Innsikter om spredning av lungekreft (LUCID)

Hos pasienter med resektabel NSCLC behandlet med kirurgi alene eller med kirurgi som del av en multimodal behandling, vil nivåer av CTC, ctDNA, STAS og lymfeknute-mikrometastaser bli evaluert for å se om de er assosiert med tilbakefallsmønstre og langsiktige utfall.

For å oppnå dette målet vil tilstedeværelse og telling av CTC og ctDNA bli analysert fra perifere venøse blodprøver samlet inn på tre tidspunkter (før og etter kirurgi og under oppfølging). I tillegg vil følgende aspekter bli evaluert som sekundære mål:

1. Evaluer konsistensen av romlig transkriptomikk mellom tumorceller lokalisert i den primære lungekreften og de som er tilstede i STAS og/eller lymfeknute-metastaser, samt forskjeller i det molekylære profilen mellom primære lungekreftceller og sirkulerende tumorceller.
2. Kvantifiser innvirkningen av intraoperative variabler på frigjøringen av CTC og ctDNA inn i blodbanen.

De viktigste intraoperative variablene er:

• Rekkefølgen av reseksjon av hilære strukturer (f.eks. vene først vs. arterie først).
• Lungemanipulasjonsteknikker (åpen kirurgi, VATS, RATS).
• Omfanget av reseksjon (segmentektomi, lobektomi, pneumonektomi). CTC vil bli analysert ved bruk av den nåværende gullstandarden CTC vil bli analysert ved bruk av den nåværende gullstandardplattformen CTC (CellSearch-system, Menarini Silicon Biosystems, Italia), mens ctDNA vil bli evaluert ved bruk av Next Generation Sequencing (NGS)-teknologi (ILLUMINA-plattformen).

For romlig transkriptomikk-vurdering vil eosin- og hematoksylin-fargede preparater av den primære tumor og STAS og/eller lymfeknute-metastaser bli analysert ved bruk av Xenium-plattformen (10x Genomics, USA) for romlig kvantifisering av mRNA-arter med Xenium Human Immuno-Oncology-profileringspanelet.

For prosjektets endepunkter vil kontinuerlige variabler beskrives som median (IQR) og sammenlignes med t-tester eller Mann-Whitney-tester; kategoriske variabler vil beskrives som n (%) og sammenlignes med χ²/Fisher-tester. OS og DFS vil estimeres med Kaplan-Meier, sammenlignes med log-rank-tester og analyseres med multivariate Cox-modeller (verifisering av proporsjonalitetsantagelse; resultater som HR og 95 % KI). For insidensen av tilbakefall med død som en konkurrerende hendelse (DFI), vil vi bruke kumulative insidensfunksjoner og Gray-tester; for multivariat analyse, Fine-Gray-modellen (sub-hazard ratio, 95 % KI). Assosiasjoner mellom biomarkører (CTC/ctDNA som kontinuerlige og/eller dikotomiserte, f.eks. CTC ≥1 celle; VAF%/ng•mL) og tidsavhengige utfall vil evalueres med Cox/Fine-Gray; sannsynligheten for STAS og lymfeknute-mikrometastaser med logistisk regresjon. Pre-/post-/oppfølging CTC/ctDNA-dynamikk vil analyseres med parrede tester (Wilcoxon) og lineære/blandede modeller med gjentatte målinger eller ANCOVA justert for basislinjeverdier. Effekten av intraoperative variabler på ΔCTC/ΔctDNA vil estimeres med lineære/blandede modeller; på risikoen for tilbakefall/død med Cox/Fine-Gray, justert for alder, kjønn, stadium, histotype, grad (G3), visceralt pleurainvasjon, PD-L1, tilnærming (Åpen/VATS/RATS), omfang av reseksjon og adjuvante terapier (med mulig stratifisering etter stadium). Manglende data vil behandles med multiple imputasjoner (MAR-antagelse) og følsomhetsanalyser vil utføres (f.eks. alternative biomarkør terskler). Signifikant terskel α = 0,05 tosidig; p-verdier og 95 % KI vil rapporteres; når det er hensiktsmessig, korreksjon for multiple sammenligninger (Benjamini-Hochberg). Analyse med R/Stata/SPSS.