Inzichten over de verspreiding van longkanker (LUCID)

Bij patiënten met reseceerbaar NSCLC die behandeld worden met alleen chirurgie of met chirurgie als onderdeel van een multimodale behandeling, zullen CTC, ctDNA, STAS en lymfeklier micrometastase niveaus worden geëvalueerd om te zien of ze geassocieerd zijn met recidiefpatronen en langetermijnuitkomsten.

Om dit doel te bereiken, worden de aanwezigheid en telling van CTC en ctDNA geanalyseerd uit perifere veneuze bloedmonsters die op drie tijdstippen zijn verzameld (voor en na de operatie en tijdens follow-up). Daarnaast worden de volgende aspecten geëvalueerd als secundaire doelstellingen:

1. Evalueer de consistentie van ruimtelijke transcriptomica tussen tumorcellen in de primaire longtumor en die aanwezig in STAS en/of lymfekliermetastasen, evenals verschillen in het moleculaire profiel tussen primaire longtumorcellen en circulerende tumorcellen.
2. Kwantificeer de impact van intraoperatieve variabelen op de afgifte van CTC's en ctDNA in de bloedbaan.

De belangrijkste intraoperatieve variabelen zijn:

• De volgorde van resectie van hilusstructuren (bijv. eerst de ader vs. eerst de slagader).
• Longmanipulatietechnieken (open chirurgie, VATS, RATS).
• De omvang van de resectie (segmentectomie, lobectomie, pneumonectomie). CTC's worden geanalyseerd met het huidige gouden standaardplatform CTC (CellSearch-systeem, Menarini Silicon Biosystems, Italië), terwijl ctDNA wordt geëvalueerd met Next Generation Sequencing (NGS)-technologie (ILLUMINA-platform).

Voor de beoordeling van ruimtelijke transcriptomica worden met eosine en hematoxyline gekleurde preparaten van de primaire tumor en STAS en/of lymfekliermetastasen geanalyseerd met het Xenium-platform (10x Genomics, USA) om mRNA-soorten ruimtelijk te kwantificeren met het Xenium Human Immuno-Oncology-profileringspanel.

Voor projecteindpunten worden continue variabelen beschreven als mediaan (IQR) en vergeleken met t-tests of Mann-Whitney-tests; categorische variabelen worden beschreven als n (%) en vergeleken met χ²/Fisher-tests. OS en DFS worden geschat met Kaplan-Meier, vergeleken met log-rank-tests en geanalyseerd met multivariate Cox-modellen (verificatie van proportionaliteitsaanname; resultaten als HR en 95% BI). Voor de incidentie van recidief waarbij dood als concurrerende gebeurtenis wordt beschouwd (DFI), gebruiken we cumulatieve incidentiefuncties en Gray-tests; voor multivariate analyse het Fine-Gray-model (sub-hazard ratio, 95% BI). Associaties tussen biomarkers (CTC/ctDNA als continu en/of gedichotomiseerd, bijv. CTC ≥1 cel; VAF%/ng•mL) en tijdafhankelijke uitkomsten worden geëvalueerd met Cox/Fine-Gray; de kans op STAS en lymfeklier micrometastasen met logistische regressie. Pre-/post-/follow-up CTC/ctDNA-dynamiek wordt geanalyseerd met gepaarde tests (Wilcoxon) en lineaire/gemengde modellen met herhaalde metingen of ANCOVA gecorrigeerd voor basislijnwaarden. Het effect van intraoperatieve variabelen op ΔCTC/ΔctDNA wordt geschat met lineaire/gemengde modellen; op het risico op recidief/dood met Cox/Fine-Gray, gecorrigeerd voor leeftijd, geslacht, stadium, histotype, graad (G3), viscerale pleurale invasie, PD-L1, benadering (Open/VATS/RATS), omvang van resectie en adjuvante therapieën (met mogelijke stratificatie op stadium). Ontbrekende gegevens worden behandeld met meervoudige imputatie (MAR-aanname) en gevoeligheidsanalyses worden uitgevoerd (bijv. alternatieve biomarkerdrempels). Significantiedrempel α = 0,05 tweezijdig; p-waarden en 95% BI's worden gerapporteerd; indien van toepassing correctie voor meervoudige vergelijkingen (Benjamini-Hochberg). Analyse met R/Stata/SPSS.