Indsigter i udbredelsen af lungekræft (LUCID)

Hos patienter med resektabel NSCLC, der behandles med kirurgi alene eller med kirurgi som en del af en multimodal behandling, vil CTC, ctDNA, STAS og mikrometastaseniveauer i lymfeknuderne blive evalueret for at se, om de er forbundet med recidivmønstre og langsigtede resultater.

For at opnå dette mål vil tilstedeværelsen og antallet af CTC og ctDNA blive analyseret fra perifere venøse blodprøver indsamlet på tre tidspunkter (før og efter kirurgi og under opfølgning). Desuden vil følgende aspekter blive evalueret som sekundære mål:

1. Evaluer konsistensen af spatial transkriptomik mellem tumorceller placeret i den primære lungekræft og dem, der er til stede i STAS og/eller lymfeknudemetastaser, samt forskelle i det molekylære profil mellem primære lungekræftceller og cirkulerende tumorceller.
2. Kvantificer indvirkningen af intraoperative variabler på frigivelsen af CTC'er og ctDNA i blodbanen.

De vigtigste intraoperative variabler er:

• Rækkefølgen af resektion af hilære strukturer (f.eks. vene først vs. arterie først).
• Lungemanipulationsteknikker (åben kirurgi, VATS, RATS).
• Omfanget af resektionen (segmentektomi, lobektomi, pneumonektomi). CTC'er vil blive analyseret ved hjælp af den nuværende guldstandardplatform CTC (CellSearch-systemet, Menarini Silicon Biosystems, Italien), mens ctDNA vil blive evalueret ved hjælp af Next Generation Sequencing (NGS)-teknologi (ILLUMINA-platform).

For vurdering af spatial transkriptomik vil eosin- og hematoxylin-farvede prøver af den primære tumor og STAS og/eller lymfeknudemetastaser blive analyseret ved hjælp af Xenium-platformen (10x Genomics, USA) for rumligt at kvantificere mRNA-arter med Xenium Human Immuno-Oncology-profileringspanellet.

For projektets slutpunkter vil kontinuerte variable blive beskrevet som median (IQR) og sammenlignet ved hjælp af t-tests eller Mann-Whitney-tests; kategoriske variable vil blive beskrevet som n (%) og sammenlignet ved hjælp af χ²/Fisher-tests. OS og DFS vil blive estimeret ved hjælp af Kaplan-Meier, sammenlignet med log-rank-tests og analyseret ved hjælp af multivariate Cox-modeller (verifikation af proportionalitetsantagelse; resultater som HR og 95% CI). For incidensen af recidiv med døden som en konkurrerende begivenhed (DFI) vil vi bruge kumulative incidensfunktioner og Gray-tests; til multivariat analyse, Fine-Gray-modellen (sub-hazard ratio, 95% CI). Sammenhænge mellem biomarkører (CTC/ctDNA som kontinuerte og/eller dikotomiserede, f.eks. CTC ≥1 celle; VAF%/ng·mL) og tidsafhængige resultater vil blive evalueret med Cox/Fine-Gray; sandsynligheden for STAS og mikrometastaser i lymfeknuder med logistisk regression. Dynamikker for CTC/ctDNA før/efter/under opfølgning vil blive analyseret ved hjælp af parrede tests (Wilcoxon) og lineære/blandede modeller med gentagne målinger eller ANCOVA med justering for basislinjeværdier. Effekten af intraoperative variabler på ΔCTC/ΔctDNA vil blive estimeret ved hjælp af lineære/blandede modeller; på risikoen for recidiv/død med Cox/Fine-Gray, justeret for alder, køn, stadium, histotype, grad (G3), visceralt pleurainvasion, PD-L1, tilgang (åben/VATS/RATS), omfang af resektion og adjuvante terapier (med mulig stratificering efter stadium). Manglende data vil blive behandlet med multipel imputering (MAR-antagelse) og følsomhedsanalyser vil blive udført (f.eks. alternative biomarkør-tærskler). Signifikansgrænse α = 0,05 tosidet; p-værdier og 95% CI vil blive rapporteret; når det er passende, korrektion for multiple sammenligninger (Benjamini-Hochberg). Analyse med R/Stata/SPSS.