn（％）で記述され、χ²/フィッシャー検定で比較される。OSおよびDFSはカプランマイヤー法で推定され、ログランク検定で比較され、多変量コックスモデル（比例性仮定の検証。結果はHRおよび95％CI）で分析される。死亡を競合イベントとして考慮した再発発生率（DFI）については、累積発生関数およびグレイ検定を使用する。多変量解析については、ファイングレイモデル（サブハザード比、95％CI）を使用する。バイオマーカー（CTC/ctDNAを連続および/または二分、例：CTC≥1細胞、VAF%/ng•mL）と時間依存転帰との関連は、コックス/ファイングレイで評価される。STASおよびリンパ節微小転移の確率はロジスティック回帰で評価される。術前/術後/フォローアップ中のCTC/ctDNA動態は、対検定（ウィルコクソン）および反復測定またはベースライン値調整ANCOVAを伴う線形/混合モデルで分析される。周術期変数がΔCTC/ΔctDNAに及ぼす影響は線形/混合モデルで推定され、再発/死亡リスクに及ぼす影響は年齢、性別、病期、組織型、グレード（G3）、臓側胸膜浸潤、PD-L1、アプローチ（開胸/VATS/RATS）、切除範囲、補助療法（病期による層別化の可能性あり）で調整したコックス/ファイングレイで推定される。欠損データは多重代入（MAR仮定）で扱い、感度分析（例：代替バイオマーカー閾値）を実施する。有意水準α=0.05両側、p値および95％CIを報告、適切な場合には多重比較補正（ベンジャミニホッホベルグ）を実施。R/Stata/SPSSによる分析。