Effets de l'exercice pendant la gestation sur la santé maternelle et fœtale (GESTAFIT)

Expérimental: Gestafitos

Il s'agit d'une étude longitudinale développée, qui constitue la continuation du projet GESTAtion and FITness (GESTAFIT). L'objectif principal est d'évaluer l'influence d'un programme d'exercice physique simultané pendant la grossesse (développé dans le cadre du projet GESTAFIT) sur la composition corporelle, la condition physique, la structure cérébrale, et le développement moteur, cognitif et linguistique de la progéniture à l'âge de quatre ans.

Autre: Intervention d'exercice

L'intervention d'exercice sera effectuée en deux groupes afin que chaque groupe ait 12-13 participants. Les groupes s'entraîneront 3 jours/semaine (60min par session) à partir de la 16ème semaine de gestation jusqu'à l'accouchement. Le groupe d'intervention d'exercice passera par différentes phases de formation : a) Phase d'apprentissage : qui impliquera le plan d'intervention, les objectifs que nous voulons travailler et comment nous allons l'exécuter ; b) Phase d'apprentissage du mouvement : sessions théoriques et pratiques avec l'explication des mouvements et des schémas de base ergonomiques ; et c) Phase d'entraînement physique : avec des séances d'entraînement visant à améliorer la condition physique et la perte de poids, et des séances d'entraînement axées sur une mobilisation pelvienne correcte pour l'accouchement. L'intensité sera adaptée au cours du programme d'exercices en fonction de la semaine de gestation et de chaque grossesse. rythme cardiaque. Les séances consisteront en un travail mixte, composé de circuits où seront mis en œuvre à la fois le conditionnement musculaire et cardiovasculaire.

Autre: Groupe témoin

Soins habituels, sans exercice.

Expérimental: Placentraining

Il s'agit d'une étude rétrospective dont l'objectif est d'analyser l'état des placentas des femmes participant au projet GESTAFIT, dans lequel un programme d'exercice physique simultané a été développé. Cette conception rigoureuse nous permettra de tester notre hypothèse centrale selon laquelle l'exercice pendant la grossesse produira de plus grandes améliorations dans les voies métaboliques placentaires associées aux complications de la grossesse, et est associé à de meilleurs résultats pour la grossesse et le nouveau-né.

Autre: Intervention d'exercice

L'intervention d'exercice sera effectuée en deux groupes afin que chaque groupe ait 12-13 participants. Les groupes s'entraîneront 3 jours/semaine (60min par session) à partir de la 16ème semaine de gestation jusqu'à l'accouchement. Le groupe d'intervention d'exercice passera par différentes phases de formation : a) Phase d'apprentissage : qui impliquera le plan d'intervention, les objectifs que nous voulons travailler et comment nous allons l'exécuter ; b) Phase d'apprentissage du mouvement : sessions théoriques et pratiques avec l'explication des mouvements et des schémas de base ergonomiques ; et c) Phase d'entraînement physique : avec des séances d'entraînement visant à améliorer la condition physique et la perte de poids, et des séances d'entraînement axées sur une mobilisation pelvienne correcte pour l'accouchement. L'intensité sera adaptée au cours du programme d'exercices en fonction de la semaine de gestation et de chaque grossesse. rythme cardiaque. Les séances consisteront en un travail mixte, composé de circuits où seront mis en œuvre à la fois le conditionnement musculaire et cardiovasculaire.

Autre: Groupe témoin

Soins habituels, sans exercice.

Sensibilité à l'insuline dérivée du modèle homéostatique d'évaluation de la résistance à l'insuline (HOMA-IR)

La sensibilité à l'insuline sera dérivée de l'évaluation du modèle homéostatique pour la résistance à l'insuline (HOMA-IR), qui sera calculée à l'aide de la formule [insuline à jeun (μUI/mL) x glycémie à jeun (mg/dL)]/405.

Gain de poids maternel (kg)

Le gain de poids maternel sera défini comme le changement de poids entre la mesure de référence et la dernière mesure

Index insuline-glucose néonatal

La sensibilité néonatale à l'insuline sera évaluée par le rapport glucose/insuline.

Pression artérielle systolique et diastolique (mmHg)

La pression artérielle systolique et diastolique (mmHg) sera mesurée après 5 minutes de repos, à 2 reprises (avec 2 minutes entre les essais), avec la personne assise (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). La valeur la plus basse des deux essais sera sélectionnée pour l'analyse.

Fréquence cardiaque au repos (bpm)

La fréquence cardiaque au repos (bpm) sera mesurée après 5 minutes de repos, à 2 reprises (avec 2 minutes entre les essais), avec la personne assise (Omron Health Care Europe B.V. Hoolddorp). La valeur la plus basse des deux essais sera sélectionnée pour l'analyse.

Le score du régime méditerranéen

Le score de régime méditerranéen dans une version adaptée aux besoins spécifiques pendant la grossesse en Fe, Ca et acide folique sera utilisé pour évaluer l'adhésion au schéma alimentaire méditerranéen traditionnel.

Aptitude cardiorespiratoire (Vo2max)

Le protocole de Bruce modifié sera exécuté pour estimer la consommation maximale d'oxygène (VO2max) et sera utilisé comme mesure de la condition cardiorespiratoire.

Aptitude cardiorespiratoire (mètres dans le test de marche de 6 minutes)

Nous effectuons le test de marche de 6 minutes, qui mesure la distance maximale (en mètres) que chaque participant peut parcourir en 6 minutes sur un parcours rectangulaire de 45,7 m.

Force musculaire (kg)

Le test de force de la poignée sera utilisé comme mesure de la force

Flexibilité (cm)

Le test de grattage au dos sera utilisé comme mesure de flexibilité

Activité physique et comportement sédentaire (en minutes)

L'accélérométrie sera utilisée pour évaluer objectivement l'activité physique et le temps de sédentarité. Les femmes seront invitées à porter un accéléromètre triaxial (ActiSleep+, Pensacola, Floride, États-Unis) pendant 9 jours consécutifs, à compter du jour même où elles reçoivent le moniteur (par ex. les participants qui reçoivent l'accéléromètre le lundi porteront l'appareil jusqu'au mardi de la semaine suivante). Les participants seront invités à porter l'accéléromètre pendant toute la journée (24 heures) sur leur poignet attaché par une ceinture élastique. Le temps (en minutes) consacré à l'AP d'intensité légère, modérée et modérée à vigoureuse et le temps de sédentarité seront calculés. Cet accéléromètre a déjà été utilisé pendant la grossesse avec une méthodologie similaire à celle décrite dans le présent protocole.

Comportements de sommeil (par accélérométrie)

Les comportements liés au sommeil, tels que l'endormissement, la latence du sommeil, la durée totale du sommeil, le nombre et la durée des réveils et l'efficacité du sommeil seront objectivement calculés à l'aide d'un accéléromètre triaxial (ActiSleep+, Pensacola, Floride, États-Unis). L'analyse des données de ces données d'accélérométrie ActiSleep sera effectuée grâce à son logiciel spécifique (Actilife).

Indice de qualité du sommeil de Pittsburgh

Il sera utilisé pour évaluer la qualité et les perturbations du sommeil sur un intervalle de temps d'un mois.

Questionnaire sur les symptômes de l'insomnie

La présence de symptômes d'insomnie sera mesurée avec le Questionnaire sur les symptômes d'insomnie, validé chez la femme enceinte.

Qualité de vie (Short-Form Health Survey 36)

Nous utiliserons le Short-Form Health Survey 36 pour évaluer la qualité de vie liée à la santé.

Études épidémiologiques - Questionnaire de l'échelle de dépression

Les niveaux de dépression prénatale pendant la grossesse seront évalués par le questionnaire Center for Epidemiological Studies-Depression Scale, qui est validé et largement utilisé pendant la grossesse.

Indice d'anxiété des traits d'état.

Les niveaux d'anxiété seront évalués avec le State Trait Anxiety Index.

Questionnaire sur le syndrome de rétention des jambes sans repos

Le « syndrome des jambes sans repos » détermine en grande partie la qualité de vie de nombreuses femmes enceintes et est lié à leur niveau de dépression et à la qualité de leur sommeil. La version espagnole du questionnaire sur le syndrome de rétention des jambes sans repos sera utilisée pour évaluer la présence et la gravité de ce syndrome.

Score de l'indice d'invalidité d'Oswestry

La lombalgie sera évaluée avec la version espagnole du score Oswestry Disability Index

Échelle visuelle analogique de la douleur

L'intensité de la lombalgie sera également évaluée à l'aide de l'échelle visuelle analogique de la douleur.

Indice de la fonction sexuelle féminine à 6 éléments

L'indice de la fonction sexuelle féminine à 6 éléments sera utilisé pour évaluer la fonction sexuelle. Cet instrument est composé de six questions : désir, excitation, lubrification, orgasme, satisfaction et douleur. Chaque question peut être notée de 0 à 5, puis additionnée pour fournir un score total.

Santé positive

La « santé positive » sera évaluée à travers les questionnaires suivants :

1. L'échelle de méta-humeur des traits
2. Le programme des effets positifs et négatifs
3. L'échelle de satisfaction à l'égard de la vie
4. L'échelle de résilience de Connor-Davidson en 10 items

Hématologie

Le nombre d'érythrocytes, l'hématocrite, l'hémoglobine, les plaquettes, les leucocytes et le volume corpusculaire moyen des érythrocytes seront quantifiés par Coulter (Brand).

Profil lipidique (dans le sang de la mère et du cordon)

Le cholestérol plasmatique total, les lipoprotéines de haute densité et les lipoprotéines de basse densité et les triglycérides (tous en mg/dL) seront évalués à l'aide d'un analyseur automatique (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Suisse)

Profil glycémique (dans le sang de la mère et du cordon)

Le glucose plasmatique, l'insuline et l'hémoglobine glycosylée seront évalués à l'aide d'un analyseur automatique (Hitachi-Roche p800, F. Hoffmann-La Roche Ltd. Suisse)

Capacité antioxydante totale du plasma (dans le sang de la mère et du cordon)

Elle sera mesurée à l'aide d'un kit commercial (spectrophotométrie).

Antioxydants liposolubles plasmatiques (dans le sang de la mère et du cordon)

La vitamine E plasmatique, le rétinol, le carotène, la coenzyme Q10 et la coenzyme Q9 seront mesurés par spectrométrie de masse

Activité des enzymes antioxydantes (dans le sang de la mère et du cordon)

Les enzymes catalase membranaire de l'érytrocite, glutathion peroxydase et superoxyde dismutase seront mesurées par spectrophotométrie.

Protéines carbonyles (dans le sang de la mère et du cordon)

La mesure des protéines carbonyles se fera à l'aide d'un kit commercial (spectrophotométrie).

Dommages oxydatifs aux lipides (dans le sang de la mère et du cordon)

Mesure du 4-hydroxynonénal et des isoprostanes dans l'urine et le plasma et des hydroperoxydes dans le plasma et la membrane érythrocytaire à l'aide de kits commerciaux (spectrophotométrie et ELISA)

Dommages oxydatifs à l'ADN (dans le sang de la mère et du cordon)

dosage de la 8-hydroxyguanosine dans l'urine et le plasma par des kits commerciaux (ELISA).

Signal pro- et anti-inflammatoire (dans le sang de la mère et du cordon)

Certaines cytokines pro-inflammatoires et anti-inflammatoires du plasma maternel et du cordon ombilical (IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ et TNF-α, IL-1ra et TNF Srii α ), certaines adipokines (adiponectine, adipsine, résistine, PAI-actif, insuline et leptine) et myokines (irisine) seront mesurées par l'utilisation de la technologie Luminex xMAP.

Biomarqueurs osseux (dans le sang de la mère et du cordon)

Différents biomarqueurs pertinents liés au métabolisme osseux (ACTH, DKK-1, FGF-23, Ostéocalcine, OPN-Ostéopontine, Ostéoprotégérine, PTH et SOST) seront mesurés avec la technologie Luminex xMAP.

Expression des protéines liées à l'adiposité (dans le sang de la mère et du cordon)

Récepteur des glucocorticoïdes ; récepteur activé par la prolifération des peroxysomes (PPAR); la bêta-11 hydroxystéroïde déshydrogénase de type I (11βHSD1) et la bêta-11 hydroxystéroïde déshydrogénase de type II (11βHSD2) seront évaluées dans le sang de la mère et du cordon ombilical et dans la muqueuse buccale de la mère et du nouveau-né.

De plus, 4 gènes fortement impliqués dans le développement fœtal et postnatal du tissu adipeux ont été sélectionnés ; deux sont des récepteurs : le récepteur des glucocorticoïdes et le PPAR-γ, et deux sont des enzymes métaboliques : la bêta-11 hydroxystéroïde déshydrogénase de type I ou 11βHSD1, et la 11 bêta-hydroxystéroïde déshydrogénase de type II ou 11βHSD2. PPAR-γ1 et PPAR-γ2, qui sont générés à partir du même gène par l'utilisation d'un promoteur alternatif et d'ARNm, sont d'une grande importance. Nous mesurerons ces protéines ainsi que les concentrations de paraoxonase/arylestérase 1 (PON1) dans le plasma maternel et du cordon ombilical par les techniques de réaction en chaîne par polymérase et Western Blot.

Anthropométrie et composition corporelle de la mère et de l'enfant (Gestafitos)

La taille de la mère et de l'enfant sera enregistrée à l'aide d'une toise (Seca 22, Hambourg). Une analyse complète de la composition corporelle sera réalisée pour la mère et l'enfant (DXA, Hologic Discovery QDR, Nasdaq). Nous enregistrerons également le poids (Inbody R20, Biospace, Corée) ainsi que le tour de taille et le tour de cou chez la mère et l'enfant.

Pression artérielle et fréquence cardiaque au repos de la mère et de l'enfant (Gestafitos)

La pression artérielle systolique et diastolique, ainsi que la fréquence cardiaque, seront mesurées trois fois après 5 minutes de repos (Omron Hoolddorp) chez la mère et l'enfant.

État Nutritionnel de la Mère et de l'Enfant (Gestafitos)

Un questionnaire de fréquence alimentaire et un questionnaire d'adhésion au régime méditerranéen seront administrés. L'utilisation de compléments alimentaires sera également enregistrée.

Activité physique, comportement sédentaire et qualité du sommeil de la mère et de l'enfant

Nous évaluerons l'activité physique, le comportement sédentaire et les comportements liés au sommeil (latence, efficacité, etc.) à l'aide d'accéléromètres (ActigraphGT3X+, Pensacola, Floride, États-Unis) portés au poignet pendant neuf jours consécutifs. Les changements d'accélération seront enregistrés en époques de 5 secondes pour les enfants et de 60 secondes pour les mères. Les données seront collectées sur le volume total et l'intensité de l'activité (intensité moyenne de l'activité physique), la dépense énergétique, et le nombre de minutes par jour passées à différentes intensités : faible (sédentaire), légère, modérée, vigoureuse et modérée à vigoureuse. La qualité du sommeil sera également enregistrée à l'aide du logiciel spécifique Actisleep.

Fitness physique liée à la santé de l'enfant : Batterie PREFIT

La force musculaire, la capacité cardiorespiratoire, l'équilibre, la vitesse et la coordination motrice-agilité seront évalués à l'aide des tests suivants de la batterie PREFIT : test de navette de 20 m, dynamométrie de la force de préhension, test de saut en longueur sans élan, test d'équilibre sur une jambe et test de navette 4x10 m, respectivement. La batterie PREFIT est un outil réalisable, fiable, maximal et valide pour évaluer la condition physique des enfants d'âge préscolaire.

Structure Cérébrale, Débit Sanguin Cérébral et Fonction Cérébrale par Imagerie par Résonance Magnétique Structurelle et Fonctionnelle (Gestafitos)

L'IRM sera réalisée au Centre de Recherche sur le Cerveau, l'Esprit et le Comportement (CIMCYC) de l'Université de Grenade. Le Dr Irene Esteban-Cornejo, membre de l'équipe, a coordonné le domaine de la neuroimagerie dans des études précédemment financées (par exemple, le projet ACTIVEBRAINS, un essai contrôlé randomisé évaluant l'effet de l'exercice sur le cerveau des enfants). Elle a effectué deux séjours de recherche au Monash Institute of Cognitive and Clinical Neurosciences en Australie, est titulaire d'un Master en analyse avancée de l'IRM et est le premier auteur des deux premiers articles sur le cerveau du projet ACTIVEBRAINS, tous deux publiés dans la prestigieuse revue Neuroimage. Le Dr Esteban-Cornejo a également travaillé avec des experts de premier plan en exercice et santé cérébrale (Erickson KI, Kramer AF et Hillman CH) à l'Université Northeastern et à l'Université de Pittsburgh. Le Dr Erickson et la neuroscientifique Marina López-Solà font également partie de l'équipe du projet actuel.

Cognition (Gestafitos)

Trois aspects clés de la fonction exécutive seront évalués :

1. Inhibition cognitive : Évaluée via le test de Stroop, qui comporte trois conditions évaluant l'interférence lors de l'identification de la couleur de l'encre de mots qui ne correspondent pas à leur signification.

2. Flexibilité cognitive : Évaluée avec deux tests indépendants :

   Test de fluidité du dessin : Comprend trois conditions progressives où les participants créent des dessins uniques selon différentes règles en 60 secondes, évaluant la flexibilité, la créativité et la génération de motifs visuels.

   Test de traçage de pistes : Cinq conditions évaluant la vitesse de recherche visuelle, l'attention, la flexibilité mentale, la mémoire de travail et la fonction motrice.

3. Mémoire de travail : Évaluée avec une tâche informatisée n-back (voir section IRM), qui évalue la capacité à stocker et traiter simultanément des informations.
4. Intelligence : Évaluée avec le test d'intelligence abrégé de Kaufman (KBIT), qui comprend des sous-tests pour l'intelligence verbale et non verbale.

Performance Académique (Gestafitos)

1. Batterie Woodcock-Muñoz III : Adaptation espagnole de la Woodcock-Johnson III (WJ III), composée de 22 sous-tests évaluant le langage, les mathématiques et les sciences. Des sous-tests sélectionnés seront utilisés pour évaluer la fluidité en mathématiques, le calcul, la compréhension et l'écriture.
2. Notes scolaires : Les parents seront également invités à fournir les bulletins scolaires de l'enfant pour l'année (ou les années) scolaire(s) durant laquelle (lesquelles) les évaluations ont lieu.

Autres échelles de développement moteur, cognitif et langagier :

1. Échelles de Bayley du développement du nourrisson, troisième édition (BSID-III)
2. Échelle d'intelligence de Wechsler pour enfants
3. Batterie BENCI (Batterie informatisée d'évaluation neuropsychologique pour enfants)

Analyses Génétiques et Épigénétiques (Gestafitos)

Des échantillons de muqueuse buccale seront prélevés sur des enfants pour analyser l'expression du polymorphisme du gène FTO rs9939609 et du polymorphisme du gène MC4R rs17782313. L'ADN sera extrait de la salive à l'aide de supports en papier Whatmann® et de méthodes d'extraction organique optimisées pour la qualité et la quantité. Les échantillons seront quantifiés à l'aide d'un spectrophotomètre NanoDrop 2000 (ThermoScientific) et normalisés à ~5 ng/µL avant d'être génotypés avec des sondes TaqMan (Applied Biosystems) sur un RealTime ABI PRISM® 7900 HT. Les échantillons non concluants seront amplifiés et séquencés à l'aide d'amorces spécifiques et analysés avec le système 3130 HID Genetic Analyzer (Applied Biosystem). L'ADN et l'ARN seront extraits à l'aide du kit QIAamp DNA Mini Kit et du kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen), et traités avec le robot Qiacube.

Stress oxydant et défense antioxydante (Placentraining)

Le contenu en antioxydants liposolubles (tocophérol, coenzyme Q10 et Q9 et rétinol) dans le placenta sera analysé par HPLC, et l'oxyde nitrique ainsi que la capacité antioxydante totale par la méthode ABTS.

• Dommages oxydatifs aux protéines : protéines carbonyle à l'aide de kits commerciaux (spectrophotométrie).
• Dommages oxydatifs aux lipides : 4-hydroxynonénal et isoprostanes à l'aide de kits commerciaux (spectrophotométrie et ELISA). Dommages oxydatifs à l'ADN : 8-hydroxyguanosine par kits commerciaux (ELISA).

Expression des marqueurs de la biogenèse, de l'autophagie, des processus de fusion-fission mitochondriale (Placentraining)

Les modifications de la dynamique mitochondriale et de leur contrôle de qualité sont un aspect clé pour expliquer les observations constatées.

Par conséquent, en utilisant le Western-blotting ou la RT-PCR, les processus mitochondriaux de fission (Drp1, Fis1 et OPA1), de fusion (Mfn1 et Mfn2), de biogenèse (PGC1alpha, Tfam, Sirt1, Nrf1, Nrf2) et d'autophagie (PARKIN2, PINK1, Beclin-1, ATG8, ATG5, ATG12, VDAC1).

Oligo-éléments et ultra-oligo-éléments (Placentraining)

La détermination de la teneur totale de ces éléments essentiels (Ca, Mg, Mn, Fe, Cu, Zn, Se) ou toxiques (Hg, V, Cr, As, Cd, Pb, Ni) dans les échantillons de placenta sera réalisée par un spectromètre de masse à plasma à couplage inductif (ICP-MS) (Agilent 7500, Agilent Technologies, Tokyo, Japon) équipé d'un nébuliseur de type Meinhard (Glass Expansion, Romainmotier) et d'une cellule de collision à hélium (He).

Génomique et méthylation (Placentraining)

Les échantillons seront traités comme décrit précédemment dans la "section des analyses génétiques". Les analyses génomiques et de méthylation seront développées par la méthode de pyroséquençage. Cela sera développé pour la détection des gènes FTO et MC4R. L'ADN génomique des placentas sera isolé en utilisant le kit DNeasy Blood&Tissue suivant le protocole recommandé (Qiagen N.V, Hi.GE). Après vérification de la qualité et de la quantité de l'ADN, les promoteurs des gènes FTO et MC4R seront amplifiés au moyen des tests PyroMark CpG prédéfinis. L'amplification de la région à l'aide de ces amorces nous permettra de quantifier directement le statut de méthylation des CG dans la région. Tout d'abord, nous amplifierons les régions d'intérêt de FTO et MC4R par PCR en utilisant le kit PyroMark PCR (QIAGEN N.V, Hi.GE), qui permet de marquer les nucléotides CG susceptibles d'être méthylés. Les produits de réaction (un par échantillon et gène) seront purifiés et utilisés pour la réaction de séquençage.

Analyse de l'expression des gènes candidats et des petits ARN (Placentraining)

Pour une meilleure compréhension des voies métaboliques impliquées, nous réaliserons l'étude des gènes candidats, ainsi que la détermination des miRNAs qui nous permettra d'établir une relation génotype-expression-environnement (avec l'analyse par séquençage des petits ARN).

Pour l'analyse des ARNm et des miRNAs, l'ARN placentaire sera obtenu à l'aide du kit « RNeasy Mini » (Qiagen) en suivant les instructions du fabricant. L'intégrité de l'ARN sera analysée par une « puce RNA 6000 Nano » (Agilent) en utilisant un Bioanalyser 2100 (Agilent) et la concentration sera calculée par NanoDrop 2000 (ThermoFisher Scientific).

Des tests d'expression génique TaqMan préconçus (ThermoFisher Scientific) seront utilisés pour étudier l'expression des gènes candidats : IL6, CXCL8, TNF-alpha, CSF3, BDNF ; FTO, MC4R et KL klotho (KL).

Analyses de métabolomique et lipidomique ciblées et non ciblées

Les analyses de métabolomique ciblée seront réalisées en utilisant la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse. L'extraction des espèces lipidiques sera effectuée à partir d'échantillons de plasma avec du MTBE. Dix μL de l'échantillon extrait seront appliqués sur un UPLC 1290 (Agilent Technologies, Barcelone, Espagne) équipé d'une colonne en phase inverse couplée à un spectromètre de masse QTOF modèle 6545 (Agilent Technologies, Barcelone, Espagne). Les données seront collectées en modes électrospray positif et négatif. MassHunter (Agilent Technologies, Barcelone, Espagne) et le logiciel R seront utilisés pour collecter, extraire, aligner, filtrer et normaliser les données en utilisant des contrôles de qualité. Les analyses de métabolomique non ciblée seront réalisées en utilisant la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse. L'extraction des métabolites sera effectuée à partir d'échantillons de plasma avec du méthanol.

Toxiques (Formation placentaire)

Les concentrations de phénols bioactifs libres seront déterminées par chromatographie liquide à ultra-haute performance couplée à la spectrométrie de masse en tandem (CLHP-UPS-SM/SM). Les phénols suivants seront évalués :

bisphénol A ; parabènes : méthylparabène, éthylparabène, propylparabène, butylparabène ; benzophénones (BzP) : BzP-1, BzP-2, BzP-3, BzP-6, BzP-8, 4-hydroxy-BzP. Les concentrations de substances perfluoroalkylées dans le placenta seront évaluées par couplage de l'extraction liquide-liquide assistée par sel avec la microextraction liquide-liquide dispersive et la CLHP-UPS-SM/SM. Les substances perfluoroalkylées suivantes seront mesurées : PFHxA, PFHpA, PFOA, PFNA, PFDA, PFUnA, PFDoA, PFTrA, PFHxS et PFOS.

Marqueurs inflammatoires, anti-inflammatoires, de vasculogenèse et d'angiogenèse (Placentraining)

Nous utiliserons des kits de technologie Luminex xMAP (Millipore, Darmstadt, Allemagne) pour évaluer dans le placenta la Fractalkine, l'IL-1α, l'IL-1β, l'IL-RA, l'IL-2, l'IL-6, l'IL-8, l'IL-10, l'IFN-γ, le TNF-α, le TNF-β, le facteur neurotrophique dérivé du cerveau, le facteur de croissance épidermique, le facteur de croissance des fibroblastes 2, le facteur de stimulation des colonies de granulocytes, le facteur de stimulation des colonies de granulocytes et de macrophages, le facteur de croissance dérivé des plaquettes-AA, la protéine chimioattractive des monocytes-1, le facteur de croissance de l'endothélium vasculaire. Pour ces dosages, nous utiliserons le test multiplex Human Sepsis Magnetic Bead Panel 3 (réf. N° HTH17MAG-14K).