Näkemyksiä keuhkosyövän leviämisestä (LUCID)

Potilailla, joilla on leikattava NSCLC ja jotka on hoidettu pelkällä leikkauksella tai leikkauksena osana monimuotoista hoitoa, arvioidaan CTC-, ctDNA-, STAS- ja imusolmukemikrometastaasitasot nähdäkseen, ovatko ne yhteydessä toistumismalleihin ja pitkän aikavälin tuloksiin.

Tämän tavoitteen saavuttamiseksi CTC:n ja ctDNA:n esiintymistä ja määrää analysoidaan perifeerisistä laskimoverinäytteistä, jotka kerätään kolmessa ajankohdassa (ennen ja jälkeen leikkauksen sekä seurannan aikana). Lisäksi seuraavia näkökohtia arvioidaan toissijaisina tavoitteina:

1. Arvioida spatiaalisen transkriptomiikan yhdenmukaisuus primaarisen keuhkosyövän kasvainten solujen ja STAS:ssa ja/tai imusolukemetaastaaseissa olevien solujen välillä sekä molekyyliprofiilien erot primaarisen keuhkosyövän kasvainten solujen ja kiertävien kasvainten solujen välillä.
2. Kvantisoida leikkauksen aikana tapahtuvien muuttujien vaikutus CTC:iden ja ctDNA:n vapautumiseen verenkiertoon.

Tärkeimmät leikkauksen aikaiset muuttujat ovat:

• Hilaarrakenteiden resektion järjestys (esim. laskimo ensin vs. valtimo ensin).
• Keuhkon manipulointitekniikat (avoleikkaus, VATS, RATS).
• Resektion laajuus (segmentektomia, lobektomia, pneumonektomia). CTC:itä analysoidaan käyttämällä nykyistä kultastandardia CTC:itä analysoidaan käyttämällä nykyistä kultastandardialustaa CTC (CellSearch-järjestelmä, Menarini Silicon Biosystems, Italia), kun taas ctDNA:ta arvioidaan käyttämällä Next Generation Sequencing (NGS) -tekniikkaa (ILLUMINA-alusta).

Spatiaalisen transkriptomiikan arviointia varten primaarisen kasvaimen sekä STAS:n ja/tai imusolukemetaastaasien eosiinilla ja hematoksyylillä värjätyt liu'ut analysoidaan käyttämällä Xenium-alustaa (10x Genomics, USA) spatiaalisesti kvantifioidakseen mRNA-lajeja Xenium Human Immuno-Oncology -profilointipaneelilla.

Projektin päätepisteitä varten jatkuvat muuttujat kuvataan mediaanina (IQR) ja verrataan t-testillä tai Mann-Whitney-testillä; kategoriset muuttujat kuvataan n (%) ja verrataan χ²/Fisher-testeillä. OS ja DFS arvioidaan Kaplan-Meier-menetelmällä, verrataan log-rank-testeillä ja analysoidaan monimuuttujaisilla Cox-malleilla (suhteellisuusoletuksen tarkistus; tulokset HR:na ja 95 % CI). Toistumisen ilmaantuvuutta varten, kun kuolemaa pidetään kilpailevana tapahtumana (DFI), käytetään kumulatiivisia ilmaantuvuusfunktioita ja Gray-testejä; monimuuttuja-analyysissä Fine-Gray-mallia (alivaarallisuussuhde, 95 % CI). Biomarkkereiden (CTC/ctDNA jatkuvina ja/tai dikotomisoituina, esim. CTC ≥1 solu; VAF %/ng•mL) ja ajasta riippuvien tulosten välisiä yhteyksiä arvioidaan Cox/Fine-Gray-menetelmillä; STAS:n ja imusolukemikrometastaasien todennäköisyyttä logistisella regressiolla. Ennen/jälkeen/seurannan CTC/ctDNA-dynamiikkaa analysoidaan paritettuilla testeillä (Wilcoxon) ja lineaarisilla/sekoitetuilla malleilla toistetuilla mittauksilla tai ANCOVA:lla säädellen perusarvojen mukaan. Leikkauksen aikana tapahtuvien muuttujien vaikutus ΔCTC/ΔctDNA:han arvioidaan lineaarisilla/sekoitetuilla malleilla; toistumisen/kuoleman riskiin Cox/Fine-Gray-menetelmillä, säädellen iän, sukupuolen, vaiheen, histotyypin, asteen (G3), viskeraalisen pleura-invaasion, PD-L1:n, lähestymistavan (Open/VATS/RATS), resection laajuuden ja adjuvanssiterapioiden mukaan (mahdollisella vaiheittaisella kerroittamisella). Puuttuvia tietoja käsitellään moninkertaisella imputaatiolla (MAR-oletus) ja herkkyysanalyysit suoritetaan (esim. vaihtoehtoisilla biomarkkerikynnyksillä). Merkittävyyskynnys α = 0,05 kaksisuuntainen; p-arvot ja 95 % CI raportoidaan; tarvittaessa korjaus monille vertailuille (Benjamini-Hochberg). Analyysi R/Stata/SPSS:llä.