Una medida contraria a los efectos de los cambios inmunitarios y del microbioma en entornos con diversidad limitada de antígenos (ISLANDIA-DOS) (ICELAND-2)

CONCEPTO DE EXPERIMENTO

Se trata de un estudio piloto controlado de doble enlace en el que los voluntarios recibirán un nuevo suplemento nutricional en polvo (sobre, que contiene 1011 CFU de Bifidobacterium longum 1714 (Alimentary 11 Health, Cork, Irlanda) o placebo) una vez al día, para tomar por la mañana. con desayuno durante todo el año. La intervención comienza para cada participante a su llegada (inicio individual). Usando este diseño de estudio, también se pueden estudiar los beneficios del probiótico en la adaptación a la altura.

El concepto experimental se basa en la recolección de biomuestras (saliva, sangre, heces) y algunos datos de papel-lápiz y documentos únicamente. De esta manera, la interferencia del proyecto con las actividades diarias de la tripulación del CONCORDIA es mínima. Se incluyen tanto participantes femeninos como masculinos.

1. Una muestra de sangre, una de saliva y otra de heces previa a la estancia en CONCORDIA, además de la toma de datos en papel y lápiz una vez al mismo tiempo (-2 a 3 meses antes de la estancia - T Zero, BDC)
2. Tres muestras de sangre y saliva (mes 1, meses 4 y 9, correspondientes a T0, T4 y T9) durante la estadía en CONCORDIA, así como recolección mensual de muestras de heces (meses 1 a 9, T1 a T9), más datos del cuestionario (datos papel-lápiz y/o en línea).
3. Una muestra de sangre, una de saliva y una de heces después de la estadía en CONCORDIA, además de la toma de datos en papel y lápiz una vez al mismo tiempo (3 a 6 meses después de la estadía - T12)

Muestreo de saliva: se utilizará un kit de muestreo de saliva estándar (Oragene-DNA - OG-500, DNA Genotec, Ottawa, ON, Canadá) (consulte la Figura 2).

Muestreo de heces: se usará un kit de muestreo de heces estándar (Sarstedt) (consulte la Figura 3) para recuperar 3 muestras pequeñas de cada heces y se almacenarán en recipientes separados.

Feces Catcher: ayuda para la recolección de heces en papel (con instrucciones impresas en un idioma variable (FecesCatcher®) (Figura 4)

Muestreo de sangre: La recolección de sangre se realizará en dos tubos heparinizados de 5 ml (total 10 ml para la recolección de células) y un tubo seco de 5 ml por muestreo de sangre. También se proporcionará una cantidad adecuada de tubos de separación y criotubos para el procesamiento de sangre.

ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO

Muestreo de saliva: se puede realizar en cualquier momento antes de la estadía en CONCORDIA, lo más fácil es durante la reunión de la tripulación previa a la salida. El muestreo de saliva se repetirá en el mes 4 y 9, así como después de la estadía en CONCORDIA. Las muestras de saliva no necesitan ningún procesamiento previo y se pueden almacenar a temperatura ambiente durante el tiempo restante.

Durante la reunión previa a la partida, se debe realizar una entrevista de 1 hora relacionada con los hábitos nutricionales (incluidos los síntomas gastrointestinales como las deposiciones). También se recogerán pruebas papel-lápiz (1 hora). Esto incluirá el Cuestionario de frecuencia de alimentos (FFQ), la escala de calificación de síntomas gastrointestinales (GSRS) y un cuestionario estructurado relacionado con enfermedades previas, consumo de medicamentos y tratamientos médicos. El FFQ y el GSRS se evaluarán en Concordia al mismo tiempo que se realiza el muestreo de sangre.

Muestreo de heces y evaluación breve del bienestar: el muestreo (tres alícuotas, del tamaño de un guisante, en recipientes separados) se puede realizar a discreción de cada miembro de la tripulación participante de CONCORDIA una vez al mes, pero preferentemente aproximadamente el mismo día de cada mes cada vez. No se necesita un muestreo coordinado entre los miembros de la tripulación, pero se debe anotar el día en los kits/diario de muestreo. Esto debe ser supervisado y documentado por el MD de ESA. Junto con la muestra de heces, se les pedirá a los participantes que califiquen el estado de ánimo, el estrés y la integridad social en una escala analógica visual. Además, el MD de la ESA proporcionará la información de cada participante. Esta medida es necesaria como resultado para el ECA.

Registros de alimentos: se le pide al MD de ESA que tome fotografías de las comidas/alimentos/estado de los alimentos con regularidad, si es posible. Lo que es más importante, el médico debe tomar fotografías estandarizadas de las comidas (de los últimos tres días antes de la muestra de heces). La cámara y los dispositivos de almacenamiento se entregaron al MD en Aosta, Italia.

Alternativamente y/o además, el cocinero registrará sus actividades de cocina.

T - 3 días antes de la muestra de heces:

ESA MD toma una foto (con una moneda de 2 euros de referencia) del desayuno, el almuerzo y la cena

T - 2 días antes de la muestra de heces:

ESA MD toma una foto (con una moneda de 2 euros de referencia) del desayuno, el almuerzo y la cena

T - 1 día antes de la toma de muestras de heces:

ESA MD toma una foto (con una moneda de 2 euros de referencia) del desayuno, el almuerzo y la cena

Días de muestreo de heces:

ESA MD toma una foto (con una moneda de 2 euros de referencia) del desayuno, el almuerzo y la cena

No es necesario preprocesar las muestras de heces, las muestras se almacenan a -50 °C.

Toma de muestra de sangre: La extracción de sangre para pruebas inmunológicas debe realizarse mediante una sola flebotomía, y puede realizarse en el momento de los controles de salud programados del personal de CONCORDIA. La extracción de sangre debe realizarse en dos tubos heparinizados de 5 ml (total 10 ml para la extracción de células) y un tubo seco de 5 ml para el suero.

Preprocesamiento de la muestra de sangre (a realizar por el médico investigador de la ESA)

Para las funciones inmunitarias afines, se necesitan células vivas y deben congelarse y almacenarse en condiciones de conservación para que puedan resucitarse después de eso. Esto significa un procesamiento rápido después de la recolección (dentro de 4 a 6 horas), congelación rápida y en medio de conservación (con DMSO) por debajo de -40 °C.

Almacenamiento de células sanguíneas: Se proporcionan tubos de preparación de células Vacutainer® CPT™ con heparina sódica para simplificar la preparación de células (Figura 5, izquierda). Los tubos CPT™ contienen directamente ficoll (tampón de densidad) y un gel listo para centrifugar. La sangre se recoge en la parte superior del gel como los tubos vacutainer habituales. La centrifugación separará los glóbulos rojos, los granulocitos (que se encuentran debajo del gel) de las células mononucleares y el plasma que permanece en la parte superior. Las células mononucleares deben lavarse en tampón Hanks estéril (suministrado) y el sedimento debe volver a suspenderse en tampón de congelación (suministrado) y congelarse directamente al menos por debajo de 40 °C.