ANTigen 다양성이 제한적인 환경에서 면역 및 마이크로바이옴 변화의 영향에 대한 대책(ICELAND-TWO) (ICELAND-2)

실험 개념

이것은 이중 결합 통제 파일럿 연구로, 지원자들은 새로운 영양 보충제 분말(1011 CFU Bifidobacterium longum 1714(Alimentary 11 Health, Cork, Ireland) 또는 위약이 포함된 향낭)을 아침에 매일 한 번 받습니다. 일년 내내 아침 식사와 함께. 개입은 도착 시 모든 참가자에 대해 시작됩니다(개별 시작). 이 연구 설계를 사용하여 키 적응에 대한 프로바이오틱스의 이점도 연구할 수 있습니다.

실험적 개념은 생체 샘플(타액, 혈액, 대변) 수집과 일부 종이-연필 및 문서 데이터만을 기반으로 합니다. 따라서 CONCORDIA 승무원의 일상 활동과 프로젝트의 간섭이 최소화됩니다. 여성 및 남성 참가자 모두 포함됩니다.

1. CONCORDIA 투숙 전 혈액 1개, 타액 1개, 대변 1개, 종이-연필 데이터 동시 1회 수집(체류 전 -2~3개월 전 - T Zero, BDC)
2. CONCORDIA 체류 중 3개의 혈액 및 타액 샘플(T0, T4 및 T9에 해당하는 1개월, 4개월 및 9개월) 및 월간 대변 샘플 수집(1개월에서 9개월, T1에서 T9까지) 및 설문지 데이터(종이-연필 데이터 및/또는 온라인).
3. CONCORDIA 체류 후 혈액 1개, 타액 1개, 대변 1개, 종이-연필 데이터 동시 1회 수집(체류 후 3~6개월 - T12)

타액 샘플링: 표준 타액 샘플링 키트(Oragene-DNA - OG-500, DNA Genotec, Ottawa, ON, Canada)가 사용됩니다(그림 2 참조).

대변 ​​샘플링: 표준 대변 샘플링 키트(Sarstedt)를 사용하여 각 대변에서 3개의 작은 샘플을 추출하고 별도의 용기에 보관합니다(그림 3 참조).

대변 ​​수집기: 종이 기반 대변 수집 보조 장치(다양한 언어로 지침이 인쇄됨(FecesCatcher®)(그림 4)

채혈: 채혈은 2개의 5ml 헤파린 처리 튜브(세포 수집을 위해 총 10ml)와 채혈당 5ml의 건조 튜브 1개에서 수행됩니다. 혈액 처리를 위한 적절한 수의 분리 튜브 및 저온 튜브도 제공됩니다.

절차 개요

타액 샘플링: CONCORDIA 숙박 전 언제든지 할 수 있으며 출발 전 승무원 회의 중에 가장 쉽습니다. 타액 샘플링은 CONCORDIA 체류 후뿐만 아니라 4개월과 9개월에 반복됩니다. 타액 샘플은 전처리가 필요하지 않으며 남은 시간 동안 실온에서 보관할 수 있습니다.

출발 전 면담 시 영양습관(배변 등 위장관 증상 포함)과 관련된 면담을 1시간 정도 진행해야 합니다. 종이-연필 테스트(1시간)도 수집됩니다. 여기에는 식품 빈도 설문지(FFQ), 위장관 증상 등급 척도(GSRS) 및 이전 질병, 약물 섭취 및 의료 치료와 관련된 구조화된 설문지가 포함됩니다. FFQ 및 GSRS는 혈액 샘플링이 수행되는 동시에 Concordia에서 평가됩니다.

대변 ​​샘플링 및 짧은 웰빙 평가: 샘플링(별도의 용기에 담긴 완두콩 크기의 3개 분취량)은 참여하는 각 CONCORDIA 승무원의 재량에 따라 매달 한 번 수행할 수 있지만, 매월 거의 같은 날에 우선적으로 수행할 수 있습니다. 승무원 간의 조정된 샘플링은 필요하지 않지만 샘플링 키트/일지에 날짜를 기록해야 합니다. 이는 ESA MD가 감독하고 문서화해야 합니다. 대변 ​​샘플링과 함께 참가자는 시각적 아날로그 척도 기분, 스트레스 및 사회적 무결성에 대해 평가하도록 요청받을 것입니다. 또한 ESA MD는 모든 참가자에게 정보를 제공합니다. 이 측정은 RCT의 결과로 필요합니다.

음식 기록: ESA MD는 가능하면 정기적으로 식사/음식/음식 상태의 사진을 찍도록 요청받습니다. 가장 중요한 것은 MD가 식사(대변 샘플링 전 마지막 3일 및 당일)의 표준화된 사진을 찍어야 한다는 것입니다. 카메라와 저장 장치는 이탈리아 아오스타의 MD에게 전달되었습니다.

대안으로 및/또는 추가로 요리사는 자신의 요리 활동을 기록합니다.

T - 대변 샘플링 3일 전:

ESA MD는 아침 식사, 점심 식사 및 저녁 식사의 사진을 찍습니다(참고 2유로 동전 포함).

T - 대변 샘플링 2일 전:

ESA MD는 아침 식사, 점심 식사 및 저녁 식사의 사진을 찍습니다(참고 2유로 동전 포함).

T - 대변 채취 1일 전:

ESA MD는 아침 식사, 점심 식사 및 저녁 식사의 사진을 찍습니다(참고 2유로 동전 포함).

대변 ​​샘플링 일수:

ESA MD는 아침 식사, 점심 식사 및 저녁 식사의 사진을 찍습니다(참고 2유로 동전 포함).

대변 ​​샘플의 전처리가 필요하지 않으며 샘플은 -50°C에서 보관됩니다.

채혈: 면역 검사를 위한 채혈은 단일 정맥 절개로 수행해야 하며 CONCORDIA 직원의 프로그램된 건강 검진 시 수행할 수 있습니다. 채혈은 2개의 5ml 헤파린 처리 튜브(세포 수집용 총 10ml)와 혈청용 5ml 건조 튜브 1개에서 수행해야 합니다.

혈액 샘플의 전처리(ESA 조사 의사가 수행함)

동족 면역 기능을 위해서는 살아있는 세포가 필요하며 그 후에 소생될 수 있도록 보존 조건에서 냉동 및 저장되어야 합니다. 이는 수집 후 신속한 처리(4-6시간 이내), 급속 냉동 및 -40°C 미만의 배지(DMSO 포함)에서 보존하는 것을 의미합니다.

혈구 보관: 세포 준비를 단순화하기 위해 헤파린 나트륨이 포함된 Vacutainer® CPT™ 세포 준비 튜브가 제공됩니다(그림 5, 왼쪽). CPT™ 튜브에는 ficoll(밀도 완충액)과 원심분리할 준비가 된 젤이 직접 포함되어 있습니다. 혈액은 일반적인 vacutainer 튜브와 같이 젤 상단에 수집됩니다. 원심 분리는 단핵 세포에서 적혈구, 과립구(겔 아래로 이동)를 분리하고 상단에 머무는 혈장을 분리합니다. 단핵 세포는 멸균 행크스 완충액(제공됨)에서 세척하고 펠렛을 동결 완충액(제공됨)에 재현탁하고 최소 40°C 미만에서 직접 동결해야 합니다.