Исследования по распространению рака лёгких (LUCID)

У пациентов с резектабельным НМРЛ, получавших только хирургическое лечение или хирургическое лечение в составе мультимодальной терапии, будут оценены уровни ЦОК, цтДНК, STAS и микрометастазов в лимфатических узлах, чтобы определить, связаны ли они с паттернами рецидива и долгосрочными исходами.

Для достижения этой цели наличие и количество ЦОК и цтДНК будут проанализированы в образцах периферической венозной крови, собранных в три временные точки (до и после операции, а также во время наблюдения). Кроме того, в качестве вторичных целей будут оценены следующие аспекты:

1. Оценить согласованность пространственной транскриптомики между опухолевыми клетками, расположенными в первичной опухоли легкого, и клетками, присутствующими в STAS и/или метастазах в лимфатических узлах, а также различия в молекулярном профиле между клетками первичной опухоли легкого и циркулирующими опухолевыми клетками.
2. Количественно оценить влияние интраоперационных переменных на высвобождение ЦОК и цтДНК в кровоток.

Основными интраоперационными переменными являются:

• Последовательность резекции гилярных структур (например, сначала вена vs. сначала артерия).
• Техники манипуляции легким (открытая хирургия, VATS, RATS).
• Объем резекции (сегментэктомия, лобэктомия, пневмонэктомия). ЦОК будут анализироваться с использованием текущего золотого стандарта платформы для анализа ЦОК (система CellSearch, Menarini Silicon Biosystems, Италия), в то время как цтДНК будет оцениваться с использованием технологии секвенирования нового поколения (NGS) (платформа ILLUMINA).

Для оценки пространственной транскриптомики будут проанализированы окрашенные эозином и гематоксилином срезы первичной опухоли, STAS и/или метастазов в лимфатических узлах с использованием платформы Xenium (10x Genomics, США) для пространственного количественного определения видов мРНК с помощью панели профилирования иммуноонкологии человека Xenium.

Что касается конечных точек проекта, непрерывные переменные будут описаны как медиана (IQR) и сравнены с использованием t-тестов или критериев Манна-Уитни; категориальные переменные будут описаны как n (%) и сравнены с использованием критериев χ²/Фишера. OS и DFS будут оценены с использованием метода Каплана-Мейера, сравнены с помощью лог-ранговых тестов и проанализированы с использованием многомерных моделей Кокса (проверка допущения пропорциональности; результаты в виде HR и 95% ДИ). Для оценки частоты рецидива с учетом смерти как конкурирующего события (DFI) мы будем использовать функции кумулятивной заболеваемости и тесты Грея; для многомерного анализа — модель Файна-Грея (субкоэффициент риска, 95% ДИ). Связи между биомаркерами (ЦОК/цтДНК как непрерывные и/или дихотомизированные, например, ЦОК ≥1 клетка; VAF%/нг•мл) и зависящими от времени исходами будут оценены с помощью моделей Кокса/Файна-Грея; вероятность STAS и микрометастазов в лимфатических узлах — с помощью логистической регрессии. Динамика ЦОК/цтДНК до/после/во время наблюдения будет проанализирована с использованием парных тестов (Уилкоксона) и линейных/смешанных моделей с повторными измерениями или ANCOVA с поправкой на исходные значения. Влияние интраоперационных переменных на ΔЦОК/ΔцтДНК будет оценено с использованием линейных/смешанных моделей; на риск рецидива/смерти — с помощью моделей Кокса/Файна-Грея, с поправкой на возраст, пол, стадию, гистотип, степень (G3), висцеральную плевральную инвазию, PD-L1, доступ (открытый/VATS/RATS), объем резекции и адъювантные терапии (с возможной стратификацией по стадии). Отсутствующие данные будут обработаны с помощью множественного импутирования (предположение MAR), и будут проведены анализы чувствительности (например, с альтернативными порогами биомаркеров). Порог значимости α = 0,05 двусторонний; будут представлены p-значения и 95% ДИ; при необходимости будет применена поправка на множественные сравнения (Бенджамини-Хохберг). Анализ будет проводиться с использованием R/Stata/SPSS.