COMPRÉHENSION DU RÉPERTOIRE DES RÉCEPTEURS DES CELLULES T ET B CHEZ LES ENFANTS ET LES JEUNES ADULTES AVEC DES ANTICORPS ANTI-MÉDICAMENTS CONTRE L'ASPARAGINASE PEGYLÉE

L'objectif de cette sous-étude est d'identifier des biomarqueurs chez les enfants et les jeunes adultes atteints de LAL présentant une hypersensibilité à la PEG-asparaginase.

Les preuves impliquent fortement l'immunité humorale dans l'immunogénicité de l'asparaginase avec des anticorps neutralisants18. L'asparaginase est une enzyme bactérienne non naturellement présente dans le corps humain, et donc hautement immunogène. Lors de l'administration, les cellules présentatrices d'antigène internalisent et présentent des fragments de l'enzyme aux lymphocytes T naïfs, entraînant leur différenciation en lymphocytes T auxiliaires Th2 qui signalent la différenciation des lymphocytes B. Un sous-ensemble de lymphocytes B activés mûrit en plasmocytes à longue durée de vie qui migrent vers la moelle osseuse (MO), où ils sécrètent continuellement des anticorps anti-asparaginase (AAA). D'autres se différencient en lymphocytes B mémoire qui permettent des réponses anticorps rapides. Cette mémoire immunologique signifie qu'une fois la sensibilisation survenue, une réexposition à l'asparaginase déclenche de fortes réactions d'hypersensibilité rendant tout traitement ultérieur dangereux. Pourtant, malgré l'importance clinique, une seule étude existe sur le répertoire des TCR en réponse aux AAA, mais à ce jour, aucune étude n'a directement profilé le répertoire des récepteurs des lymphocytes B (BCR) chez les enfants avec AAA14. Le séquençage des BCR a récemment été développé. En intégrant le BCR-seq du sang et de la MO avec la protéomique sérique (Ig-Seq), nous pouvons directement lier des clones spécifiques de plasmocytes aux AAA circulants. Cette approche fournira un aperçu mécanistique de l'immunogénicité médicamenteuse et permettra l'identification de biomarqueurs moléculaires du risque d'hypersensibilité chez les enfants et les jeunes adultes atteints de LAL.

Méthodes :

Nous réaliserons une étude de cohorte longitudinale danoise chez des patients pédiatriques et jeunes adultes atteints de LAL recevant de la PEG-asparaginase dans le cadre de la thérapie d'induction et de post-consolidation traités selon le protocole A2G-1. Nous inclurons 20 patients avec hypersensibilité et 20 sans. Les échantillons biologiques seront collectés au départ, tôt après l'exposition à la PEG-asparaginase, lors d'une hypersensibilité clinique, et aux points de suivi selon le protocole A2G-1. Nous appairerons ces échantillons avec des échantillons de plasma EDTA des mêmes moments. Nous réaliserons un enrichissement des plasmocytes ainsi qu'un séquençage en vrac du répertoire et des clonotypes des TCR et BCR. À partir du plasma, nous effectuerons une protéomique sérique pour identifier les fragments peptidiques des AAA circulants. Nous alignerons les peptides Ig-Seq avec les séquences BCR des PBMC et de la MO pour cartographier les anticorps spécifiques à leur origine clonale de plasmocytes. Cette approche établit un lien fonctionnel direct entre les données de répertoire et les anticorps pathogènes.

Nous comparerons les répertoires de la MO avec les échantillons sanguins pour déterminer si les clones circulants reflètent les plasmocytes résidents dominants de la moelle. Si les BCR spécifiques aux AAA peuvent être détectés de manière fiable dans le sang, cela pourrait servir de biomarqueur non invasif, réduisant le besoin de prélèvement de moelle osseuse.