- ICH GCP
- 미국 임상 시험 레지스트리
- 임상시험 NCT02582567
임신 중 운동이 산모와 태아의 건강에 미치는 영향 (GESTAFIT)
임신 중 감독 운동이 산모 및 태아 건강 지표에 미치는 영향. 게스타핏 프로젝트
이 프로젝트의 주요 목적은 과체중 임산부와 신생아에 대한 새롭고 감독된 운동 개입의 효과를 평가하는 것입니다.
방법/설계: 본 연구는 무작위 대조 시험입니다. 개입 프로그램에 참여하고자 하는 60명의 과체중 임산부는 무작위로 운동(주당 3회) 또는 일반 관리(대조군) 그룹(그룹당 임신 30명)에 배정됩니다. 주요 결과 측정은 산모의 체중 증가, 산모 및 신생아의 혈당 프로필입니다. 이차 결과 측정은 다음과 같습니다. i) 체성분; ii) 식이 패턴; iii) 체력; iv) 객관적으로 측정된 신체 활동 및 좌식 행동; v) 수면의 질; vi) 정신 건강, 삶의 질 및 긍정적인 건강; vii) 혈액학 및 생화학적 분석; viii) 산화 스트레스; ix) 프로- 및 항-염증 마커; x) 뼈 건강 바이오마커; xi) 비만 관련 단백질 발현. 데이터는 치료 의도 및 프로토콜별로 분석됩니다.
연구 개요
연구 유형
등록 (실제)
단계
- 해당 없음
연락처 및 위치
연구 장소
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Granada
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Granada, Granada, 스페인, 18071
- Pilar Cabello-Turmo
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
설명
포함 기준:
- 정상적인 임신 과정을 가진 과체중 임산부.
- 임신을 위한 PARmed-X의 모든 질문에 "아니오"라고 대답하십시오*.
- 도움없이 걸을 수 있습니다.
- 충분히 읽고 쓸 수 있습니다.
- 정보에 입각한 동의: 동의를 제공할 능력과 의지가 있음. *또한, 데이터 분석을 위한 구체적인 포함 기준은 다음과 같습니다. 단일 태아의 분만 시 재태 연령 37-42주, 자연 질식 분만 또는 산모 태아 병리(또는 불균형과 같은 산모 태아 위험을 수반하지 않는 기타 징후가 없는 질식 및 제왕절개 도구) , 유도 실패, 태아 진행 없음 또는 비두부 분만), 적절한 체중의 신생아, 생후 1분 및 5분에 Apgar 점수>7, 제대혈 pH(정상>7.20) 및 정상적인 모니터링 결과.
제외 기준:
- 급성 또는 불치병.
- 영양 실조.
- 임신 중 체력이나 운동을 평가하기 위한 검사를 수행할 수 없음.
- 저체중, 정상 체중 또는 비만.
- 임신 위험 요인(예: 고혈압, 제2형 당뇨병 등).
- 다태임신.
- Chromosopathy 또는 태아 기형.
- 자궁 성장 제한.
- 태아 사망.
- 지난 3개월 동안 상지 또는 하지 골절.
- 신경근 질환 또는 신경근 기능에 영향을 미치는 약물의 존재
- 다른 운동 프로그램에 등록
- 일주일에 최소한 중간 정도의 신체 활동을 300분 이상 수행하십시오.
- 연구 요구 사항을 완료하거나 대조군 또는 개입 그룹으로 무작위 배정되는 것을 꺼립니다.
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 주 목적: 방지
- 할당: 무작위
- 중재 모델: 단일 그룹 할당
- 마스킹: 더블
무기와 개입
참가자 그룹 / 팔 |
개입 / 치료 |
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실험적: 게스타피토스
이것은 GESTAtion and FITness(GESTAFIT) 프로젝트의 연속인 종단 연구입니다.
주요 목적은 임신 중 수행된 동시적 신체 운동 프로그램(GESTAFIT 프로젝트 하에 개발된)이 4세 자녀의 신체 구성, 체력, 뇌 구조, 그리고 운동, 인지 및 언어 발달에 미치는 영향을 평가하는 것입니다.
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운동 개입은 각 그룹에 12-13명의 참가자가 있도록 두 그룹으로 나누어 수행됩니다. 그룹은 임신 16주부터 분만까지 일주일에 3일(세션당 60분) 훈련합니다.
운동 개입 그룹은 다음과 같은 다양한 훈련 단계를 거치게 됩니다. b) 동작 학습 단계: 동작 및 인체공학적 기본 패턴에 대한 설명이 포함된 이론 및 실습 세션; 및 c) 체력 훈련 단계: 체력 및 체중 감소를 목표로 하는 훈련 세션과 출산을 위한 올바른 골반 동원에 초점을 맞춘 훈련 세션이 포함됩니다. 강도는 임신 주수 및 각 임신을 기준으로 운동 프로그램 중에 조정됩니다. 심박수.
세션은 근육 및 심혈관 컨디셔닝이 구현되는 회로로 구성된 혼합 작업으로 구성됩니다.
일반 치료, 운동 없음.
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실험적: 태반 트레이닝
이것은 GESTAFIT 프로젝트에 참여한 여성들의 태반 상태를 분석하는 것을 목적으로 하는 후향적 연구로, 해당 프로젝트에서는 동시적 신체 운동 프로그램이 개발되었습니다.
이러한 엄격한 연구 설계를 통해 우리의 핵심 가설, 즉 임신 중 운동이 임신 합병증과 관련된 태반 대사 경로에서 더 큰 개선을 가져오고 더 나은 임신 및 신생아 결과와 연관된다는 것을 검증할 수 있을 것입니다.
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운동 개입은 각 그룹에 12-13명의 참가자가 있도록 두 그룹으로 나누어 수행됩니다. 그룹은 임신 16주부터 분만까지 일주일에 3일(세션당 60분) 훈련합니다.
운동 개입 그룹은 다음과 같은 다양한 훈련 단계를 거치게 됩니다. b) 동작 학습 단계: 동작 및 인체공학적 기본 패턴에 대한 설명이 포함된 이론 및 실습 세션; 및 c) 체력 훈련 단계: 체력 및 체중 감소를 목표로 하는 훈련 세션과 출산을 위한 올바른 골반 동원에 초점을 맞춘 훈련 세션이 포함됩니다. 강도는 임신 주수 및 각 임신을 기준으로 운동 프로그램 중에 조정됩니다. 심박수.
세션은 근육 및 심혈관 컨디셔닝이 구현되는 회로로 구성된 혼합 작업으로 구성됩니다.
일반 치료, 운동 없음.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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인슐린 저항성에 대한 항상성 모델 평가(HOMA-IR)에서 파생된 인슐린 감수성
기간: 임신 34주차
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인슐린 감수성은 공식 [공복 인슐린(μIU/mL) x 공복 포도당(mg/dL)]/405를 사용하여 계산되는 인슐린 저항(HOMA-IR)에 대한 항상성 모델 평가에서 파생됩니다.
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임신 34주차
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산모의 체중 증가(kg)
기간: 임신 34주차
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산모의 체중 증가는 기준선 측정에서 마지막 측정까지의 체중 변화로 정의됩니다.
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임신 34주차
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신생아 인슐린-포도당 지수
기간: 제대혈 샘플 배송 시
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신생아 인슐린 감수성은 포도당/인슐린 비율을 통해 평가됩니다.
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제대혈 샘플 배송 시
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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수축기 및 확장기 혈압(mmHg)
기간: 임신 16주와 34주에
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수축기 및 확장기 혈압(mmHg)은 앉은 사람(Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp)에서 5분간의 휴식 후 2회에 걸쳐(시험 간 2분 간격) 측정됩니다.
두 시험 중 가장 낮은 값이 분석을 위해 선택됩니다.
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임신 16주와 34주에
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안정시 심박수(bpm)
기간: 임신 16주와 34주에
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휴식 심박수(bpm)는 앉아 있는 사람(Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp)에서 2번의 개별적인 경우(시험 사이에 2분 간격) 5분 휴식 후 측정됩니다.
두 시험 중 가장 낮은 값이 분석을 위해 선택됩니다.
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임신 16주와 34주에
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지중해 식단 점수
기간: 임신 16주와 34주에
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Fe, Ca 및 엽산에 대한 임신 중 특정 필요에 맞게 조정된 버전의 지중해 식단 점수는 전통적인 지중해식 식단 패턴에 대한 준수 여부를 평가하는 데 사용됩니다.
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임신 16주와 34주에
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심폐 피트니스(Vo2max)
기간: 임신 16주와 34주에
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수정된 Bruce 프로토콜은 최대 산소 섭취량(VO2max)을 추정하기 위해 수행되며 심폐 건강의 측정으로 사용됩니다.
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임신 16주와 34주에
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심폐 건강(6분 걷기 테스트의 미터)
기간: 임신 16주와 34주에
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각 참가자가 45.7m 직사각형 코스를 따라 6분 동안 걸을 수 있는 최대 거리(미터)를 측정하는 6분 걷기 테스트를 수행합니다.
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임신 16주와 34주에
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근력(kg)
기간: 임신 16주와 34주에
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손잡이 강도 테스트는 강도 측정으로 사용됩니다.
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임신 16주와 34주에
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유연성(센티미터)
기간: 임신 16주와 34주에
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백 스크래치 테스트는 유연성의 측정으로 사용됩니다.
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임신 16주와 34주에
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신체 활동 및 좌식 행동(분)
기간: 임신 16주, 24주, 34주에
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가속도계는 신체 활동과 앉아 있는 시간을 객관적으로 평가하는 데 사용됩니다.
여성은 모니터(예:
월요일에 가속도계를 받는 참가자는 다음 주 화요일까지 장치를 휴대합니다).
참가자는 탄성 벨트로 연결된 손목에 하루 종일(24시간) 가속도계를 착용하도록 지시받습니다.
빛, 중간 및 중간 강도 PA에 종사하는 시간(분) 및 앉아 있는 시간이 계산됩니다.
이 가속도계는 이전에 본 프로토콜에 설명된 것과 유사한 방법론으로 임신 중에 사용되었습니다.
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임신 16주, 24주, 34주에
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수면 행동(가속도 측정을 통해)
기간: 임신 16주, 24주, 34주에
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수면 시작, 수면 잠복기, 총 수면 시간, 각성 횟수 및 지속 시간, 수면 효율과 같은 수면과 관련된 행동은 3축 가속도계(ActiSleep+, Pensacola, Florida, United States)를 사용하여 객관적으로 계산됩니다.
이러한 ActiSleep 가속도 측정 데이터의 데이터 분석은 특정 소프트웨어(Actilife)를 통해 수행됩니다.
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임신 16주, 24주, 34주에
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피츠버그 수면 품질 지수
기간: 임신 16주, 24주, 34주에
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1개월의 시간 간격에 걸쳐 수면의 질과 장애를 평가하는 데 사용됩니다.
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임신 16주, 24주, 34주에
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불면증 증상 설문지
기간: 임신 16주, 24주, 34주에
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불면증 증상의 존재는 임산부에서 검증된 불면증 증상 설문지로 측정됩니다.
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임신 16주, 24주, 34주에
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삶의 질(Short-Form Health Survey 36)
기간: 임신 16주와 34주에
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우리는 건강 관련 삶의 질을 평가하기 위해 Short-Form Health Survey 36을 사용할 것입니다.
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임신 16주와 34주에
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역학 연구-우울 척도 설문지
기간: 임신 16주와 34주에
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임신 산전 우울증 수준은 역학 연구 센터-우울증 척도 설문지에 의해 평가되며, 이는 임신 중에 널리 사용됩니다.
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임신 16주와 34주에
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상태 특성 불안 지수.
기간: 임신 16주와 34주에
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불안 수준은 State Trait Anxiety Index로 평가됩니다.
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임신 16주와 34주에
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하지불안증후군 구금 설문지
기간: 임신 16주와 34주에
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"하지 불안 증후군"은 많은 임산부의 삶의 질을 크게 결정하며 우울증 및 수면의 질과 관련이 있습니다.
하지 불안 증후군 구금 설문지 의 스페인어 버전 은 이 증후군 의 존재 와 중증도 를 평가 하기 위해 사용 됩니다 .
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임신 16주와 34주에
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Oswestry 장애 지수 점수
기간: 임신 16주와 34주에
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요통은 Oswestry Disability Index 점수의 스페인어 버전으로 평가됩니다.
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임신 16주와 34주에
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통증 시각 아날로그 척도
기간: 임신 16주와 34주에
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요통 강도도 통증 시각적 아날로그 척도로 평가됩니다.
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임신 16주와 34주에
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6개 항목 여성 성기능 지수
기간: 임신 16주와 34주에
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6개 항목의 여성 성기능 지수를 사용하여 성기능을 평가합니다.
이 도구는 욕구, 각성, 윤활, 오르가슴, 만족, 통증의 6가지 질문으로 구성되어 있습니다.
각 질문은 0에서 5까지 점수를 매긴 다음 합산하여 총점을 제공할 수 있습니다.
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임신 16주와 34주에
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긍정적인 건강
기간: 임신 16주와 34주에
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"긍정적인 건강"은 다음 설문지를 통해 평가됩니다.
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임신 16주와 34주에
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혈액학
기간: 임신 34주 및 출산 시
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적혈구 수, 헤마토크리트, 헤모글로빈, 혈소판, 백혈구 및 적혈구 평균 미립자 부피는 Coulter(브랜드)에 의해 정량화됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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지질 프로필(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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혈장 총, 고밀도 지단백질 및 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 트리글리세리드(모두 mg/dL 단위)는 자동 분석기(Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd.)를 사용하여 평가됩니다.
스위스)
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임신 34주 및 출산 시
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혈당 프로필(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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혈장 포도당, 인슐린 및 글리코실화된 헤모글로빈은 자동 분석기(Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd.)를 사용하여 평가됩니다.
스위스)
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임신 34주 및 출산 시
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총 혈장 항산화제 용량(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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시판 키트(분광광도계)를 이용하여 측정하게 됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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혈장 지용성 항산화제(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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혈장 비타민 E, 레티놀, 카로틴, 코엔자임 Q10 및 코엔자임 Q9는 질량 분석법을 통해 측정됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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항산화 효소 활성(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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에리트로사이트 막 카탈라아제, 글루타티온 퍼옥시다아제 및 슈퍼옥사이드 디스뮤타아제 효소는 분광광도법으로 측정됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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카르보닐 단백질(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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카르보닐 단백질의 측정은 상용 키트(분광광도법)를 사용하여 수행됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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지질에 대한 산화적 손상(모체 및 제대혈에서)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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상업용 키트(분광광도법 및 ELISA)를 사용하여 소변 및 혈장 내 4-hydroxynonenal 및 isoprostanes 및 혈장 및 적혈구 막 내 hydroperoxide 측정
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임신 34주 및 출산 시
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DNA에 대한 산화적 손상(모체 및 제대혈에서)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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상업용 키트(ELISA)에 의한 소변 및 혈장 내 8-하이드록시구아노신 측정.
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임신 34주 및 출산 시
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친염증 및 항염증 신호(모체 및 제대혈에서)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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일부 산모 및 탯줄 혈장 전염증 및 항염증 사이토카인(IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ 및 TNF-α, IL-1ra 및 TNF Srii α ), 일부 아디포카인(아디포넥틴, 아디프신, 레지스틴, PAI 활성, 인슐린 및 렙틴) 및 미오카인(아이리신)은 Luminex xMAP 기술을 사용하여 측정됩니다.
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임신 34주 및 출산 시
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뼈 바이오마커(모체 및 제대혈)
기간: 임신 34주 및 출산 시
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Luminex xMAP 기술로 뼈 대사와 관련된 다양한 바이오마커(ACTH, DKK-1, FGF-23, Osteocalcin, OPN-Osteopontin, Osteoprotegerin, PTH 및 SOST)를 측정합니다.
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임신 34주 및 출산 시
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지방 관련 단백질 발현(모체 및 제대혈에서)
기간: 배송 시
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글루코코르티코이드 수용체; 퍼옥시좀 증식 활성화 수용체(PPAR); 베타-11 하이드록시스테로이드 탈수소효소 유형 I(11βHSD1) 및 베타-11 하이드록시스테로이드 탈수소효소 유형 II(11βHSD2)는 산모와 제대혈, 그리고 산모와 신생아의 구강 점막에서 평가됩니다. 또한 지방 조직의 태아 및 출생 후 발달에 크게 관여하는 4개의 유전자가 선택되었습니다. 2개는 수용체: 글루코코르티코이드 수용체 및 PPAR-γ이고, 2개는 대사 효소: 베타-11 하이드록시스테로이드 탈수소효소 유형 I 또는 11βHSD1 및 11 베타-하이드록시스테로이드 탈수소효소 유형 II 또는 11βHSD2입니다. PPAR-γ1과 PPAR-γ2는 매우 중요하며 대체 프로모터 사용과 mRNA에 의해 동일한 유전자에서 생성됩니다. 우리는 Polymerase Chain Reaction 및 Western Blot 기술을 통해 모체 및 제대 혈장에서 이러한 단백질과 PON1(파라옥소나제/아릴에스테라제 1) 농도를 측정할 것입니다. |
배송 시
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임산부와 아동의 인체계측학 및 신체 구성 (게스타피토스)
기간: 출생 후 4 ± 1년
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어머니와 아이의 키는 체중계(Seca 22, Hamburg)를 사용하여 측정됩니다.
어머니와 아이 모두에게 체성분 종합 분석(DXA, Hologic Discovery QDR, Nasdaq)이 시행됩니다.
또한 어머니와 아이의 체중(Inbody R20, Biospace, Korea)과 허리 및 목 둘레도 기록합니다.
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출생 후 4 ± 1년
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어머니와 아이의 혈압 및 안정 시 심박수 (Gestafitos)
기간: 출생 후 4 ± 1년
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수축기 및 이완기 혈압과 심박수는 어머니와 아이 모두에게 5분 휴식 후 3회 측정됩니다(Omron Hoolddorp).
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출생 후 4 ± 1년
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어머니와 아이의 영양 상태 (Gestafitos)
기간: 출생 후 4 ± 1년
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식품 빈도 설문지와 지중해식이 준수도 설문지를 실시할 것입니다.
영양 보충제 사용 또한 기록될 것입니다.
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출생 후 4 ± 1년
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어머니와 아이의 신체 활동, 좌식 생활 습관 및 수면 질
기간: 출생 후 4 ± 1년
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우리는 팔목에 9일 연속 착용하는 가속도계(ActigraphGT3X+, 미국 플로리다주 펜서콜라)를 사용하여 신체 활동, 좌식 행동 및 수면 관련 행동(잠들기까지 걸리는 시간, 효율성 등)을 평가할 것입니다.
가속도 변화는 어린이의 경우 5초 간격으로, 어머니의 경우 60초 간격으로 기록됩니다.
총 활동량과 활동 강도(평균 신체 활동 강도), 에너지 소비량, 다양한 강도(낮음(좌식), 가벼움, 중간, 격렬함, 중간-격렬함)에서 하루에 소요된 분 단위 시간에 대한 데이터가 수집됩니다. 또한 Actisleep 특정 소프트웨어를 사용하여 수면의 질도 기록됩니다.
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출생 후 4 ± 1년
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건강 관련 아동 체력: PREFIT 배터리
기간: 출생 후 4 ± 1년
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근력, 심폐 지구력, 균형, 속도 및 운동 협응-민첩성은 각각 다음 PREFIT 배터리 검사를 사용하여 평가됩니다: 20m 왕복 달리기 검사, 악력 검사, 제자리 멀리뛰기 검사, 외발 서기 균형 검사, 4x10m 왕복 달리기 검사.
PREFIT 배터리는 취학 전 연령대 아동의 체력을 평가하기 위한 실행 가능하고, 신뢰할 수 있으며, 최대한의 유효성을 갖춘 타당한 도구입니다.
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출생 후 4 ± 1년
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뇌 구조, 뇌혈류, 구조적 및 기능적 자기공명영상(Gestafitos)을 통한 뇌 기능
기간: 출생 후 4 ± 1년
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MRI는 그라나다 대학교의 뇌, 정신 및 행동 연구 센터(CIMCYC)에서 진행됩니다.
팀 구성원인 Irene Esteban-Cornejo 박사는 이전에 자금 지원을 받은 연구들(예: 어린이의 뇌에 대한 운동 효과를 평가하는 무작위 대조 시험인 ACTIVEBRAINS 프로젝트)의 신경영역 분야를 조율한 경험이 있습니다.
그녀는 호주 Monash 인지 및 임상 신경과학 연구소에서 두 차례의 연구 연수를 마쳤으며, 고급 MRI 분석 석사 학위를 보유하고 있으며, 권위 있는 저널 Neuroimage에 게재된 ACTIVEBRAINS 프로젝트의 최초 두 편의 뇌 관련 논문의 제1저자입니다.
Esteban-Cornejo 박사는 또한 Northeastern University와 Pittsburgh University에서 운동 및 뇌 건강 분야의 선도적인 전문가들(Erickson KI, Kramer AF, Hillman CH)과 함께 작업한 경험이 있습니다.
Erickson 박사와 신경과학자 Marina López-Solà도 현재 프로젝트 팀의 일원입니다.
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출생 후 4 ± 1년
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인지 기능 (제스타피토스)
기간: 출생 후 4±1년
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집행 기능의 세 가지 주요 측면을 평가합니다:
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출생 후 4±1년
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학업 성취도 (제스타피토스)
기간: 출생 후 4 ± 1년
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기타 운동, 인지 및 언어 발달 척도:
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출생 후 4 ± 1년
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유전적 및 후성유전적 분석 (게스타피토스)
기간: 출생 후 4 ± 1년
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구강 점막 샘플은 FTO 유전자 다형성 rs9939609 및 MC4R 유전자 다형성 rs17782313의 발현을 분석하기 위해 어린이로부터 채취됩니다.
DNA는 품질과 양에 최적화된 Whatmann® 종이 지지체와 유기 추출 방법을 사용하여 타액에서 추출됩니다.
샘플은 NanoDrop 2000 분광광도계(ThermoScientific)를 사용하여 정량화되고, RealTime ABI PRISM® 7900 HT에서 TaqMan 프로브(Applied Biosystems)로 유전자형 분석되기 전에 ~5 ng/μL로 정규화됩니다.
성공하지 못한 샘플은 특정 프라이머를 사용하여 증폭 및 시퀀싱되고 3130 HID Genetic Analyzer(Applied Biosystem)로 분석됩니다.
DNA와 RNA는 QIAamp DNA Mini Kit 및 DNeasy Blood & Tissue Kit(Qiagen)를 사용하여 추출되고 Qiacube 로봇으로 처리됩니다.
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출생 후 4 ± 1년
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산화 스트레스와 항산화 방어 (태반 트레이닝)
기간: 분만 후 태반 배출 이후
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지용성 항산화제(토코페롤, 코엔자임 Q10 및 Q9, 레티놀)의 태반 내 함량은 HPLC로 분석되며, 일산화질소와 총 항산화 능력은 ABTS 방법으로 분석됩니다.
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분만 후 태반 배출 이후
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생성, 자가포식, 미토콘드리아 융합-분열 과정의 마커 발현 (Placentraining)
기간: 분만 후 태반 배출 이후
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미토콘드리아 역학의 변화와 그 품질 관리의 변화는 관찰된 발견들을 설명하는 핵심적인 측면입니다. 따라서 웨스턴 블롯팅 또는 RT-PCR을 사용하여 분열(Drp1, Fis1 및 OPA1), 융합(Mfn1 및 Mfn2), 생합성(PGC1alpha, Tfam, Sirt1, Nrf1, Nrf2) 및 자가포식(PARKIN2, PINK1, Beclin-1, ATG8, ATG5, ATG12, VDAC1)의 미토콘드리아 과정들을 분석합니다. |
분만 후 태반 배출 이후
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미량 및 초미량 미네랄 (태반 트레이닝)
기간: 분만 후 태반 배출 이후
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태반 샘플 내 필수 원소(칼슘, 마그네슘, 망간, 철, 구리, 아연, 셀레늄) 또는 독성 원소(수은, 바나듐, 크롬, 비소, 카드뮴, 납, 니켈)의 총 함량 측정은 마인하드형 네블라이저(Glass Expansion, Romainmotier)가 장착되고 헬륨 충돌 셀이 구비된 ICP-MS 장비(Agilent 7500, Agilent Technologies, Tokyo, Japan)를 사용하여 수행됩니다.
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분만 후 태반 배출 이후
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유전체 및 메틸화 (Placentraining)
기간: 출생 후 태반 배출 이후
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샘플은 "유전자 분석 섹션"에 앞서 기술된 바와 같이 처리됩니다.
유전체 및 메틸화 분석은 파이로시퀀싱 방법으로 진행됩니다.
이는 FTO 및 MC4R 유전자 검출을 위해 수행됩니다.
태반에서 추출한 유전체 DNA는 권장 프로토콜에 따라 DNeasy Blood&Tissue Kit를 사용하여 분리됩니다(Qiagen N.V, Hi.GE).
DNA의 품질과 양을 확인한 후, FTO 및 MC4R 유전자의 프로모터 영역은 미리 설계된 PyroMark CpG Assays를 통해 증폭됩니다.
이 프라이머를 사용한 영역 증폭은 해당 영역 내 CG 염기쌍의 메틸화 상태를 직접 정량할 수 있게 해줍니다.
먼저, PyroMark PCR Kit(QIAGEN N.V, Hi.GE)를 사용하여 PCR로 FTO 및 MC4R 관심 영역을 증폭할 것이며, 이 키트는 메틸화 가능성이 있는 CG 뉴클레오티드 표지를 가능하게 합니다.
반응 생성물(샘플 및 유전자당 하나)은 정제되어 시퀀싱 반응에 사용될 것입니다.
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출생 후 태반 배출 이후
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후보 유전자 발현 및 소형 RNA 분석 (Placentraining)
기간: 출생 후 태반 배출 이후
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관련된 대사 경로를 더 잘 이해하기 위해, 우리는 후보 유전자의 연구와 함께 유전자형-발현-환경 관계를 확립할 수 있는 miRNA의 결정을 수행할 것입니다(소형 RNA 시퀀싱 분석 포함). mRNA 및 miRNA 분석을 위해, 태반 RNA는 제조업체 지침에 따라 "RNeasy Mini" 키트(Qiagen)를 통해 획득됩니다. RNA 무결성은 "RNA 6000 Nano chip"(Agilent)을 사용하여 Bionalalyzer 2100(Agilent)으로 분석되고 농도는 NanoDrop 2000(ThermoFisher Scientific)으로 계산됩니다. 사전 설계된 TaqMan Gene Expression 분석(ThermoFisher Scientific)은 후보 유전자들의 발현을 연구하는 데 사용됩니다: IL6, CXCL8, TNF-알파, CSF3, BDNF; FTO, MC4R 및 KL 클로토(KL). |
출생 후 태반 배출 이후
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표적 및 비표적 대사체학 및 지질체학 분석
기간: 출생 후 태반 배출 이후
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표적 대사체학 분석은 액체 크로마토그래피와 질량 분석법을 결합하여 수행됩니다.
지질 종 추출은 MTBE를 사용하여 혈장 샘플에서 추출됩니다.
추출된 샘플 10μL는 역상 컬럼이 장착된 UPLC 1290(Agilent Technologies, Barcelona, Spain)에 적용되어 QTOF 질량 분석기 모델 6545(Agilent Technologies, Barcelona, Spain)에 연결됩니다.
데이터는 양성 및 음성 전기분무 모드에서 수집됩니다.
MassHunter(Agilent Technologies, Barcelona, Spain) 및 R 소프트웨어를 사용하여 품질 관리 기준으로 데이터를 수집, 추출, 정렬, 필터링 및 정규화합니다.
비표적 대사체학 분석은 액체 크로마토그래피와 질량 분석법을 결합하여 수행됩니다.
대사체 추출은 메탄올을 사용하여 혈장 샘플에서 추출됩니다.
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출생 후 태반 배출 이후
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독성물질(태반훈련)
기간: 출생 후 태반 배출 이후
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유리 생체활성 페놀 농도는 다중급 초고성능 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(UHPLC-MS/MS)으로 측정됩니다. 다음 페놀류가 평가될 것입니다: 비스페놀 A; 파라벤: 메틸파라벤, 에틸파라벤, 프로필파라벤, 부틸파라벤; 벤조페논(BzP): BzP-1, BzP-2, BzP-3, BzP-6, BzP-8, 4-하이드록시-BzP. 태반 내 과불화알킬물질 농도는 염 보조 액-액 추출법과 분산 액-액 미량추출법을 UHPLC-MS/MS와 결합하여 평가됩니다. 다음 과불화알킬물질이 측정될 것입니다: PFHxA, PFHpA, PFOA, PFNA, PFDA, PFUnA, PFDoA, PFTrA, PFHxS, PFOS. |
출생 후 태반 배출 이후
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염증성, 항염증성, 혈관형성 및 혈관신생 표지자 (Placentraining)
기간: 분만 후 태반 배출 이후
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우리는 Luminex xMAP 기술(Millipore, Darmstadt, Germany) 키트를 사용하여 태반 Fractalkine, IL-1α, IL-1β, IL-RA, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ, TNF-α, TNF-β, 뇌유래신경영양인자(Brain-derived neurotrophic factor), 표피성장인자(Epidermal growth factor), 섬유아세포성장인자 2(Fibroblast growth factor 2), 과립구-집락자극인자(Granulocyte-colony stimulating factor), 과립구-대식세포 집락자극인자(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor), 혈소판유래성장인자-AA(Platelet-derived growth factor-AA), 단핵구화학주성단백질-1(Monocyte chemoattractant protein-1), 혈관내피성장인자(Vascular endothelial growth factor)를 평가할 것입니다.
이러한 측정을 위해 Human Sepsis Magnetic Bead Panel 3 Multiplex Assay(제품번호 HTH17MAG-14K)를 사용할 것입니다.
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분만 후 태반 배출 이후
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공동 작업자 및 조사자
간행물 및 유용한 링크
일반 간행물
- Aparicio VA, Baena-Garcia L, Flor-Alemany M, Martinez-Gonzalez LJ, Varela-Lopez A, Sanchez C, Quiles JL. Differences in maternal and neonatal cardiometabolic markers and placenta status by foetal sex. The GESTAFIT project. Womens Health (Lond). 2022 Jan-Dec;18:17455057221117976. doi: 10.1177/17455057221117976.
- Aparicio VA, Ocon O, Diaz-Castro J, Acosta-Manzano P, Coll-Risco I, Borges-Cosic M, Romero-Gallardo L, Moreno-Fernandez J, Ochoa-Herrera JJ. Influence of a Concurrent Exercise Training Program During Pregnancy on Colostrum and Mature Human Milk Inflammatory Markers: Findings From the GESTAFIT Project. J Hum Lact. 2018 Nov;34(4):789-798. doi: 10.1177/0890334418759261. Epub 2018 Mar 30.
- Aparicio VA, Ocon O, Padilla-Vinuesa C, Soriano-Maldonado A, Romero-Gallardo L, Borges-Cosic M, Coll-Risco I, Ruiz-Cabello P, Acosta-Manzano P, Estevez-Lopez F, Alvarez-Gallardo IC, Delgado-Fernandez M, Ruiz JR, Van Poppel MN, Ochoa-Herrera JJ. Effects of supervised aerobic and strength training in overweight and grade I obese pregnant women on maternal and foetal health markers: the GESTAFIT randomized controlled trial. BMC Pregnancy Childbirth. 2016 Sep 29;16(1):290. doi: 10.1186/s12884-016-1081-y.
- Marin-Jimenez N, Baena-Garcia L, Coll-Risco I, Flor-Alemany M, Castro-Pinero J, Aparicio VA. Influence of a Concurrent Exercise Training Program on Health-Related Quality of Life During Advanced Pregnancy: The GESTAFIT Project. Sports Health. 2024 Jul-Aug;16(4):518-526. doi: 10.1177/19417381231189730. Epub 2023 Jul 31.
- Baena-Garcia L, Coll-Risco I, Ocon-Hernandez O, Romero-Gallardo L, Acosta-Manzano P, May L, Aparicio VA. Association of objectively measured physical fitness during pregnancy with maternal and neonatal outcomes. The GESTAFIT Project. PLoS One. 2020 Feb 18;15(2):e0229079. doi: 10.1371/journal.pone.0229079. eCollection 2020.
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