Effekter av träning under graviditeten på mödra- och fostrets hälsa (GESTAFIT)

Experimentell: Gestafitos

Detta är en longitudinell studie som utvecklats, vilket är en fortsättning på GESTAtion and FITness (GESTAFIT)-projektet. Huvudsyftet är att utvärdera inverkan av ett samtidigt fysiskt träningsprogram under graviditeten (utvecklat inom GESTAFIT-projektet) på kroppssammansättning, fysisk kondition, hjärnstruktur samt motorisk, kognitiv och språklig utveckling hos avkomman vid fyra års ålder.

Övrig: Träningsintervention

Träningsinterventionen kommer att utföras i två grupper så att varje grupp kommer att ha 12-13 deltagare. Grupperna kommer att träna 3 dagar/vecka (60 min per pass) från den 16:e graviditetsveckan till förlossningen. Träningsinterventionsgruppen kommer att gå igenom olika faser av träningen: a) Inlärningsfas: som kommer att involvera interventionsplanen, de mål vi vill arbeta med och hur vi ska utföra den; b) Movement Learning-fas: teoretiska och praktiska sessioner med förklaring av rörelser och ergonomiska grundmönster; och c) Fysisk konditionsträningsfas: med träningspass som syftar till att förbättra konditionen och viktminskning, och träningspass fokuserade på en korrekt bäckenmobilisering för förlossningen. Intensiteten kommer att anpassas under träningsprogrammet baserat på graviditetsveckan och varje graviditet hjärtfrekvens. Sessionerna kommer att bestå av ett blandat arbete, sammansatt av kretsar där både muskel- och kardiovaskulär konditionering kommer att implementeras.

Övrig: Kontrollgrupp

Vanlig vård, inte träning.

Experimentell: Bäckenbottenträning

Detta är en retrospektiv studie vars syfte är att analysera statusen på placentor från kvinnor som deltar i GESTAFIT-projektet, där ett samtidigt fysiskt träningsprogram utvecklades. Denna rigorösa design kommer att möjliggöra för oss att testa vår centrala hypotes att träning under graviditet kommer att producera större förbättringar i placentans metabola vägar förknippade med graviditetskomplikationer, och är associerad med bättre graviditets- och nyfödda utfall.

Övrig: Träningsintervention

Träningsinterventionen kommer att utföras i två grupper så att varje grupp kommer att ha 12-13 deltagare. Grupperna kommer att träna 3 dagar/vecka (60 min per pass) från den 16:e graviditetsveckan till förlossningen. Träningsinterventionsgruppen kommer att gå igenom olika faser av träningen: a) Inlärningsfas: som kommer att involvera interventionsplanen, de mål vi vill arbeta med och hur vi ska utföra den; b) Movement Learning-fas: teoretiska och praktiska sessioner med förklaring av rörelser och ergonomiska grundmönster; och c) Fysisk konditionsträningsfas: med träningspass som syftar till att förbättra konditionen och viktminskning, och träningspass fokuserade på en korrekt bäckenmobilisering för förlossningen. Intensiteten kommer att anpassas under träningsprogrammet baserat på graviditetsveckan och varje graviditet hjärtfrekvens. Sessionerna kommer att bestå av ett blandat arbete, sammansatt av kretsar där både muskel- och kardiovaskulär konditionering kommer att implementeras.

Övrig: Kontrollgrupp

Vanlig vård, inte träning.

Insulinkänslighet härledd från den homeostatiska modellbedömningen för insulinresistens (HOMA-IR)

Insulinkänsligheten kommer att härledas från den homeostatiska modellbedömningen för insulinresistens (HOMA-IR), som kommer att beräknas med formeln [fasteinsulin (μIU/mL) x fasteglukos (mg/dL)]/405.

Moderns viktökning (kg)

Moderns viktökning kommer att definieras som viktförändringen från baslinjemätning till den sista mätningen

Neonatalt insulin-glukosindex

Neonatal insulinkänslighet kommer att bedömas genom förhållandet glukos/insulin.

Systoliskt och diastoliskt blodtryck (mmHg)

Systoliskt och diastoliskt blodtryck (mmHg) kommer att mätas efter 5 minuters vila, vid 2 separata tillfällen (med 2 minuter mellan försöken), med personen sittande (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). Det lägsta värdet av de två försöken kommer att väljas för analysen.

Vilopuls (bpm)

Vilopuls (bpm), kommer att mätas efter 5 minuters vila, vid 2 separata tillfällen (med 2 minuter mellan försöken), med personen sittande (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). Det lägsta värdet av de två försöken kommer att väljas för analysen.

Medelhavsdietresultatet

Mediterranean Diet Score i en version anpassad till de specifika behoven under graviditeten för Fe, Ca och folsyra kommer att användas för att bedöma efterlevnaden av det traditionella medelhavskostmönstret.

Kardiorespiratorisk kondition (Vo2max)

Det modifierade Bruce-protokollet kommer att utföras för att uppskatta maximalt syreupptag (VO2max), och kommer att användas som mått på kardiorespiratorisk kondition.

Kardiorespiratorisk kondition (meter i 6-minuters gångtestet)

Vi utför 6 minuters gångtestet, som mäter det maximala avståndet (i meter) varje deltagare kan gå på 6 minuter längs en 45,7 m rektangulär bana.

Muskelstyrka (kg)

Styrketestet för handtag kommer att användas som mått på styrka

Flexibilitet (cm)

Back-scratch-testet kommer att användas som mått på flexibilitet

Fysisk aktivitet och stillasittande beteende (på minuter)

Accelerometri kommer att användas för att objektivt bedöma fysisk aktivitet och stillasittande tid. Kvinnor kommer att bli ombedda att bära en treaxlig accelerometer (ActiSleep+, Pensacola, Florida, USA) under 9 dagar i följd, från och med samma dag som de får monitorn (t.ex. deltagare som får accelerometern på måndag, kommer att bära enheten till tisdag nästa vecka). Deltagarna kommer att instrueras att bära accelerometern under hela dagen (24 timmar) på sin handled fäst med ett elastiskt bälte. Tid (i minuter) med lätt, måttlig och måttlig kraftfull intensitet PA och stillasittande tid kommer att beräknas. Denna accelerometer har tidigare använts under graviditet med liknande metodik som beskrivs i detta protokoll.

Sömnbeteenden (genom accelerometri)

Beteenden relaterade till sömn, såsom sömnstart, sömnlatens, total sömntid, antal och varaktighet av uppvaknanden och sömneffektivitet kommer att beräknas objektivt med hjälp av en triaxiell accelerometer (ActiSleep+, Pensacola, Florida, USA). Dataanalysen av sådana ActiSleep-accelerometridata kommer att utföras genom dess specifika programvara (Actilife).

Pittsburgh sömnkvalitetsindex

Den kommer att användas för att bedöma sömnkvalitet och störningar under ett 1-månaders tidsintervall.

Frågeformulär för sömnlöshetssymtom

Förekomsten av symtom på sömnlöshet kommer att mätas med Insomnia Symptoms Questionnaire, validerad hos gravida kvinnor.

Livskvalitet (Short-Form Health Survey 36)

Vi kommer att använda Short-Form Health Survey 36, för att bedöma hälsorelaterad livskvalitet.

Epidemiologiska studier-Depression Scale frågeformulär

Nivåerna av graviditetsdepression kommer att bedömas av Center for Epidemiological Studies-Depression Scale frågeformuläret, som är validerat och allmänt använt under graviditet.

State Trait Anxiety Index.

Ångestnivåer kommer att bedömas med State Trait Anxiety Index.

Frågeformuläret Detention of Restless Legs Syndrome

"Restless Legs Syndrome" avgör till stor del livskvaliteten för många gravida och är relaterad till deras nivåer av depression och sömnkvalitet. Den spanska versionen av frågeformuläret Detention of Restless Legs Syndrome kommer att användas för att bedöma förekomsten och svårighetsgraden av detta syndrom.

Oswestry Disability Index poäng

Smärta i ländryggen kommer att bedömas med den spanska versionen av Oswestry Disability Index-poäng

Smärta Visual Analog Scale

Ländryggssmärtans intensitet kommer också att bedömas med Pain Visual Analogue Scale

6-post kvinnlig sexuell funktionsindex

Female Sexual Function Index kommer att användas för att bedöma sexfunktionen. Detta instrument består av sex frågor: begär, upphetsning, smörjning, orgasm, tillfredsställelse och smärta. Varje fråga kan poängsättas från 0 till 5 och sedan summeras för att ge ett totalpoäng.

Positiv hälsa

"Positiv hälsa" kommer att utvärderas genom följande frågeformulär:

1. Trait Meta-Mood-skalan
2. Schema för positiva och negativa effekter
3. Tillfredsställelsen med livsskalan
4. Connor-Davidson Resilience Scale med 10 artiklar

Hematologi

Antal erytrocyter, hematokrit, hemoglobin, trombocyter, leukocyter och medelkroppsvolymen för erytrocyter kommer att kvantifieras av Coulter (varumärke).

Lipidprofil (i moder- och navelsträngsblod)

Totalt plasma, högdensitetslipoprotein och lågdensitetslipoproteinkolesterol och triglycerider (alla i mg/dL) kommer att bedömas med hjälp av en autoanalysator (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Schweiz)

Glykemisk profil (i moder- och navelsträngsblod)

Plasmaglukos, insulin och glykosylerat hemoglobin kommer att bedömas med hjälp av en autoanalysator (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Schweiz)

Total plasmaantioxidantkapacitet (i moder- och navelsträngsblod)

Det kommer att mätas med hjälp av kommersiellt kit (spektrofotometri).

Plasma fettlösliga antioxidanter (i moder- och navelsträngsblod)

Plasma-vitamin E, retinol, karoten, koenzym Q10 och koenzym Q9 kommer att mätas genom masspektrometri

Antioxidant enzymaktivitet (i moder- och navelsträngsblod)

Eritrocitmembrankatalas, glutationperoxidas och superoxiddismutasenzymer kommer att mätas genom spektrofotometri.

Karbonylproteiner (i moder- och navelsträngsblod)

Mätning av karbonylproteiner kommer att göras med hjälp av kommersiellt kit (spektrofotometri).

Oxidativ skada på lipider (i moder- och navelsträngsblod)

Mätning av 4-hydroxinonenal och isoprostaner i urin och plasma och hydroperoxider i plasma och erytrocytmembran med hjälp av kommersiella kit (spektrofotometri och ELISA)

Oxidativ skada på DNA (i moder- och navelsträngsblod)

mätning av 8-hydroxiguanosin i urin och plasma med kommersiella kit (ELISA).

Pro- och antiinflammatorisk signal (i moder- och navelsträngsblod)

Vissa pro-inflammatoriska och antiinflammatoriska cytokiner från modern och navelsträngsplasma (IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-y och TNF-α, IL-1ra och TNF Srii α ), vissa adipokiner (adiponectin, adipsin, resistin, PAI-active, insulin och leptin) och myokiner (irisin) kommer att mätas med hjälp av Luminex xMAP-teknologi.

Benbiomarkörer (i moder- och navelsträngsblod)

Olika relevanta biomarkörer relaterade till benmetabolism (ACTH, DKK-1, FGF-23, Osteocalcin, OPN-Osteopontin, Osteoprotegerin, PTH och SOST) kommer att mätas med Luminex xMAP-teknologi.

Fettrelaterat proteinuttryck (i moder- och navelsträngsblod)

Glukokortikoidreceptor; peroxisomproliferationsaktiverad receptor (PPAR); beta-11 hydroxisteroiddehydrogenas typ I (11βHSD1) och beta-11 hydroxisteroiddehydrogenas typ II (11βHSD2) kommer att bedömas i moderns och navelsträngsblod och i munslemhinnan från modern och nyfödd.

Dessutom har 4 gener som är starkt involverade i fetal och postnatal utveckling av fettvävnad selekterats; två är receptorer: glukokortikoidreceptorn och PPAR-y, och två är metaboliska enzymer: beta-11 hydroxisteroiddehydrogenas typ I eller 11βHSD1 och 11 beta-hydroxisteroiddehydrogenas typ II eller 11βHSD2. Av stor betydelse är PPAR-γ1 och PPAR-γ2, som genereras från samma gen genom alternativ promotoranvändning och mRNA. Vi kommer att mäta sådana proteiner såväl som paraoxonas/arylesteras 1 (PON1) koncentrationer i moderns och navelsträngsplasma med polymerase Chain Reaction och Western Blot-tekniker.

Antropometri och kroppssammansättning hos mor och barn (Gestafitos)

Modern och barnets längd kommer att registreras med hjälp av en våg (Seca 22, Hamburg). En omfattande analys av kroppssammansättning kommer att genomföras för både modern och barnet (DXA, Hologic Discovery QDR, Nasdaq). Vi kommer också att registrera vikt (Inbody R20, Biospace, Korea) samt midje- och halsomfång hos både modern och barnet.

Blodtryck och vilopuls hos mor och barn (Gestafitos)

Systoliskt och diastoliskt blodtryck, tillsammans med hjärtfrekvens, kommer att mätas tre gånger efter 5 minuters vila (Omron Hoolddorp) hos både mor och barn.

Nutritional Status of the Mother and Child (Gestafitos)

En matfrekvensenkät och en frågeformulär för följsamhet till medelhavskost kommer att administreras. Användningen av kosttillskott kommer också att registreras.

Fysisk aktivitet, stillasittande beteende och sömnkvalitet hos mor och barn

Vi kommer att utvärdera fysisk aktivitet, stillasittande beteende och sömnrelaterade beteenden (latens, effektivitet etc.) med hjälp av accelerometrar (ActigraphGT3X+, Pensacola, Florida, USA) som bärs på handleden i nio på varandra följande dagar. Accelerationsförändringar kommer att registreras i 5-sekunders epoker för barn och 60-sekunders epoker för mödrar. Data kommer att samlas in om total volym och intensitet av aktivitet (genomsnittlig fysisk aktivitetsintensitet), energiförbrukning och antalet minuter per dag som spenderas på olika intensiteter: låg (stillasittande), lätt, måttlig, kraftig och måttlig till kraftig. Sömnkvalitet kommer också att registreras med den specifika Actisleep-mjukvaran.

Barnets hälsorelaterade fysiska kondition: PREFIT-batteriet

Muskelstyrka, kardiorespiratorisk kondition, balans, snabbhet och motorisk koordination-rörlighet kommer att bedömas med följande PREFIT-batteritester: 20-meters pendeltest, handgreppsstyrkemätning, stående längdhoppstest, balanstest på ett ben och 4x10 meters pendeltest, respektive. PREFIT-batteriet är ett genomförbart, tillförlitligt, maximalt och giltigt verktyg för att bedöma fysisk kondition hos förskolebarn.

Hjärnstruktur, cerebralt blodflöde och hjärnfunktion via strukturell och funktionell magnetresonanstomografi (Gestafitos)

MRI kommer att utföras vid Brain, Mind and Behavior Research Center (CIMCYC) vid University of Granada. Dr. Irene Esteban-Cornejo, en gruppmedlem, har samordnat neurobildgivningsområdet i tidigare finansierade studier (t.ex. ACTIVEBRAINS-projektet, en randomiserad kontrollerad studie som bedömer effekten av träning på hjärnan hos barn). Hon har genomfört två forskningsvistelser vid Monash Institute of Cognitive and Clinical Neurosciences i Australien, har en masterexamen i avancerad MRI-analys och är förstaförfattare till de två första hjärnartiklarna från ACTIVEBRAINS-projektet, båda publicerade i den prestigefyllda tidskriften Neuroimage. Dr. Esteban-Cornejo har också arbetat med ledande experter inom träning och hjärnhälsa (Erickson KI, Kramer AF och Hillman CH) vid Northeastern University och University of Pittsburgh. Dr. Erickson och hjärnforskaren Marina López-Solà är också en del av det nuvarande projektteamet.

Kognition (Gestafitos)

Tre viktiga aspekter av exekutiv funktion kommer att utvärderas:

1. Kognitiv inhibition: Utvärderas via Strooptestet, som innefattar tre förhållanden som utvärderar interferens vid identifiering av bläckfärgen på ord som inte matchar deras betydelse.

2. Kognitiv flexibilitet: Utvärderas med två oberoende tester:

   Design Fluency Test: Består av tre progressiva förhållanden där deltagare skapar unika designen under olika regler på 60 sekunder, och utvärderar flexibilitet, kreativitet och visuell mönstergenerering.

   Trail Making Test: Fem förhållanden som utvärderar visuell sökhastighet, uppmärksamhet, mental flexibilitet, arbetsminne och motorisk funktion.

3. Arbetsminne: Utvärderas med en datoriserad n-back-uppgift (se MRI-avsnitt), som utvärderar förmågan att samtidigt lagra och bearbeta information.
4. Intelligens: Utvärderas med Kaufman Brief Intelligence Test (KBIT), som inkluderar deltester för verbal och icke-verbal intelligens.

Akademisk Prestanda (Gestafitos)

1. Woodcock-Muñoz III Battery: Spansk anpassning av Woodcock-Johnson III (WJ III), bestående av 22 deltester som bedömer språk, matematik och naturvetenskap. Valda deltester kommer att användas för att bedöma matematikflyt, beräkning, förståelse och skrivförmåga.
2. Skolnivåer: Föräldrar kommer också att ombes att lämna barnets skolbetyg från det/dena läsår då bedömningarna genomförs.

Andra motoriska, kognitiva och språkutvecklingsskalor:

1. Bayley Scales of Infant Development, tredje upplagan (BSID-III)
2. Wechsler Intelligence Scale for Children
3. BENCI Battery (Computeriserad neuropsykologisk bedömningsbatteri för barn)

Genetiska och Epigenetiska Analyser (Gestafitos)

Buccal mucosa-prover kommer att samlas från barn för att analysera uttrycket av FTO-genens polymorfism rs9939609 och MC4R-genens polymorfism rs17782313. DNA kommer att extraheras från saliv med Whatmann® pappersstöd och organiska extraktionsmetoder optimerade för kvalitet och kvantitet. Prover kommer att kvantifieras med en NanoDrop 2000-spektrofotometer (ThermoScientific) och normaliseras till ~5 ng/µL innan de genotypas med TaqMan-sonder (Applied Biosystems) på en RealTime ABI PRISM® 7900 HT. Misslyckade prover kommer att förstärkas och sekvenseras med specifika primrar och analyseras med 3130 HID Genetic Analyzer (Applied Biosystem). DNA och RNA kommer att extraheras med QIAamp DNA Mini Kit och DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen), och bearbetas med Qiacube-roboten.

Oxidativ stress och antioxidativ försvar (Placenträning)

Innehållet i placenta av fettlösliga antioxidanter (tokoferol, koenzym Q10 och Q9 och retinol) kommer att analyseras med HPLC, och kväveoxid och den totala antioxidantkapaciteten med ABTS-metoden.

• Oxidativ skada på proteiner: karbonylproteiner med kommersiella kit (spektrofotometri).
• Oxidativ skada på lipider: 4-hydroxynonenal och isoprostaner med kommersiella kit (spektrofotometri och ELISA). Oxidativ skada på DNA: 8-hydroxi-guanosin med kommersiella kit (ELISA).

Uttryck av markörer för biogenes, autofagi, mitokondriella fusions-fissionsprocesser (Placentraining)

Förändringar i mitokondriell dynamik och deras kvalitetskontroll är en nyckelaspekt för att förklara de observerade fynden.

Därför används Western-blotting eller RT-PCR för mitokondriella processer av fission (Drp1, Fis1 och OPA1), fusion (Mfn1 och Mfn2), biogenes (PGC1alpha, Tfam, Sirt1, Nrf1, Nrf2) och autofagi (PARKIN2, PINK1, Beclin-1, ATG8, ATG5, ATG12, VDAC1).

Spårämnen och ultratrådmineraler (Placenträning)

Bestämning av totalhalten av dessa essentiella (Ca, Mg, Mn, Fe, Cu, Zn, Se) eller toxiska element (Hg, V, Cr, As, Cd, Pb, Ni) i placenta-prover kommer att utföras med ett ICP-MS-instrument (Agilent 7500, Agilent Technologies, Tokyo, Japan) utrustad med en Meinhard-typ nebulizer (Glass Expansion, Romainmotier) och försedd med en He-kollisionscell.

Genomisk och metylering (Placentraining)

Prov kommer att bearbetas som tidigare beskrivits i "Avsnittet om genetiska analyser". Genomisk och metylering kommer att utvecklas med pyrosekvenseringsmetoden. Detta kommer att utvecklas för detektering av FTO- och MC4R-gener. Genomiskt DNA från placentor kommer att isoleras med DNeasy Blood&Tissue Kit enligt den rekommenderade protokollet (Qiagen N.V, Hi.GE). Efter att ha kontrollerat kvaliteten och kvantiteten av DNAt kommer promotorerna för FTO- och MC4R-generna att förstärkas med hjälp av fördesignade PyroMark CpG-assays. Regionförstärkning med dessa primer kommer att tillåta oss att direkt kvantifiera metyleringsstatusen för CG-nukleotiderna inom regionen. Först kommer vi att förstärka FTO- och MC4R-regioner av intresse med PCR med PyroMark PCR Kit (QIAGEN N.V, Hi.GE), vilket möjliggör märkning av CG-nukleotider som kan vara metylerade. Reaktionsprodukter (en per prov och gen) kommer att renas och användas för sekvenseringsreaktionen.

Kandidatgenexpression och Small RNA-analys (Placentraining)

För en bättre förståelse av de metaboliska vägarna som är inblandade kommer vi att genomföra studien av kandidatgener, samt bestämningen av miRNA som kommer att tillåta oss att fastställa en genotyp-uttryck-miljö-relation (med Small RNA Sequencing-analys).

För mRNA- och miRNA-analys kommer placentalt RNA att erhållas genom kitet "RNeasy Mini" (Qiagen) enligt tillverkarens instruktioner. RNA-integritet kommer att analyseras med en "RNA 6000 Nano chip" (Agilent) med hjälp av en Bionalalyzer 2100 (Agilent) och koncentrationen kommer att beräknas med NanoDrop 2000 (ThermoFisher Scientific).

Förutbestämda TaqMan Gene Expression-analyser (ThermoFisher Scientific) kommer att användas för att studera uttrycket av kandidatgener: IL6, CXCL8, TNF-alfa, CSF3, BDNF; FTO, MC4R och KL klotho (KL).

Riktade och oriktade metabolomiska och lipidomiska analyser

Målrettad metabolomikanalys kommer att utföras med vätskekromatografi kopplad till masspektrometri. Lipidartextraktion kommer att utvinnas från plasmaprover med MTBE. Tio μL av den extraherade provet kommer att appliceras på UPLC 1290 (Agilent Technologies, Barcelona, Spanien) utrustad med en omvändfas-kolonn kopplad till QTOF-masspektrometer modell 6545 (Agilent Technologies, Barcelona, Spanien). Data kommer att samlas in i positiva och negativa elektrosprutningslägen. MassHunter (Agilent Technologies, Barcelona, Spanien) och R-programvara kommer att användas för att samla in, extrahera, justera, filtrera och normalisera data med hjälp av kvalitetskontroller. Omålrettad metabolomikanalys kommer att utföras med vätskekromatografi kopplad till masspektrometri. Metabolitextraktion kommer att utvinnas från plasmaprover med metanol.

Toxiska ämnen (Placenträning)

Koncentrationer av fria bioaktiva fenoler kommer att bestämmas med multiklass ultra-högpresterande vätskekromatografi-tandemmasspektrometri (UHPLC-MS/MS). Följande fenoler kommer att analyseras:

bisfenol A; parabener: metylparaben, etylparaben, propylparaben, butylparaben; bensofenoner (BzP): BzP-1, BzP-2, BzP-3, BzP-6, BzP-8, 4-hydroxi-BzP. Koncentrationer av perfluoroalkylsubstanser i placenta kommer att analyseras genom att koppla saltassisterad vätske-vätske-extraktion med dispersiv vätske-vätske-mikroextraktion och UHPLC-MS/MS. Följande perfluoroalkylsubstanser kommer att mätas: PFHxA, PFHpA, PFOA, PFNA, PFDA, PFUnA, PFDoA, PFTrA, PFHxS och PFOS.

Inflammatoriska, antiinflammatoriska, vaskulogenes och angiogenesmarkörer (Placentraining)

Vi kommer att använda Luminex xMAP-teknik (Millipore, Darmstadt, Tyskland) kit för att analysera placenta Fractalkine, IL-1α, IL1β, IL-RA, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ, TNF-α, TNF-β, Brain-derived neurotrophic factor, Epidermal growth factor, Fibroblast growth factor 2, Granulocyte-colony stimulating factor, Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, Platelet-derived growth factor-AA, Monocyte chemoattractant protein-1, Vascular endothelial growth factor. För dessa bestämningar kommer vi att använda Human Sepsis Magnetic Bead Panel 3 Multiplex Assay (kat. Nr. HTH17MAG-14K).