PEG 아스파라기나제에 대한 항약물 항체를 가진 소아 및 젊은 성인의 T-세포 및 B-세포 수용체 레퍼토어 이해

본 하위 연구의 목표는 PEG-아스파라기나제에 과민반응을 보이는 ALL(급성 림프구성 백혈병) 환아 및 젊은 성인에서 생체표지자를 확인하는 것입니다.

증거는 아스파라기나제 면역원성에 대한 중화항체18과 체액면역이 강하게 연관되어 있음을 시사합니다. 아스파라기나제는 인체에 자연적으로 존재하지 않는 세균성 효소로, 따라서 매우 면역원성이 높습니다. 투여 시, 항원제시세포는 이 효소의 단편을 내재화하여 미성숙 T 세포에 제시하며, 이는 B 세포의 분화를 신호하는 Th2 보조 T 세포로의 분화를 유도합니다. 활성화된 B 세포의 일부는 장수형 형질세포로 성숙하여 골수(BM)로 이동하며, 여기서 지속적으로 항-아스파라기나제 항체(AAA)를 분비합니다. 다른 세포들은 기억 B 세포로 분화하여 빠른 항체 반응을 가능하게 합니다. 이러한 면역 기억은 일단 감작이 발생하면, 아스파라기나제에 재노출될 때 강한 과민반응을 유발하여 추가 치료를 불가능하게 만듭니다. 그러나 임상적 중요성에도 불구하고, AAA에 대한 TCR 레퍼토어 연구는 단 한 건만 존재하며, 현재까지 AAA를 가진 환아에서 B 세포 수용체(BCR) 레퍼토어를 직접 분석한 연구는 없습니다14. BCR 시퀀싱은 최근 개발되었습니다. 혈액과 골수에서의 BCR-seq를 혈청 단백체학(Ig-Seq)과 통합함으로써, 우리는 특정 형질세포 클론을 순환하는 AAA에 직접 연결할 수 있습니다. 이 접근법은 약물 면역원성에 대한 기전적 통찰을 제공하고, ALL 환아 및 젊은 성인에서 과민반응 위험의 분자 생체표지자 확인을 가능하게 할 것입니다.

방법:

우리는 A2G-1 프로토콜 하에 유도 및 공고 후 요법의 일부로 PEG-아스파라기나제를 투여받는 소아 및 젊은 성인 ALL 환자를 대상으로 한 덴마크 종단 코호트 연구를 수행할 것입니다. 과민반응이 있는 20명의 환자와 없는 20명의 환자를 포함할 예정입니다. 생물학적 샘플은 기준선, PEG-아스파라기나제 초기 노출 후, 임상적 과민반응 시점, 그리고 A2G-1에 따른 추적 관찰 시점에 수집됩니다. 우리는 이러한 샘플을 동일 시점의 EDTA-혈장 샘플과 짝지을 것입니다. 우리는 형질세포의 농축과 함께 벌크 TCR 및 BCR 레퍼토어 및 클론타입 시퀀싱을 수행할 것입니다. 혈장에서는 혈청 단백체학을 수행하여 순환하는 AAA의 펩타이드 단편을 확인할 것입니다. 우리는 Ig-Seq 펩타이드를 PBMC와 골수의 BCR 서열과 정렬하여 특정 항체를 그 클론성 형질세포 기원에 매핑할 것입니다. 이 접근법은 레퍼토어 데이터와 병원성 항체 간의 직접적인 기능적 연결을 제공합니다.

우리는 골수 레퍼토어를 혈액 샘플과 비교하여 순환하는 클론이 우세한 골수 거주 형질세포를 반영하는지 확인할 것입니다. 만약 AAA 특이적 BCR이 혈액에서 신뢰성 있게 검출될 수 있다면, 이는 비침습적 생체표지자로 작용하여 골수 채취의 필요성을 줄일 수 있을 것입니다.