Tudásbázis a Tüdőrák Terjesztéséről (LUCID)

A műtéti úton kezelhető NSCLC-ben szenvedő betegeknél, akiket kizárólag műtéttel vagy műtétet magában foglaló multimodális kezeléssel kezelnek, a CTC, ctDNS, STAS és a nyirokcsomó-mikrometasztázis szinteket értékelni fogják annak megállapítására, hogy összefüggenek-e a recidíva mintákkal és a hosszú távú eredményekkel.

Ennek a cél eléréséhez a CTC és a ctDNS jelenlétét és mennyiségét három időpontban (műtét előtt és után, valamint a követés során) gyűjtött perifériás vénás vérből vett mintákból elemezik majd. Ezen felül a következő szempontokat értékelik majd másodlagos célként:

1. Az elsődleges tüdődaganatban található tumorsejtek és a STAS-ban és/vagy a nyirokcsomó-metasztázisokban jelen lévő tumorsejtek közötti térbeli transzkriptomikai konzisztencia, valamint az elsődleges tüdődaganat sejtjei és a keringő tumorsejtek közötti molekuláris profilbeli különbségek értékelése.
2. A műtét közbeni változók hatásának kvantifikálása a CTC és a ctDNS véráramba kerülésére.

A fő műtét közbeni változók:

• A hilaris szerkezetek reszekciójának sorrendje (pl. először a véna vs. először az artéria).
• Tüdőmanipulációs technikák (nyitott műtét, VATS, RATS).
• A reszekció mértéke (szegmentectomia, lobectomia, pneumonectomia). A CTC-k elemzése a jelenlegi arany standard platformon (CellSearch rendszer, Menarini Silicon Biosystems, Olaszország) történik majd, míg a ctDNS-t a Next Generation Sequencing (NGS) technológiával (ILLUMINA platform) értékelik majd.

A térbeli transzkriptomikai értékeléshez az elsődleges tumor és a STAS és/vagy nyirokcsomó-metasztázisok eozin és hematoxilinnal festett lemezeit elemezik majd a Xenium platformon (10x Genomics, USA) az mRNS-fajták térbeli kvantifikálására a Xenium Human Immuno-Oncology profilozó panel segítségével.

A projekt végpontjainál a folytonos változókat mediánként (IQR) írják majd le és t-próbákkal vagy Mann-Whitney-próbákkal hasonlítják össze; a kategorikus változókat n (%)-ként írják le és χ²/Fisher-próbákkal hasonlítják össze. Az OS-t és DFS-t Kaplan-Meierrel becsülik majd, log-rank tesztekkel hasonlítják össze, és többváltozós Cox-modellekkel elemezik majd (az arányossági feltételezés ellenőrzése; eredmények HR-ként és 95%-os CI-ként). A halált versengő eseménynek tekintve számított recidíva incidenciánál (DFI) kumulatív incidencia függvényeket és Gray-teszteket alkalmaznak majd; a többváltozós elemzéshez a Fine-Gray modellt (szub-hazard arány, 95% CI). A biomarkerek (CTC/ctDNS folytonos és/vagy dichotomizáltként, pl. CTC ≥1 sejt; VAF%/ng•mL) és az időfüggő eredmények közötti összefüggéseket Cox/Fine-Gray modellekkel értékelik majd; a STAS és a nyirokcsomó-mikrometasztázisok valószínűségét logisztikus regresszióval. A műtét előtti/utáni/követés során mért CTC/ctDNS dinamikát párosított tesztekkel (Wilcoxon) és lineáris/vegyes modellekkel elemezik majd ismételt mérésekkel vagy ANCOVA-val, az alapértékekre korrigálva. A műtét közbeni változók hatását a ΔCTC/ΔctDNS-re lineáris/vegyes modellekkel becsülik majd; a recidíva/halál kockázatára Cox/Fine-Gray modellekkel, korrigálva az életkor, a nem, a stádium, a hisztotípus, a grade (G3), a visceralis pleura invázió, a PD-L1, a megközelítés (Nyitott/VATS/RATS), a reszekció mértéke és az adjuváns terápiák szerint (esetlegesen stádium szerinti rétegezéssel). A hiányzó adatokat többszörös imputációval (MAR feltételezés) kezelik majd, és érzékenységi elemzéseket végeznek majd (pl. alternatív biomarkerküszöbértékek). A szignifikancia küszöb α = 0,05 kétoldali; a p-értékeket és a 95%-os CI-ket közlik majd; ha indokolt, többszörös összehasonlításokra korrekciót alkalmaznak (Benjamini-Hochberg). Elemzés R/Stata/SPSS-vel.