了解儿童及青少年体内抗聚乙二醇门冬酰胺酶药物抗体中的T细胞与B细胞受体库

本子研究旨在识别对PEG-天冬酰胺酶过敏的儿童和青年急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中的生物标志物。

证据强烈表明体液免疫在天冬酰胺酶免疫原性中起关键作用，并伴有中和抗体18。天冬酰胺酶是一种细菌酶，在人体内并不天然存在，因此具有高度免疫原性。给药后，抗原呈递细胞将酶片段内化并呈递给初始T细胞，驱动其分化为Th2辅助细胞，进而促进B细胞分化。一部分活化的B细胞成熟为长寿命浆细胞，归巢至骨髓（BM），在那里持续分泌抗天冬酰胺酶抗体（AAA）。其他则分化为记忆B细胞，使抗体反应能够快速发生。这种免疫记忆意味着一旦发生致敏，再次接触天冬酰胺酶会引发强烈的过敏反应，使进一步治疗变得不安全。然而，尽管具有临床重要性，目前仅有一项研究关注T细胞受体（TCR）库对AAA的反应，但迄今为止尚无研究直接分析儿童AAA患者的B细胞受体（BCR）库14。BCR测序技术最近已得到发展。通过整合来自血液和骨髓的BCR测序（BCR-seq）与血清蛋白质组学（Ig-Seq），我们可以直接将特定的浆细胞克隆与循环中的AAA联系起来。这种方法将为药物免疫原性提供机制性见解，并有助于识别儿童和青年ALL患者过敏风险的分子生物标志物。

方法：

我们将对接受PEG-天冬酰胺酶作为诱导和巩固后治疗一部分的儿童和青年ALL患者进行一项纵向丹麦队列研究，这些患者按照A2G-1方案进行治疗。我们将包括20名过敏患者和20名非过敏患者。生物样本将在基线、PEG-天冬酰胺酶早期暴露后、临床过敏时以及根据A2G-1方案的随访时间点收集。我们将这些样本与同一时间点的EDTA血浆样本配对。我们将进行浆细胞富集，以及批量TCR和BCR库与克隆型测序。从血浆中，我们将进行血清蛋白质组学分析，以识别循环AAA的肽片段。我们将比对Ig-Seq肽段与来自外周血单个核细胞（PBMC）和骨髓的BCR序列，以将特定抗体映射到其克隆浆细胞来源。这种方法在库数据与致病抗体之间建立了直接的功能联系。

我们将比较骨髓库与血液样本，以确定循环克隆是否反映了主要的骨髓驻留浆细胞。如果AAA特异性BCR可以在血液中可靠检测，这可能作为一种非侵入性生物标志物，减少骨髓采样的需求。