Erkenntnisse zur Verbreitung von Lungenkrebs (LUCID)

Bei Patienten mit resektablem NSCLC, die entweder allein mit einer Operation oder mit einer Operation als Teil einer multimodalen Behandlung behandelt wurden, werden die Werte von CTC, ctDNA, STAS und Lymphknoten-Mikrometastasen ausgewertet, um festzustellen, ob sie mit Rezidivmustern und Langzeitergebnissen assoziiert sind.

Um dieses Ziel zu erreichen, werden das Vorhandensein und die Anzahl von CTC und ctDNA aus peripheren venösen Blutproben analysiert, die zu drei Zeitpunkten entnommen werden (vor und nach der Operation sowie während der Nachsorge). Zusätzlich werden folgende Aspekte als sekundäre Ziele bewertet:

1. Bewertung der Übereinstimmung der räumlichen Transkriptomik zwischen Tumorzellen im primären Lungentumor und solchen in STAS und/oder Lymphknotenmetastasen sowie der Unterschiede im molekularen Profil zwischen primären Lungentumorzellen und zirkulierenden Tumorzellen.
2. Quantifizierung der Auswirkung intraoperativer Variablen auf die Freisetzung von CTCs und ctDNA in den Blutkreislauf.

Die wichtigsten intraoperativen Variablen sind:

• Die Reihenfolge der Resektion hilärer Strukturen (z. B. Vene zuerst vs. Arterie zuerst).
• Lungenmanipulationstechniken (offene Chirurgie, VATS, RATS).
• Das Ausmaß der Resektion (Segmentektomie, Lobektomie, Pneumonektomie). CTCs werden mit der derzeitigen Goldstandard-Plattform analysiert (CellSearch-System, Menarini Silicon Biosystems, Italien), während ctDNA mithilfe von Next-Generation-Sequencing (NGS)-Technologie (ILLUMINA-Plattform) ausgewertet wird.

Für die Bewertung der räumlichen Transkriptomik werden mit Eosin und Hämatoxylin gefärbte Schnitte des Primärtumors sowie von STAS und/oder Lymphknotenmetastasen mit der Xenium-Plattform (10x Genomics, USA) analysiert, um mRNA-Arten räumlich mit dem Xenium Human Immuno-Oncology Profiling Panel zu quantifizieren.

Für Projektendpunkte werden kontinuierliche Variablen als Median (IQR) beschrieben und mit t-Tests oder Mann-Whitney-Tests verglichen; kategoriale Variablen werden als n (%) beschrieben und mit χ²-/Fisher-Tests verglichen. OS und DFS werden mit Kaplan-Meier geschätzt, mit Log-Rank-Tests verglichen und mit multivariaten Cox-Modellen analysiert (Überprüfung der Proportionalitätsannahme; Ergebnisse als HR und 95% KI). Für die Inzidenz von Rezidiven unter Berücksichtigung von Tod als konkurrierendes Ereignis (DFI) verwenden wir kumulative Inzidenzfunktionen und Gray-Tests; für die multivariate Analyse das Fine-Gray-Modell (Sub-Hazard-Ratio, 95% KI). Zusammenhänge zwischen Biomarkern (CTC/ctDNA als kontinuierliche und/oder dichotomisierte, z. B. CTC ≥1 Zelle; VAF%/ng•mL) und zeitabhängigen Ergebnissen werden mit Cox-/Fine-Gray-Modellen bewertet; die Wahrscheinlichkeit von STAS und Lymphknoten-Mikrometastasen mit logistischer Regression. Die Dynamik von CTC/ctDNA vor/nach/während der Nachsorge wird mit gepaarten Tests (Wilcoxon) und linearen/gemischten Modellen mit wiederholten Messungen oder ANCOVA unter Anpassung der Ausgangswerte analysiert. Die Auswirkung intraoperativer Variablen auf ΔCTC/ΔctDNA wird mit linearen/gemischten Modellen geschätzt; auf das Rezidiv-/Sterberisiko mit Cox-/Fine-Gray-Modellen, adjustiert für Alter, Geschlecht, Stadium, Histotyp, Grad (G3), viszerale Pleurainvasion, PD-L1, Zugang (offen/VATS/RATS), Resektionsausmaß und adjuvante Therapien (mit möglicher Stratifizierung nach Stadium). Fehlende Daten werden mit multipler Imputation behandelt (MAR-Annahme), und Sensitivitätsanalysen werden durchgeführt (z. B. alternative Biomarker-Schwellenwerte). Signifikanzschwelle α = 0,05 zweiseitig; p-Werte und 95% KIs werden angegeben; bei Bedarf Korrektur für multiple Vergleiche (Benjamini-Hochberg). Analyse mit R/Stata/SPSS.