폐암 뇌 전이의 프로테옴 기반 면역 요법

이 임상시험에는 1회 이상의 표준 화학요법과 완전한 방사선요법 과정을 거친 후 다양한 악성종양의 폐암(BMLC)으로 인한 굴절 뇌전이 사례 60건이 포함됩니다.

참가자는 실험(1차 치료) 부문에 들어가고 20개 사례의 3개 하위 그룹으로 세분화됩니다: 뇌 전이가 있는 조직학적으로 확인된 폐 선암종 사례의 그룹 I; 뇌 전이가 있는 조직학적으로 확인된 소세포 폐암 사례의 그룹 II; 및 뇌 전이가 있는 편평 세포 폐암 사례의 그룹 III.

BMLC의 1차 요법은 동종이계 일배체 조혈 줄기 세포(HSC), 수지상 백신(DV) 및 세포독성 림프구(CTL)를 포함합니다.

HSC는 개별화된 입양 면역 반응을 자극하고 종양 세포(TC)에 독성에 영향을 미치며 종양 줄기 세포(TSC)를 표적으로 조절하여 생식 및 증식 가능성을 억제하는 데 사용됩니다. HSC를 얻기 위해 기증자는 4일 동안 8-10시간 간격으로 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF)를 8회 피하 투여받습니다. 처음 3일 동안은 체중 1kg당 2.5mcg를 1회 투여하고 마지막 날에는 두 배로 증량합니다. 줄기 세포는 5일째에 수확됩니다. 적혈구는 원심분리에 의해 제거됩니다. 세포 마커의 함량은 유세포 분석법으로 평가합니다. 결과는 세포 농축물 농축 및 성숙 세포와 혈장 제거 후 평가됩니다. 제제는 cryoprotector 및 10% poliglucin 용액과 함께 4ml 당 튜브에 저장됩니다. 줄기세포 비율은 1회 투여당 0.5x106 CD34+ 이상이고, 림프구 비율은 0.5x109 이상입니다.

시험에 포함된 모든 환자의 정위/내시경/개방 생검을 통해 뇌종양 샘플을 얻습니다. TC 및 TSC는 BMLC 생검 샘플로부터 면역화학적으로 분리됩니다. 종양 샘플의 한 부분은 표준 조직학적, 세포학적 및 면역화학적 검사에 사용되는 반면, TC 및 TSC(CD133+)는 다른 부분에서 분리됩니다.

말초혈액단핵세포에서 수지상세포를 분리하여 배양한다. 종양 샘플은 수지상 백신(DV)을 준비하기 위한 종양 특이적 항원을 제공합니다.

CTL의 제조는 많은 수의 순환하는 CTL로 인해 종양에 대한 세포독성 효과를 향상시키는 것을 목표로 합니다. CTL'은 DV 3회 투여 후 약 100ml의 말초 혈액에서 분리되며, 이 중 수지상 세포(DC)가 성장합니다. 그런 다음 말초 혈액을 반복적으로 채취하고 림프구를 분리합니다. CTL은 종양 항원(1차 요법) 또는 핵심 종양특이성 단백질과 유사한 재조합 단백질(2차 요법)이 적재된 DC와 함께 여러 번 공동 배양하여 그 수를 확장합니다(108-109). 그들의 면역 표현형이 검출되고 CTL이 동결 보존됩니다. DC로 CTL의 첫 번째 자극은 6-8일 동안 지속되고 두 번째 자극은 2-4일 동안 지속되며 다음 2일에는 림프구가 세 번째 및 네 번째로 자극됩니다. 그리고 수용된 림프구는 2일 동안 IL-2에 의해 자극을 받습니다.

1차 요법 완료 후 6개월 후에 효율성이 평가되고 효율성을 나타내는 코호트는 요법을 계속하는 반면, 효율성을 나타내지 않는 코호트는 능동 비교군에서 2차 요법으로 시험을 계속할 것입니다.

2차 치료 부문은 주요 종양특이성 단백질, 자가 CTL 및 변형된 프로테옴이 있는 자가 HSC와 유사한 재조합 단백질과 함께 DV를 사용합니다.

이전에 설명한 대로 시험 참여자로부터 자가 HSC를 받습니다. 활성 비교군에 대한 HSC의 세포 준비는 실험군에 대해 지정된 대로 동원 후 말초 혈액의 자가 단핵 세포의 세포 농축액에서 얻습니다. 활성 비교군에 대한 종양 특이적 항원은 환자의 종양 조직에 의해 제공됩니다.

환자의 TC 및 TSC와 HSC는 완전한 전사체 매핑 및 유전자 발현 프로파일링(CTMGEP) 및 프로테옴 매핑 및 단백질 프로파일링(PMPP)을 거칩니다. 주요(최대 정규화 강도를 갖는 3개 또는 4개의 단백질) 종양특이성 단백질(OSP)은 TC의 프로테옴 테스트에 따라 결정되는 반면, TSC의 프로테옴 프로파일링 및 단백질-단백질 관계 데이터베이스의 사용은 영향을 받지 않는 세포내 신호 전달 경로(ISTP)의 검출을 허용합니다. 발암에 의해 조절이 가능합니다. 또한 이러한 신호 경로에 영향을 미치는 수용체 막 표적(수용체 막 단백질)과 이를 활성화할 수 있는 단백질(단백질 리간드)이 감지됩니다. TSC의 CTMGEP는 진단된 기능적 ISTP를 확인합니다. CTMGEP의 수학적 모델링 및 Affymetrix GeneChip 인간 게놈 U133A 어레이 데이터와의 비교는 HSC를 화학적으로 유도할 수 있고 필수 단백질 리간드의 분비를 제공하기 위해 프로테옴 프로파일을 수정할 수 있는 perturbagens를 나타냅니다. 데이터베이스 분석을 통해 저분자량 제제 또는 마이크로 RNA에 의해 유도된 유전자 발현의 변화가 검사된 프로필에서 관찰된 변화와 어떻게 일치하는지 이해할 수 있습니다. 일치가 중요한 경우 에이전트 또는 유사한 에이전트가 효과를 시작할 수 있다고 가정합니다. 반상관이 유의미한 경우, 제제는 유전자 발현 변형에서 반대 효과를 개시하는 것으로 추정됩니다. HSC의 transcriptome은 perturbagens와 단핵 세포를 공동 배양하여 수정됩니다. 그들의 생물학적 효율성은 Homunculus 생물 반응기에서 시험관 내에서 평가됩니다. 그런 다음 앞에서 설명한 대로 준비가 저장됩니다.

개별 DV는 환자의 말초 혈액의 백혈구 농축액에서 준비됩니다. 림프구를 분리하고 G-CSF 및 인터루킨-2와 함께 배양하고 종양 특이적 항원인 TNF-α 및 PGE2에 의해 48시간 동안 컨디셔닝하고 종양 세포의 프로테오믹 테스트에서 검출된 주요 종양 특이적 항원과 동일한 재조합 단백질로 로드됩니다. 최우수 사용자). DV 면역 효과의 기본 메커니즘은 환자의 유기체에 의한 종양 독성 림프구의 정교화입니다.

CTL은 앞에서 설명한 대로 얻습니다. 개입은 해당 섹션에 설명되어 있습니다.

독성은 CTC-NCI 기준에 따라 평가됩니다. 효율성은 다음 기준에 따라 평가됩니다.

1. 완전한 효과 - 모든 종양 병소의 완전한 소멸
2. 부분적 효과 - 종양 크기 및/또는 전이 병소가 50% 이상 감소하고 새로운 신생물의 징후가 없음
3. 안정화 - 종양 병소 크기가 50% 미만으로 감소하고 새로운 신생물의 징후가 없음
4. 진행 - 치료 중 종양 병소의 성장. 모자이크 효과의 경우 병소의 일부가 진행되고 일부는 안정되거나 감소하는 경우 치료를 계속하지만 "치료에 대한 반응"이라는 맥락 밖에서 사례를 분석합니다.