小児および若年成人におけるペグアスパラギナーゼに対する抗薬物抗体を有する患者のT細胞受容体およびB細胞受容体レパートリーの理解

このサブ研究の目的は、PEG-アスパラギナーゼに対する過敏症を持つALLの小児および若年成人におけるバイオマーカーを特定することです。

中和抗体18を伴うアスパラギナーゼの免疫原性には、液性免疫が強く関与していることが示唆されています。アスパラギナーゼは細菌性酵素であり、ヒトの体内には自然には存在しないため、非常に免疫原性が高いです。投与されると、抗原提示細胞が酵素の断片を取り込み、ナイーブT細胞に提示し、それらをTh2ヘルパー細胞へと分化させ、B細胞の分化を促すシグナルを送ります。活性化されたB細胞の一部は、骨髄（BM）にホーミングする長寿命の形質細胞へと成熟し、そこで抗アスパラギナーゼ抗体（AAA）を継続的に分泌します。他のB細胞は記憶B細胞へと分化し、迅速な抗体応答を可能にします。この免疫学的記憶により、一度感作が起こると、アスパラギナーゼへの再曝露が強い過敏反応を引き起こし、さらなる治療を危険なものにします。しかし、臨床的重要性にもかかわらず、AAAに対するTCRレパートアに関する研究は1つしか存在せず、これまでにAAAを持つ小児のB細胞受容体（BCR）レパートアを直接プロファイリングした研究はありません14。BCRシーケンシングは最近開発されました。血液と骨髄からのBCR-seqを血清プロテオミクス（Ig-Seq）と統合することで、特定の形質細胞クローンと循環AAAを直接関連付けることができます。このアプローチは、薬剤の免疫原性に関する機構的知見を提供し、ALLの小児および若年成人における過敏症リスクの分子的バイオマーカーの同定を可能にします。

方法：

私たちは、A2G-1で治療された導入療法および統合後療法の一環としてPEG-アスパラギナーゼを受ける小児および若年成人ALL患者を対象とした縦断的デンマークコホート研究を行います。過敏症のある患者20名と過敏症のない患者20名を対象とします。生物学的サンプルは、ベースライン時、PEG-アスパラギナーゼ曝露後の早期、臨床的過敏症時、およびA2G-1に従った追跡時点で収集されます。これらのサンプルを、同じ時点からのEDTA血漿サンプルと対にします。形質細胞の濃縮とともに、バルクTCRおよびBCRレパートアとクロノタイプのシーケンシングを行います。血漿からは、血清プロテオミクスを行い、循環AAAのペプチド断片を同定します。Ig-SeqペプチドをPBMCおよび骨髄からのBCR配列とアライメントし、特定の抗体をそのクローン性形質細胞起源にマッピングします。このアプローチにより、レパートアデータと病原性抗体との直接的な機能的関連が得られます。

骨髄レパートアを血液サンプルと比較し、循環クローンが優性の骨髄内形質細胞を反映しているかどうかを判断します。もしAAA特異的BCRが血液中で確実に検出できるなら、これは非侵襲的バイオマーカーとして機能し、骨髄サンプリングの必要性を減らす可能性があります。