Friedreich 운동실조증 환자에서 Etravirine의 안전성 및 유효성 (FAEST1)

Friedreich 운동 실조증은 현재 치료가 불가능한 아동기 또는 후기 청소년기에 나타나는 드문 진행성 신경변성 질환입니다. 이 질병은 FXN 유전자에 의해 합성되는 미토콘드리아 단백질인 Frataxin의 합성 결함으로 인해 발생합니다. 환자의 95% 이상이 FXN 유전자 전사 및 번역을 손상시키는 동형 접합 인트론 GAA 확장을 가지고 있습니다. 대부분의 FRDA 환자의 게놈 내 온전한 판독 프레임의 지속성은 내인성 Frataxin 수준을 증가시키고 Frataxin 결핍의 복잡한 대사 결과의 균형을 맞추기 위해 FXN 유전자 전사 및 mRNA 번역을 표적으로 하는 치료 시도의 길을 열어줍니다. 이 질병은 운동 조정(운동 실조), 심장 기능 및 구조(비대성 심장병증), 운동 능력(유산소 능력이 감소된 생체 에너지 장애), 내분비 기능(당뇨병), 시각 및 청각 기능(시각 위축 및 청력 상실)을 포함하는 끊임없는 진행을 특징으로 합니다. ).

853개의 FDA 승인 약물 라이브러리를 스크리닝하여 체외에서 Frataxin을 상향 조절할 수 있는 몇 가지 약물을 발견했습니다. 그 중 우리는 일반적으로 유리한 안전성 프로파일을 위해 Etravirine을 선택하고 집중했습니다. Friedreich 운동 실조증(FRDA) 환자 유래 세포에서 우리는 Etravirine이 성숙한 Frataxin 단백질을 상향 조절하고, 아코니타제의 활성을 강화하며, 산화 스트레스에 대한 저항성을 부여한다는 것을 발견했습니다. Etravirine은 무거운 polysomes에 대한 frataxin mRNA의 재분배와 결과적으로 Frataxin mRNA 번역의 향상을 포함하는 작용 메커니즘에 의해 Frataxin 단백질을 상향 조절하는 것으로 보입니다. 또한 런던 브루넬 대학의 Mark Pook 박사와 협력하여 Etravirine이 Etravirine을 5일 동안 경구 투여한 YG8 마우스의 심장 및 골격근에서 Frataxin 단백질을 상향 조절할 수 있다는 증거를 얻었습니다(미공개).

에트라비린은 비뉴클레오시드 역전사 효소 억제제로 작용하는 디아릴피리미딘입니다. 2008년에 다른 약물에 내성이 있는 HIV 환자의 치료를 위해 FDA(상표명 Intelence)의 승인을 받았습니다. 2018년에는 2세 이상의 환자를 포함하도록 라벨이 확장되었습니다. FDA 라벨에는 금기 사항이 보고되지 않습니다. Etravirine은 정제 형태로 경구 투여됩니다.

예비 결과

런던의 Brunel University의 Mark Pook 박사와 공동으로 우리는 Etravirine이 YG8 마우스의 조직에서 Frataxin 단백질을 상향 조절할 수 있는지 여부를 테스트했습니다. 5마리의 YG8 마우스에게 에트라비린(10mg/Kg)을 5일 동안 경구 투여하고 5마리의 YG8 마우스에게 5일 동안 비히클을 경구 투여했습니다. 마지막 투여 4시간 후, 모든 마우스를 희생시키고 조직으로부터 단백질 추출물을 제조하였다. SDS-PAGE에 이어 면역블롯팅을 통해 프라탁신 단백질이 비히클 투여 마우스에 비해 에트라비린 투여 마우스의 심장 및 골격근에서 유의하게 증가한 것으로 나타났습니다.

특정 목표

프라탁신 단백질을 상향 조절하고 판코니빈혈 환자 유래 세포의 표현형 결함을 구조하는 능력과 안전하고 어린이에게 승인된 사용으로 인해 에트라비린은 판코니빈혈에 대한 매력적인 잠재적 치료제를 나타냅니다. 따라서 연구의 목적은 젊은 판코니빈혈 환자를 대상으로 에트라비린의 안전성과 효능을 평가하는 것입니다.

실험 계획 연구 설계. 이 연구는 판코니빈혈 환자에서 에트라비린의 안전성과 효능을 조사하기 위한 무작위 공개 라벨 2상 임상 시험이 될 것입니다.

연구 인구. 우리는 6개월 동안 10세에서 40세 사이의 30명의 판코니빈혈 환자를 등록하는 것을 목표로 합니다. 등록은 환자 협회 및 Medea 사이트에서 현재 추적 중인 FA 환자(현재 50명의 피험자)를 통해 연구를 광고함으로써 이루어집니다. Martinuzzi 박사가 활동하는 3차 진료 병원 환경에서 환자를 선별하고 평가할 것입니다. 치료는 매 방문시 환자에게 제공된 처방에 따라 집에서 수행됩니다.

연구 개입. 모집된 피험자는 컴퓨터에서 생성된 무작위 순서에 따라 4개월 동안 Etravirine 경구 200mg/일(100mg cpr x 2, 아침 및 저녁) 또는 Etravirine 400mg/일 중 하나에 대해 1:1로 무작위 배정됩니다. 4개월 동안 200mg cpr x 2 아침과 저녁 1회). 치료는 4개월의 치료 전 기간이 완료된 후 그리고 T0 평가 방문 후에만 시작됩니다.

철회 기준. 연구 후속 방문 또는 치료 프로토콜을 준수하지 않음. 약물 치료와 관련이 있다고 판단되는 SUSAR(의심되는 예상치 못한 중증 부작용)의 발생.

중지 규칙. 전체 연구가 다음과 같이 중단됩니다. 1) 다른 환자에서 세 번째 SUSAR이 발생하는 경우. 2) 2명의 다른 환자에서 동일한 SUSAR의 발생에 대하여. 3) 임상시험용의약품과 관련이 있다고 판단되는 중대한 이상반응이 최초로 발생하여 환자의 생명을 위협하거나 영구적인 피해를 입힌 경우 4) 임상시험에서 세 번째 환자를 제외하는 경우.

끝점

1. 안전. 에트라비린 치료 시작 4개월 전(T -4), 치료 시작 시점(T0)에 혈액화학적 매개변수(혈구 수, 혈당, BUN, 크레아티닌, AST, ALT, yGT, 페리틴, 트로포닌)를 수집합니다. , 2개월 후(T2), 치료 종료 시(T4) 및 치료 종료 후 4개월(T8). 필수 매개변수 평가 및 가능한 발진에 대한 피부 검사를 포함한 신체 평가는 등록 시 및 후속 방문 시마다 완료됩니다. 에트라비린과 관련된 모든 알려진 부작용을 나열한 상세한 설문지가 모든 환자에게 배포되고 각 후속 방문에서 검토될 것입니다. 추가 AE는 치료와의 관련 가능성에 관계없이 등록됩니다.
2. 효능 일차 종점. 연구의 1차 종점은 사이클 에르고미터에 의한 표준화 증분 운동 테스트 동안 참가자가 달성한 최대 유산소 능력(VO2 피크)의 변화입니다. 무게로 정규화된 최대 VO2는 호기성 능력의 매우 안정적인 객관적인 척도입니다. FA는 표준화된 운동 테스트로 측정한 유산소 체력의 현저한 감소(50-60% 감소)와 관련이 있으며 그 측정은 FA 개입 시도에서 일차 종료점으로 여러 번 사용되었습니다.

보조 끝점. 보조 엔드포인트에는 다음이 포함됩니다.

• 실조증 평가 및 평가 척도(SARA)에 의해 정량화되는 질병의 임상 측정치; SARA는 운동실조 장애를 위해 특별히 개발된 가장 민감한 기능적 복합 성능 측정법입니다.
• 중요한 심장 매개변수(심실 중격 벽 두께, 좌심실 벽 두께, 좌심실 박출률, Sokolow-Lyon 지수 포함); 심장은 FA에서 주로 영향을 받아 진행성 대부분 좌심실 비대를 나타냅니다. 심근병증은 이 인구에서 생존의 주요 결정 요인입니다. Sokolow-Lyon 지수(∆%QRS-전압)로 요약된 ECG 변화는 심실 비대의 신뢰할 수 있는 지표입니다. 심초음파는 심장 비대 변화의 정도와 중증도를 매우 정확하게 감지하고 측정할 수 있습니다.
• 추가 운동 지표: 증분 운동 테스트 동안 탈진 시 도달한 최대 작업량(W/Kg);
• WHO-DAS 2.0은 기능 및 장애의 생물심리사회적 모델의 틀 내에서 WHO가 개발하여 국제적으로 검증되고 광범위하게 적용되는 질병 비특이적 장애 척도입니다. 6가지 주요 삶의 영역에서 지난 30일 동안 경험한 어려움의 심각도와 지속 시간 측면에서 피험자에게 점수를 매기도록 요청합니다. 인터뷰 형식이 사용되며 결과는 정규화된 점수로 계산됩니다. 이 측정은 16세 이상에서만 유효하므로 16세 이상의 피험자에게만 시행됩니다.
• 말초 혈액 세포에서 측정된 프라탁신 단백질 수준. 프라탁신 단백질은 SDS-PAGE 및 말초 혈액 단핵 세포로부터의 단백질 추출물에서 면역블롯팅에 의해 정량될 것이다. 동일한 시점에서, 프라탁신 mRNA 번역에 대한 에트라비린의 효과를 평가하기 위해, 번역 활성 중질 다염체 분획에서 프라탁신 mRNA의 분포를 말초 혈액 단핵 세포로부터의 추출물에서 결정할 것이다.

샘플 크기 계산. 샘플 크기는 일차 종점을 고려하여 계산되었습니다. 대조군 피험자의 최고 VO2 값은 ±4 ml/min/Kg의 테스트-재테스트 변동성과 함께 >16.2 값을 나타냅니다. 최고 작업량은 ± 0.8의 SD를 가진 통제 대상에서 >3W/Kg일 것으로 예상됩니다. 이 매개변수는 유사한 SD 값을 가진 FA 환자에서 약 50% 감소합니다. 알파 오차 0.05와 통계 검정력 80%를 고려하면 필요한 참가자 수는 30명이다.

통계 분석. 1차 및 2차 종료점 모두 반복되는 개체 내 요인으로 시점을 모델링하는 다변량 선형 혼합 모델을 사용하여 분석됩니다. 혼합 모델은 시점 간의 이질적인 거리, 누락된 데이터, 불평등 분산 및 공분산을 설명할 수 있는 이점이 있습니다. 환자 간 가변성으로 인한 혼동 가능성을 설명하기 위해 모든 모델에는 성별, 발병 연령, 질병 기간, 교육 기간 및 더 작은 FXN 대립 유전자 내의 GAA1 반복 수가 관심 없는 공변량으로 포함됩니다. 통계적으로 유의미한 경우(p