Efectos del ejercicio durante la gestación en la salud materna y fetal (GESTAFIT)

Experimental: Gestafitos

Este es un estudio longitudinal desarrollado, que es la continuación del Proyecto GESTAtion and FITness (GESTAFIT). El propósito principal es evaluar la influencia de un programa de ejercicio físico concurrente durante el embarazo (desarrollado bajo el proyecto GESTAFIT) en la composición corporal, la condición física, la estructura cerebral, y el desarrollo motor, cognitivo y del lenguaje de la descendencia a los cuatro años de edad.

Otro: Intervención de ejercicio

La intervención de ejercicios se realizará en dos grupos de manera que cada grupo tendrá 12-13 participantes. Los grupos entrenarán 3 días/semana (60min por sesión) desde la semana 16 de gestación hasta el parto. El grupo de intervención de ejercicios pasará por diferentes fases de entrenamiento: a) Fase de aprendizaje: en la que se tratará el plan de intervención, los objetivos que queremos trabajar y cómo lo vamos a realizar; b) Fase de Aprendizaje del Movimiento: sesiones teóricas y prácticas con la explicación de los movimientos y patrones ergonómicos básicos; y c) Fase de Entrenamiento Físico: con sesiones de entrenamiento encaminadas a mejorar la condición física y la pérdida de peso, y sesiones de entrenamiento enfocadas a una correcta movilización pélvica para el parto. La intensidad se adaptará durante el programa de ejercicios en función de la semana de gestación y de cada gestante. ritmo cardiaco. Las sesiones consistirán en un trabajo mixto, compuesto por circuitos donde se implementará el acondicionamiento tanto muscular como cardiovascular.

Otro: Grupo de control

Cuidado habitual, no ejercicio.

Experimental: Entrenamiento placentario

Este es un estudio retrospectivo cuyo propósito es analizar el estado de las placentas de mujeres participantes en el proyecto GESTAFIT, en el cual se desarrolló un programa concurrente de ejercicio físico. Este diseño riguroso nos permitirá probar nuestra hipótesis central de que el ejercicio durante el embarazo producirá mayores mejoras en las vías metabólicas placentarias asociadas con complicaciones del embarazo, y está asociado con mejores resultados del embarazo y del recién nacido.

Otro: Intervención de ejercicio

La intervención de ejercicios se realizará en dos grupos de manera que cada grupo tendrá 12-13 participantes. Los grupos entrenarán 3 días/semana (60min por sesión) desde la semana 16 de gestación hasta el parto. El grupo de intervención de ejercicios pasará por diferentes fases de entrenamiento: a) Fase de aprendizaje: en la que se tratará el plan de intervención, los objetivos que queremos trabajar y cómo lo vamos a realizar; b) Fase de Aprendizaje del Movimiento: sesiones teóricas y prácticas con la explicación de los movimientos y patrones ergonómicos básicos; y c) Fase de Entrenamiento Físico: con sesiones de entrenamiento encaminadas a mejorar la condición física y la pérdida de peso, y sesiones de entrenamiento enfocadas a una correcta movilización pélvica para el parto. La intensidad se adaptará durante el programa de ejercicios en función de la semana de gestación y de cada gestante. ritmo cardiaco. Las sesiones consistirán en un trabajo mixto, compuesto por circuitos donde se implementará el acondicionamiento tanto muscular como cardiovascular.

Otro: Grupo de control

Cuidado habitual, no ejercicio.

Sensibilidad a la insulina derivada de la evaluación del modelo homeostático para la resistencia a la insulina (HOMA-IR)

La sensibilidad a la insulina se derivará de la evaluación del modelo homeostático para la resistencia a la insulina (HOMA-IR), que se calculará mediante la fórmula [insulina en ayunas (μUI/mL) x glucosa en ayunas (mg/dL)]/405.

Aumento de peso materno (kg)

El aumento de peso materno se definirá como el cambio de peso desde la medición inicial hasta la última medición

Índice de insulina-glucosa neonatal

La sensibilidad a la insulina neonatal se evaluará mediante el cociente glucosa/insulina.

Presión arterial sistólica y diastólica (mmHg)

La presión arterial sistólica y diastólica (mmHg) se medirá después de 5 minutos de descanso, en 2 ocasiones separadas (con 2 minutos entre intentos), con la persona sentada (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). El valor más bajo de los dos ensayos será seleccionado para el análisis.

Frecuencia cardíaca en reposo (lpm)

La frecuencia cardíaca en reposo (lpm) se medirá después de 5 minutos de descanso, en 2 ocasiones separadas (con 2 minutos entre intentos), con la persona sentada (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). El valor más bajo de los dos ensayos será seleccionado para el análisis.

Puntuación de la Dieta Mediterránea

Se utilizará el Mediterranean Diet Score en una versión adaptada a las necesidades específicas durante el embarazo de Fe, Ca y ácido fólico para evaluar la adherencia al patrón dietético mediterráneo tradicional.

Aptitud cardiorrespiratoria (Vo2max)

El protocolo de Bruce modificado se realizará para estimar el consumo máximo de oxígeno (VO2max) y se utilizará como medida de la aptitud cardiorrespiratoria.

Aptitud cardiorrespiratoria (metros en la prueba de marcha de 6 min)

Realizamos la prueba de caminata de 6 minutos, que mide la distancia máxima (en metros) que cada participante puede caminar en 6 minutos a lo largo de un recorrido rectangular de 45,7 m.

Fuerza muscular (kg)

La prueba de fuerza de agarre se utilizará como medida de fuerza.

Flexibilidad (cm)

La prueba de rascado de espalda se utilizará como medida de flexibilidad.

Actividad física y comportamiento sedentario (en minutos)

Se utilizará la acelerometría para evaluar objetivamente la actividad física y el tiempo sedentario. Se les pedirá a las mujeres que usen un acelerómetro triaxial (ActiSleep+, Pensacola, Florida, Estados Unidos) durante 9 días consecutivos, comenzando el mismo día en que reciben el monitor (p. los participantes que reciban el acelerómetro el lunes, llevarán el dispositivo hasta el martes de la próxima semana). Se indicará a los participantes que lleven el acelerómetro durante todo el día (24 horas) en la muñeca sujetado por un cinturón elástico. Se calculará el tiempo (en minutos) dedicado a la AF de intensidad ligera, moderada y moderada-vigorosa y el tiempo sedentario. Este acelerómetro se ha utilizado previamente en el embarazo con una metodología similar a la descrita en el presente protocolo.

Comportamientos del sueño (mediante acelerometría)

Los comportamientos relacionados con el sueño, como el inicio del sueño, la latencia del sueño, el tiempo total de sueño, el número y la duración de los despertares y la eficiencia del sueño se calcularán de forma objetiva mediante el uso de un acelerómetro triaxial (ActiSleep+, Pensacola, Florida, Estados Unidos). El análisis de datos de dichos datos de acelerometría de ActiSleep se realizará a través de su software específico (Actilife).

Índice de calidad del sueño de Pittsburgh

Se utilizará para evaluar la calidad del sueño y las alteraciones durante un intervalo de tiempo de 1 mes.

Cuestionario de síntomas de insomnio

La presencia de síntomas de insomnio se medirá con el Cuestionario de Síntomas de Insomnio, validado en mujeres embarazadas.

Calidad de vida (Encuesta de salud abreviada 36)

Usaremos la Encuesta de salud de formato corto 36 para evaluar la calidad de vida relacionada con la salud.

Estudios Epidemiológicos-Cuestionario Escala de Depresión

Los niveles de depresión prenatal de las embarazadas se evaluarán mediante el cuestionario Center for Epidemiological Studies-Depression Scale, que está validado y ampliamente utilizado en el embarazo.

Índice de ansiedad rasgo estatal.

Los niveles de ansiedad se evaluarán con el Índice de Ansiedad Rasgo Estatal.

Cuestionario de Detención del Síndrome de Piernas Inquietas

El “Síndrome de Piernas Inquietas” determina en gran medida la calidad de vida de muchas embarazadas y está relacionado con sus niveles de depresión y calidad del sueño. Se empleará la versión en español del cuestionario Detención del Síndrome de Piernas Inquietas para evaluar la presencia y severidad de este síndrome.

Puntuación del índice de discapacidad de Oswestry

El dolor lumbar se evaluará con la versión en español de la puntuación del índice de discapacidad de Oswestry

Escala Analógica Visual del Dolor

La intensidad del dolor lumbar también se evaluará con la Escala Analógica Visual del Dolor

Índice de función sexual femenina de 6 ítems

El índice de función sexual femenina de 6 ítems se utilizará para evaluar la función sexual. Este instrumento está compuesto por seis preguntas: deseo, excitación, lubricación, orgasmo, satisfacción y dolor. Cada pregunta puede puntuarse de 0 a 5 y luego resumirse para proporcionar una puntuación total.

Salud positiva

La "salud positiva" se evaluará a través de los siguientes cuestionarios:

1. La Escala de Meta-Estado de Ánimo de Rasgo
2. El programa de afecto positivo y negativo
3. La escala de satisfacción con la vida
4. La escala de resiliencia de 10 ítems de Connor-Davidson

Hematología

Coulter (Brand) cuantificará el recuento de eritrocitos, el hematocrito, la hemoglobina, las plaquetas, los leucocitos y el volumen corpuscular medio de eritrocitos.

Perfil lipídico (en sangre materna y de cordón)

El colesterol y los triglicéridos totales, de lipoproteínas de alta densidad y de lipoproteínas de baja densidad plasmáticos (todos en mg/dl) se evaluarán mediante un autoanalizador (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Suiza)

Perfil glucémico (en sangre materna y de cordón umbilical)

La glucosa plasmática, la insulina y la hemoglobina glicosilada se evaluarán mediante un autoanalizador (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Suiza)

Capacidad antioxidante plasmática total (en sangre materna y de cordón umbilical)

Se medirá utilizando un kit comercial (espectrofotometría).

Antioxidantes liposolubles en plasma (en sangre materna y de cordón)

La vitamina E plasmática, el retinol, el caroteno, la coenzima Q10 y la coenzima Q9 se medirán mediante espectrometría de masas

Actividad de enzimas antioxidantes (en sangre materna y de cordón umbilical)

Las enzimas catalasa de membrana de eritrocito, glutatión peroxidasa y superóxido dismutasa se medirán mediante espectrofotometría.

Proteínas carbonilo (en sangre materna y del cordón umbilical)

La medición de las proteínas carbonilo se realizará mediante el uso de un kit comercial (espectrofotometría).

Daño oxidativo a los lípidos (en sangre materna y de cordón)

Medición de 4-hidroxinonenal e isoprostanos en orina y plasma e hidroperóxidos en plasma y membrana eritrocitaria mediante kits comerciales (espectrofotometría y ELISA)

Daño oxidativo al ADN (en sangre materna y de cordón umbilical)

medición de 8-hidroxiguanosina en orina y plasma mediante kits comerciales (ELISA).

Señal pro y antiinflamatoria (en sangre materna y de cordón)

Algunas citocinas proinflamatorias y antiinflamatorias del plasma materno y del cordón umbilical (IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ y TNF-α, IL-1ra y TNF Srii α ), algunas adipocinas (adiponectina, adipsina, resistina, PAI-activa, insulina y leptina) y miocinas (irisina) se medirán mediante el empleo de la tecnología Luminex xMAP.

Biomarcadores óseos (en sangre materna y de cordón)

Se medirán varios biomarcadores relevantes relacionados con el metabolismo óseo (ACTH, DKK-1, FGF-23, osteocalcina, OPN-osteopontina, osteoprotegerina, PTH y SOST) con la tecnología Luminex xMAP.

Expresión de proteínas relacionadas con la adiposidad (en sangre materna y de cordón umbilical)

receptor de glucocorticoides; receptor activado por proliferación de peroxisomas (PPAR); la beta-11 hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo I (11βHSD1) y la beta-11 hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo II (11βHSD2) se evaluarán en la sangre materna y del cordón umbilical y en la mucosa oral de la madre y el recién nacido.

Además, se han seleccionado 4 genes altamente implicados en el desarrollo fetal y posnatal del tejido adiposo; dos son receptores: el receptor de glucocorticoides y el PPAR-γ, y dos son enzimas metabólicas: beta-11 hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo I o 11βHSD1, y 11 beta-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo II o 11βHSD2. De gran importancia son PPAR-γ1 y PPAR-γ2, que se generan a partir del mismo gen mediante el uso de un promotor alternativo y ARNm. Mediremos dichas proteínas, así como las concentraciones de paraoxonasa/arilesterasa 1 (PON1) en plasma materno y del cordón umbilical mediante técnicas de reacción en cadena de la polimerasa y transferencia Western.

Antropometría y Composición Corporal de la Madre y el Niño (Gestafitos)

La altura de la madre y del niño se registrará utilizando una báscula (Seca 22, Hamburgo). Se realizará un análisis completo de la composición corporal tanto para la madre como para el niño (DXA, Hologic Discovery QDR, Nasdaq). También registraremos el peso (Inbody R20, Biospace, Corea) así como el perímetro de la cintura y del cuello tanto en la madre como en el niño.

Presión Arterial y Frecuencia Cardíaca en Reposo de la Madre y el Niño (Gestafitos)

La presión arterial sistólica y diastólica, junto con la frecuencia cardíaca, se medirán tres veces después de 5 minutos de descanso (Omron Hoolddorp) tanto en la madre como en el niño.

Estado Nutricional de la Madre y el Niño (Gestafitos)

Se administrará un cuestionario de frecuencia alimentaria y un cuestionario de Adherencia a la Dieta Mediterránea. También se registrará el uso de suplementos nutricionales.

Actividad Física, Comportamiento Sedentario y Calidad del Sueño de la Madre y el Niño

Evaluaremos la actividad física, el comportamiento sedentario y los comportamientos relacionados con el sueño (latencia, eficiencia, etc.) utilizando acelerómetros (ActigraphGT3X+, Pensacola, Florida, EE. UU.) colocados en la muñeca durante nueve días consecutivos. Los cambios de aceleración se registrarán en períodos de 5 segundos para los niños y de 60 segundos para las madres. Se recopilarán datos sobre el volumen total y la intensidad de la actividad (intensidad media de actividad física), el gasto energético y el número de minutos por día dedicados a diversas intensidades: baja (sedentaria), ligera, moderada, vigorosa y moderada a vigorosa. También se registrará la calidad del sueño utilizando el software específico Actisleep.

Aptitud Física Relacionada con la Salud del Niño: Batería PREFIT

La fuerza muscular, la capacidad cardiorrespiratoria, el equilibrio, la velocidad y la coordinación motriz-agilidad se evaluarán mediante las siguientes pruebas de la batería PREFIT: test de ida y vuelta de 20 m, dinamometría de prensión manual, test de salto de longitud sin carrera, test de equilibrio a una pierna y test de ida y vuelta 4x10 m, respectivamente. La batería PREFIT es una herramienta factible, fiable, máxima y válida para evaluar la condición física en niños en edad preescolar.

Estructura Cerebral, Flujo Sanguíneo Cerebral y Función Cerebral mediante Imágenes por Resonancia Magnética Estructural y Funcional (Gestafitos)

La resonancia magnética se realizará en el Centro de Investigación Mente, Cerebro y Comportamiento (CIMCYC) de la Universidad de Granada. La Dra. Irene Esteban-Cornejo, miembro del equipo, ha coordinado el área de neuroimagen de estudios previamente financiados (por ejemplo, el proyecto ACTIVEBRAINS, un ensayo controlado aleatorizado que evalúa el efecto del ejercicio en el cerebro de los niños). Ha completado dos estancias de investigación en el Monash Institute of Cognitive and Clinical Neurosciences en Australia, posee un Máster en análisis avanzado de resonancia magnética, y es la primera autora de los dos primeros artículos cerebrales del proyecto ACTIVEBRAINS, ambos publicados en la prestigiosa revista Neuroimage. La Dra. Esteban-Cornejo también ha trabajado con expertos líderes en ejercicio y salud cerebral (Erickson KI, Kramer AF y Hillman CH) en la Universidad Northeastern y la Universidad de Pittsburgh. El Dr. Erickson y la neurocientífica Marina López-Solà también forman parte del equipo actual del proyecto.

Cognición (Gestafitos)

Se evaluarán tres aspectos clave de la función ejecutiva:

1. Inhibición Cognitiva: Evaluada mediante la prueba de Stroop, que incluye tres condiciones que evalúan la interferencia al identificar el color de la tinta de palabras que no coinciden con su significado.

2. Flexibilidad Cognitiva: Evaluada con dos pruebas independientes:

   Prueba de Fluidez de Diseños: Consiste en tres condiciones progresivas donde los participantes crean diseños únicos bajo diferentes reglas en 60 segundos, evaluando flexibilidad, creatividad y generación de patrones visuales.

   Prueba de Trazado de Senderos: Cinco condiciones que evalúan velocidad de búsqueda visual, atención, flexibilidad mental, memoria de trabajo y función motora.

3. Memoria de Trabajo: Evaluada con una tarea computarizada n-back (ver sección de resonancia magnética), que evalúa la capacidad de almacenar y procesar información simultáneamente.
4. Inteligencia: Evaluada con la Prueba Breve de Inteligencia de Kaufman (KBIT), que incluye subpruebas para inteligencia verbal y no verbal.

Rendimiento Académico (Gestafitos)

1. Batería Woodcock-Muñoz III: Adaptación española de la Woodcock-Johnson III (WJ III), compuesta por 22 subpruebas que evalúan lenguaje, matemáticas y ciencias. Se utilizarán subpruebas seleccionadas para evaluar la fluidez matemática, el cálculo, la comprensión y la escritura.
2. Calificaciones Escolares: También se pedirá a los padres que proporcionen las calificaciones escolares del niño del año o años académicos durante los cuales se realicen las evaluaciones.

Otras Escalas de Desarrollo Motor, Cognitivo y del Lenguaje:

1. Escalas Bayley de Desarrollo Infantil, Tercera Edición (BSID-III)
2. Escala de Inteligencia de Wechsler para Niños
3. Batería BENCI (Batería de Evaluación Neuropsicológica Computarizada para Niños)

Análisis Genéticos y Epigenéticos (Gestafitos)

Se recogerán muestras de mucosa bucal de niños para analizar la expresión del polimorfismo del gen FTO rs9939609 y del polimorfismo del gen MC4R rs17782313. El ADN se extraerá de la saliva utilizando soportes de papel Whatmann® y métodos de extracción orgánica optimizados para calidad y cantidad. Las muestras se cuantificarán utilizando un espectrofotómetro NanoDrop 2000 (ThermoScientific) y se normalizarán a ~5 ng/µL antes de ser genotipadas con sondas TaqMan (Applied Biosystems) en un sistema RealTime ABI PRISM® 7900 HT. Las muestras no exitosas se amplificarán y secuenciarán utilizando cebadores específicos y se analizarán con el Analizador Genético 3130 HID (Applied Biosystem). El ADN y ARN se extraerán utilizando el QIAamp DNA Mini Kit y el DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen), y se procesarán con el robot Qiacube.

Estrés oxidativo y defensa antioxidante (Entrenamiento placentario)

El contenido en placenta de antioxidantes liposolubles (tocoferol, coenzima Q10 y Q9 y retinol) se analizará mediante HPLC, y el óxido nítrico y la capacidad antioxidante total mediante el método ABTS.

• Daño oxidativo a proteínas: proteínas carbonilo utilizando kits comerciales (espectrofotometría).
• Daño oxidativo a lípidos: 4-hidroxinonenal e isoprostanos utilizando kits comerciales (espectrofotometría y ELISA). Daño oxidativo al ADN: 8-hidroxiguanosina mediante kits comerciales (ELISA).

Expresión de marcadores de biogénesis, autofagia, procesos de fusión-fisión mitocondrial (Placentraining)

Los cambios en la dinámica mitocondrial y su control de calidad son un aspecto clave para explicar los hallazgos observados.

Por lo tanto, utilizando Western-blotting o RT-PCR, los procesos mitocondriales de fisión (Drp1, Fis1 y OPA1), fusión (Mfn1 y Mfn2), biogénesis (PGC1alfa, Tfam, Sirt1, Nrf1, Nrf2) y autofagia (PARKIN2, PINK1, Beclin-1, ATG8, ATG5, ATG12, VDAC1).

Oligoelementos y minerales ultratraza (Entrenamiento placentario)

La determinación del contenido total de estos elementos esenciales (Ca, Mg, Mn, Fe, Cu, Zn, Se) o tóxicos (Hg, V, Cr, As, Cd, Pb, Ni) en muestras de placenta se realizará con un instrumento ICP-MS (Agilent 7500, Agilent Technologies, Tokio, Japón) equipado con un nebulizador tipo Meinhard (Glass Expansion, Romainmotier) y provisto de una celda de colisión de He.

Genómica y metilación (Entrenamiento placentario)

Las muestras serán procesadas como se ha descrito previamente en la "sección de análisis genéticos". La genómica y la metilación se desarrollarán mediante el método de pirosecuenciación. Esto se desarrollará para la detección de los genes FTO y MC4R. El ADN genómico de las placentas se aislará utilizando el kit DNeasy Blood&Tissue siguiendo el protocolo recomendado (Qiagen N.V, Hi.GE). Después de comprobar la calidad y cantidad del ADN, los promotores de los genes FTO y MC4R se amplificarán mediante los ensayos PyroMark CpG prediseñados. La amplificación de la región utilizando estos cebadores nos permitirá cuantificar directamente el estado de metilación de los CG dentro de la región. Primero, amplificaremos las regiones de interés de FTO y MC4R mediante PCR utilizando el kit PyroMark PCR (QIAGEN N.V, Hi.GE), que permite marcar los nucleótidos CG susceptibles de ser metilados. Los productos de reacción (uno por muestra y gen) se purificarán y utilizarán para la reacción de secuenciación.

Análisis de expresión de genes candidatos y análisis de microARN (Placentraining)

Para una mejor comprensión de las vías metabólicas involucradas, llevaremos a cabo el estudio de genes candidatos, así como la determinación de miRNAs que nos permitirán establecer una relación genotipo-expresión-ambiente (con análisis de Secuenciación de Small RNA).

Para el análisis de mRNA y miRNA, el ARN placentario se obtendrá mediante el kit "RNeasy Mini" (Qiagen) siguiendo las instrucciones del fabricante. La integridad del ARN se analizará con un "RNA 6000 Nano chip" (Agilent) usando un Bionalalyzer 2100 (Agilent) y la concentración se calculará con NanoDrop 2000 (ThermoFisher Scientific).

Se utilizarán ensayos de expresión génica TaqMan prediseñados (ThermoFisher Scientific) para estudiar la expresión de genes candidatos: IL6, CXCL8, TNF-alfa, CSF3, BDNF; FTO, MC4R y KL klotho (KL).

Análisis de metabolómica y lipidómica dirigidos y no dirigidos

Los análisis de metabolómica dirigida se realizarán utilizando cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas. La extracción de especies lipídicas se realizará a partir de muestras de plasma con MTBE. Diez μL de la muestra extraída se aplicarán en UPLC 1290 (Agilent Technologies, Barcelona, España) equipado con una columna de fase reversa acoplada al espectrómetro de masas QTOF modelo 6545 (Agilent Technologies, Barcelona, España). Los datos se recopilarán en modos de electrospray positivo y negativo. Se utilizarán MassHunter (Agilent Technologies, Barcelona, España) y el software R para recopilar, extraer, alinear, filtrar y normalizar los datos utilizando controles de calidad. Los análisis de metabolómica no dirigida se realizarán utilizando cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas. La extracción de metabolitos se realizará a partir de muestras de plasma con metanol.

Tóxicos (Placentraining)

Las concentraciones de fenoles bioactivos libres se determinarán mediante cromatografía líquida de ultra alta resolución acoplada a espectrometría de masas en tándem multiclase (UHPLC-MS/MS). Los siguientes fenoles serán evaluados:

bisfenol A; parabenos: metilparabeno, etilparabeno, propilparabeno, butilparabeno; benzofenonas (BzP): BzP-1, BzP-2, BzP-3, BzP-6, BzP-8, 4-hidroxi-BzP. Las concentraciones de sustancias perfluoroalquiladas en placenta se evaluarán mediante el acoplamiento de extracción líquido-líquido asistida por sal con microextracción líquido-líquido dispersiva y UHPLC-MS/MS. Las siguientes sustancias perfluoroalquiladas serán medidas: PFHxA, PFHpA, PFOA, PFNA, PFDA, PFUnA, PFDoA, PFTrA, PFHxS y PFOS.

Marcadores inflamatorios, antiinflamatorios, de vasculogénesis y angiogénesis (Placentraining)

Utilizaremos kits de tecnología Luminex xMAP (Millipore, Darmstadt, Alemania) para evaluar en la placenta Fractalkina, IL-1α, IL-1β, IL-RA, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ, TNF-α, TNF-β, Factor neurotrófico derivado del cerebro, Factor de crecimiento epidérmico, Factor de crecimiento de fibroblastos 2, Factor estimulante de colonias de granulocitos, Factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos, Factor de crecimiento derivado de plaquetas-AA, Proteína quimioatrayente de monocitos-1, Factor de crecimiento endotelial vascular. Para estas determinaciones utilizaremos el ensayo múltiple Human Sepsis Magnetic Bead Panel 3 (cat. No. HTH17MAG-14K).