Insikter om spridning av lungcancer (LUCID)

Hos patienter med resektabel NSCLC som behandlas med kirurgi ensamt eller med kirurgi som en del av en multimodal behandling kommer nivåer av CTC, ctDNA, STAS och lymfkörtelmikrometastaser att utvärderas för att se om de är associerade med återfallsmönster och långsiktiga utfall.

För att uppnå detta mål kommer förekomsten och antalet CTC och ctDNA att analyseras från perifera venösa blodprover som samlas in vid tre tidpunkter (före och efter operation samt under uppföljning). Dessutom kommer följande aspekter att utvärderas som sekundära mål:

1. Utvärdera överensstämmelsen av rumslig transkriptomik mellan tumörceller som finns i den primära lungtumören och de som finns i STAS och/eller lymfkörtelmetastaser, samt skillnader i den molekylära profilen mellan primära lungtumörceller och cirkulerande tumörceller.
2. Kvantifiera effekten av intraoperativa variabler på frisättningen av CTC och ctDNA i blodomloppet.

De huvudsakliga intraoperativa variablerna är:

• Resektionssekvensen av hilarstrukturer (t.ex. ven först vs. artär först).
• Lungmanipulationstekniker (öppen kirurgi, VATS, RATS).
• Resektionsomfånget (segmentektomi, lobektomi, pneumonektomi). CTC kommer att analyseras med den nuvarande guldstandarden (CellSearch-system, Menarini Silicon Biosystems, Italien), medan ctDNA kommer att utvärderas med Next Generation Sequencing (NGS)-teknik (ILLUMINA-plattform).

För bedömning av rumslig transkriptomik kommer eosinfärgade och hematoxylinfärgade preparat av primärtumören samt STAS och/eller lymfkörtelmetastaser att analyseras med Xenium-plattformen (10x Genomics, USA) för att rumsligt kvantifiera mRNA-arter med Xenium Human Immuno-Oncology profileringspanel.

För projektets slutpunkter kommer kontinuerliga variabler att beskrivas som median (IQR) och jämföras med t-tester eller Mann-Whitney-tester; kategoriska variabler beskrivs som n (%) och jämförs med χ²/Fisher-tester. OS och DFS kommer att beräknas med Kaplan-Meier, jämföras med log-rank-tester och analyseras med multivariata Cox-modeller (verifiering av proportionalitetsantagande; resultat som HR och 95% CI). För incidensen av återfall med död som en konkurrerande händelse (DFI) kommer vi att använda kumulativa incidensfunktioner och Gray-tester; för multivariat analys, Fine-Gray-modellen (sub-hazard ratio, 95% CI). Associationer mellan biomarkörer (CTC/ctDNA som kontinuerliga och/eller dikotomiserade, t.ex. CTC ≥1 cell; VAF%/ng•mL) och tidsberoende utfall utvärderas med Cox/Fine-Gray; sannolikheten för STAS och lymfkörtelmikrometastaser med logistisk regression. Pre-/post-/uppföljningsdynamik för CTC/ctDNA analyseras med parade tester (Wilcoxon) och linjära/mixade modeller med upprepade mätningar eller ANCOVA justerade för baslinjevärden. Effekten av intraoperativa variabler på ΔCTC/ΔctDNA uppskattas med linjära/mixade modeller; på risken för återfall/död med Cox/Fine-Gray, justerat för ålder, kön, stadium, histotyp, grad (G3), visceralt pleurainvasion, PD-L1, tillvägagångssätt (Open/VATS/RATS), resektionsomfång och adjuvanta terapier (med möjlig stratifiering efter stadium). Saknade data hanteras med multipel imputering (MAR-antagande) och sensitivitetsanalyser utförs (t.ex. alternativa biomarkörtrösklar). Signifikantströskel α = 0.05 tvåsidig; p-värden och 95% CI rapporteras; vid behov korrigering för multipla jämförelser (Benjamini-Hochberg). Analys med R/Stata/SPSS.