말라리아 제어를 위한 공간 구충제로서의 IR3535의 평가. (REPELMALARIA)

연구 지역 및 인구

이 연구는 모잠비크 소팔라 주 나마탄다 지구 베베도 지역 탐바이 지역사회에서 수행될 예정이다. 지역사회는 Mutondo Health Center의 보호를 받습니다.

연구 설계

전향적 실험 전-후-제어-개입 테스트는 두 그룹으로 수행됩니다. -아세틸-N-부틸)아미노프로피온산 에틸 에스테르) 및 b) 대조군(탐바이커뮤니티 쿼터 3(Q3) 및 4(Q4)): 분무하지 않음. 이 종단 연구는 2년 동안 지속됩니다. 모기는 전염과 관련된 곤충학적 지표를 결정하기 위해 실내 및 실외에서 포획될 것입니다. 커뮤니티의 모기 번식지는 "참여형 매핑"을 사용하여 매핑됩니다. 5세 미만 어린이의 말라리아 유병률은 연구 시작, 중간 및 종료 시점에 대조군과 개입 커뮤니티에서 결정됩니다. Tambai 가구주(2분기, 3분기, 4분기, 6분기), 보건 전문가 및 주요 지역사회 행위자를 대상으로 한 말라리아에 대한 KAP 설문조사.

인구 개입 및 절차

초기에 Beira Operational Research Center(CIOB)와 Nova University Lisbon(IHMT-NOVA)의 위생 및 열대 의학 연구소는 Mutondo 보건 센터, Sofala 지방 보건국 및 Directorate 지구 보건 지구와 협력하여 나마탄다와 고롱고사 국립공원은 참여 방식으로 개입을 제시하고 연구 시작부터 지역사회에 의한 전유를 보장하기 위해 지역사회에 대한 접근 방식을 설명할 것입니다. 연구를 수행하기 전에 커뮤니티에 정보를 제공하고 커뮤니티가 연구의 목적을 이해할 수 있도록 지역 구조에 대해 브리핑합니다.

커뮤니티 지식, 태도 및 관행(KAP)에 대한 설문조사.

세 가지 KAP 조사가 시작(기준선), 첫 해 말 및 두 번째 해 말에 수행됩니다. 연구 인구는 Tambai의 Q2, Q3, Q4 및 Q6의 모든 가구로 구성됩니다. 가계 데이터는 ODK 애플리케이션을 통해 Android 시스템을 사용하는 태블릿용 설문지를 사용하여 수집됩니다. 세대주 면담은 세대주 자택 또는 세대주가 제안한 장소에서 진행됩니다. 말라리아에 대한 KAP 및 구충제 사용의 수용 가능성과 관련된 다양한 측면은 포커스 그룹과 지역 주요 행위자에 대한 인터뷰로 보완될 것입니다. 데이터 수집은 두 가지 기술을 기반으로 수행됩니다. a) Vinho Health Center의 의료 전문가(모성 및 아동 보건 간호사 및 예방 의학 전문가)에 대한 반구조화된 인터뷰(Flick, 2006), 두 명의 활동가 및 지역 지도자; b) 연구 대상인 두 공동체의 전통 의학 종사자와 메이트론으로 구성된 포커스 그룹(Flick, 2006). 이 연구 구성 요소의 모든 참가자는 의도적으로 선택됩니다(Hancock, Ockleford 및 Windridge, 2009). 정보에 입각한 동의서에 서명함으로써 참여가 이루어집니다.

말라리아 유행

말라리아 유병률은 연구 시작 시점, 2년차 시작 시점 및 종료 시점에 Tambai Q2 및 Q6(개입) 및 Tambai Q3 및 Q4(대조군) 위치 모두에서 5세 미만 아동에서 결정됩니다. 두 번째 해(프로젝트 종료). 법정대리인의 동의를 구합니다. 모세혈관 혈액은 다음을 위해 연구에서 6-59개월령의 모든 어린이로부터 멸균 피펫 및 개별 란셋을 사용하여 수집됩니다. b) 혈액 방울 도말 및 c) 핵산 추출을 위한 여과지(FTA 카드 ThermoFisher). 샘플은 코드화되고 관련 가구의 좌표에 대한 정보가 기록됩니다. MTA에 정의된 대로 초기 샘플 처리는 Beira의 Ponta Gea 보건 센터 실험실에서 수행되고 분자 분석은 IHMT-NOVA - Lisbon에서 수행됩니다. Plasmodium의 식별은 전체 게놈 시퀀싱(Ocholla et al. 2014)에 의한 PCR 및 유전자형 분석에 의해 수행됩니다. 연구 기간 동안 RDT에서 말라리아 진단을 받은 어린이는 치료를 위해 Mutondo Health Center로 보내집니다.

방충제로 집 살포

IR3535의 살포는 연구 시작 시 시작하여 처음 3개월 동안 매월, 다음 6개월 동안 격월로, 그 후 분기별로 수행됩니다. 살포는 아침에 집 안팎에서 실시됩니다. 살포는 개입 구역에서만 수행되며 통제 구역에서는 살포하지 않습니다.

곤충학

곤충학 연구를 위해 가구는 무작위로 선택됩니다. 위성 이미지 및 지리적 분석이 실패하는 경우(Wampler et al. 2013, Escamilla et al. 2014) 각 커뮤니티의 가구 인벤토리를 기반으로 하는 고전적인 접근 방식이 수동으로 사용됩니다. 로컬 매핑 및 번호 매기기를 사용하여 두 개의 세대 번호 목록이 생성됩니다. 난수 생성기(예: Random.org) 이후 각 목록에서 가구를 무작위로 선택하는 데 사용됩니다(Wampler et al. 2013). 모기는 개입 및 통제 구역에서 2년 동안 선택된 가구의 집 안팎에서 한 달에 두 번 수집됩니다. 각 가정 내에서 전날 밤에 먹은 쉬고 있는 모기를 Prokopak 흡인기를 사용하여 수집합니다. 거주지 밖에는 이른 저녁에 CDC- 조명 트랩을 설치하고 다음날 아침에 수거합니다. 트랩은 가구를 구성하는 건물(집)에서 같은 거리에 있는 실외에 배치됩니다. 모기의 생리학적 상태가 결정되고 암컷은 무급식, 부분급식, 급식, 반임신 또는 임신으로 분류됩니다(Detinova, 1962). 모기 암컷은 형태학적으로 식별되고 PCR에 의해 확인됩니다(Abilio et al. 2015). 제어 및 개입 커뮤니티에서 잡힌 모기의 밀도는 윌리엄스의 기하 평균을 사용하여 추정됩니다. 시간에 따라 두 그룹을 비교하기 위해 GEE와 LMM을 탐색합니다. 감염률은 모기에서 스포로조이트를 검출하고 정량화하여 결정됩니다. 모기의 머리와 흉부를 제거하고 DNA를 분리할 준비를 합니다(Abilio et al. 2011). Sporozoites는 (Marie et al. 2013)에 설명된 대로 정량적 PCR(qPCR)에 의해 검출되고 정량화됩니다.

번식지 매핑

모기 번식지는 "참여형 매핑" 접근법을 사용하여 매핑됩니다(Dickin et al. 2014). 이 방법은 기존 번식지의 공간 식별을 기반으로 지역 사회에서 말라리아 위험에 대한 공간적 인식을 식별하는 데 사용됩니다. 인터뷰 참가자와 포커스 그룹은 커뮤니티에서 번식과 관련된 영역의 지도를 그리고 지도의 중요한 특징을 설명하도록 초대됩니다. 그런 다음 이러한 지도를 지리 정보 시스템(GIS)에서 디지털화하여 지역 사회 지식의 지리 참조 지도를 만들 수 있습니다.

지역사회의 말라리아 사례

연구 기간 동안 Tambai의 말라리아 사례는 Mutondo Health Center를 방문하는 환자를 통해 모니터링됩니다. 말라리아가 의심되는 지역 사회의 모든 연령대의 환자를 모집합니다. 설문조사가 실시됩니다. RDT, 두꺼운 방울 및 혈액 도말 검사가 수행되고 PCR에 의한 후속 분자 진단을 위해 혈액 한 방울이 수집됩니다(위에서 설명한 대로). 등록 및 동의는 환자가 보건소에서 필요한 모든 치료를 받은 후에 요청됩니다. 18세 미만 환자의 경우 참가자 또는 법정 대리인으로부터 서면 동의서를 받습니다.

연구 변수

연구변수는 설문조사(설문지)와 반구조화된 인터뷰의 변수로 나눌 수 있다. 변수는 다음 범주로 그룹화할 수 있습니다.

• 사회-인구학적 변수: 연령; 섹스; 혼인 여부 직업; 교육 수준; 1. 세대주와의 친족관계 가구 규모(가구 수, 면적) 집안의 방 수; nº 부서당 인원; 건설 유형.
• 모기장의 소유 및 사용: 모기장의 소유권 모기장 사용; 가족 구성원의 이동성과 활동.
• 말라리아 지식, 태도 및 관행: 말라리아 지식 수준; 말라리아 태도; 모기 제어 및 물기; 모기장의 소유권, 보존 및 사용; 기피제에 대한 지식; 설문지 데이터를 분석한 후 변수를 추론합니다. 말라리아에 대한 지식, 태도 및 관행의 수준(점수 분류: 나쁨(> 50%), 중간(50% -74%) 및 높음(≥75%)).

연구의 변수는 또한 생물학적 물질(말초 혈액 및 모기) 수집으로 인한 것입니다.

• 5세 미만 아동의 말라리아 사례(RDT, 광학 현미경 및 PCR);
• Vinho 건강 센터에 참석하는 말라리아 사례;
• 집 안팎의 모기 밀도; 감염된 모기의 비율; 집 안팎의 모기 종 분포;
• 번식지(참여형 매핑)

KAP의 샘플 크기

연구 대상 커뮤니티의 총 가구 수에 해당하는 약 126명의 가구주를 조사할 예정입니다(2017년 모잠비크 통계청(INE) 보고서에 따름). 선택한 위치는 126가구로만 구성되어 있으므로 연구에 대한 최대 권한을 보장하기 위해 연락된 모든 사람이 참여하도록 포함됩니다.

중재 및 통제 커뮤니티의 말라리아 유병률

2017년 INE 보고서에 따르면 두 연구 지역의 총 인구 수는 630명입니다. 5세 미만 아동 수를 계산하기 위해 전체 인구에 17.5%를 곱했으므로 표본은 약 110명의 아동으로 구성됩니다. 모든 어린이를 포함시키려는 시도는 가능한 한 가장 높은 검정력을 보장하는 표본 크기를 얻으려는 것을 목표로 합니다.

곤충학적 지표에 대한 표본 크기 및 통계적 검정력

샘플 크기를 계산하기 위해 다양한 시나리오와 프로그램을 탐색했습니다. 처음에는 40가구(각 커뮤니티에서 20개)의 샘플 크기에 해당하는 시나리오가 48분 동안 실행 가능한 것으로 간주되었습니다. 통계 검정력은 G * Power v.3.2 프로그램(Faul et al. 2007, 2009)을 사용하여 계산되었으며 서로 다른 시간에 수행된 측정 간의 상관 관계는 0.2입니다. 크기 f = 0.25의 효과로; 제1종 오류 확률은 0.05입니다. 통계적 검정력은 91.1%로 추정되었습니다. 반대로, 동일한 매개변수 값에 대해 검정력을 95%로 고정하고, ANOVA를 반복 측정하는 관점에서 각 커뮤니티에서 24개의 집계를 얻었습니다. 그러나 반복 측정에 대한 ANOVA의 가정이 실패하면 LMM 또는 GEE 모델이 사용되므로 이러한 모델에 대한 통계 검정력에 대한 아이디어를 갖는 것이 중요합니다. R 소프트웨어의 Longpower 패키지(https://www.rdocumentation.org/packages/longpower/versions/1.0-19/topics/longpower-package) 사용, 이전 시나리오에 대한 GEE 및 LMM 모델과 관련된 전력 (24 가구), 만족스럽지 않을 것입니다. 누락된 값(마지막 방문에서 최대 20%)의 가능성을 고려하여 각 방문에서 측정에 대한 보다 현실적인 자동 회귀 상관 행렬, 다양한 유형의 모델에 대해 최소 80%의 검정력을 보장하기 위해 Longpower에서 여러 시나리오를 탐색했습니다. . 따라서 예산과 인적 자원을 유지하면서 각 지역에 40가구(총 80가구)가 있고 각 가정을 한 달에 한 번씩 방문합니다.

데이터 분석

데이터는 SPSS 버전 25.0 및 R 패키지를 사용하여 분석됩니다. 처음에는 기술 통계 및 탐색 분석이 수행됩니다. 파라메트릭 및 비파라메트릭 테스트는 독립 샘플(예: 주어진 시간에 두 커뮤니티 비교) 또는 쌍 샘플(연구의 시작, 중간 및 끝에서 각 커뮤니티 비교)에 사용됩니다. 카이 제곱 또는 피셔 테스트는 질적 변수 간의 연관성을 테스트하거나 독립 그룹 간의 비율을 비교하는 데 사용됩니다. 쌍을 이룬 정성적 데이터의 경우 McNemar 테스트 및 Cochran의 Q 테스트(바이너리 데이터용)가 적용됩니다. 정량적 변수의 경우 정규성 및 변동의 동질성 가정을 준수하는 경우 T-Student 테스트를 사용하여 두 개의 독립 그룹을 비교하거나 Mann-Whitney-Wilcoxon 테스트를 수행합니다. ANOVA 또는 Kruskal-Wallis 테스트는 두 개 이상의 그룹에 사용됩니다. Signs, Wilcoxon 및 Friedman 테스트는 둘 이상의 쌍을 이룬 샘플을 비교하는 데 사용됩니다. 샘플 크기가 허용하는 경우 일반화 선형 모델을 사용하여 관심 있는 일부 이벤트(예: 구충제 사용)에 대한 여러 설명 변수를 공동으로 분석할 수 있습니다. 개입군과 통제군 간의 종단 비교를 위해 곤충학적 지표와 마찬가지로 R. 소프트웨어의 여러 패키지를 사용하여 혼합 선형 모델 및 일반화 추정 방정식 모델 또는 nparLD(Nonparametric Analysis of Longitudinal Data in Factorial Experiments) 접근 방식을 적용합니다. . (CONsolidated Standards of Reporting Trials) CONSORT2010 기준인 IT(intention-to-treat) 분석이 사용될 예정이며, 누락된 값에 대한 처리를 사전에 진행해야 할 수도 있습니다. 차이점과 연관성은 다음과 같은 경우 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다.

스포로조이트 비율(타액선에 스포로조이트가 있는 모기의 %)은 제어 및 개입 커뮤니티와 결정된 감소 비율 사이에서 비교됩니다. 서로 다른 모기 종의 시간적 및 공간적 분포와 그 밀도는 공간 분석 및 통계 도구와 함께 ArcGIS 10을 사용하여 탐색하고 두 위치(제어 x 개입) 간에 비교합니다.

정성적 구성 요소에서는 인터뷰를 녹음한 후 전체 전사가 수행됩니다. 데이터 처리 및 분석은 콘텐츠 분석 기술을 사용하여 수동으로 이루어집니다.

데이터 관리 - 설문지

ODK(Open Data Kit)는 데이터 수집 및 품질 관리에 사용됩니다. 감독자는 인터뷰를 저장하기 위해 CIOB에 있는 보안 서버로 보내기 전에 매일 인터뷰를 검토합니다. 서버는 데이터 관리자와 연구원 팀만 액세스할 수 있습니다. 전송된 데이터에는 참가자의 이름이 포함되지 않고 코드만 포함됩니다. 데이터 관리자는 매일 데이터를 정리 및 검증하고 현장 직원에게 피드백을 제공합니다. 정보에 입각한 동의서, 데이터 수집 양식 및 전자 장치(GPS 및 태블릿)와 같은 모든 물리적 문서는 저장되며 CIOB 수석 연구원만 액세스할 수 있습니다. 종이 문서는 연구 종료 후 5년간 보관 후 파기합니다.

데이터 관리 - 확산 및 곤충학

데이터는 종이 데이터 수집 양식을 통해 수집됩니다. 각 데이터 수집자는 매일 컴퓨터에서 사용할 수 있는 데이터베이스에 모든 데이터를 입력하고 팀 책임자가 신중하게 수정한 후 데이터 관리자에게 보내야 합니다. 데이터 관리자는 데이터를 받은 후 암호로 보호된 폴더를 생성하여 매일 데이터를 보관할 수 있습니다.

품질 관리 및 모니터링 - 직원 교육

연구 인력은 연구 연구팀에 의해 적절하게 훈련될 것입니다. 현장 팀은 세(3) 그룹으로 세분화됩니다.

• 혈액 샘플을 수집하고 가구주에 대한 설문 조사를 관리하고 의료 전문가와 인터뷰를 실시합니다. 팀은 연구 경험이 있는 3명의 건강 기술자로 구성됩니다.
• 모기 수집 및 번식지 매핑. 팀은 곤충학 기술자 2명으로 구성됩니다.
• 집에 방충제를 뿌릴 분무기. 팀은 4명으로 구성됩니다.

이 교육은 윤리적 측면, 가구 선택, 6-59개월의 어린이, 인터뷰 수행, 혈액 샘플링 절차, 우수한 임상 및 실험실 관행, 모기 수집, 조작, 식별, 처리 및 저장, 사육 매핑 및 살포 기술에 중점을 둘 것입니다. 안전.

품질 관리 및 모니터링 - 현장 작업 감독

팀에는 현장 작업을 모니터링하고 데이터 품질을 보장할 책임이 있는 현장 코디네이터가 있습니다. 연구 기간 동안 감독자 팀은 적절한 관행을 확인하기 위해 정기적으로 현장 팀을 방문합니다. 데이터의 품질 관리(QC)는 불분명한 용어 및 연구 질문을 식별하고 교체하는 파일럿 단계에서 시작됩니다. 현장 코디네이터는 또한 표준 운영 절차(SOP) 및 윤리 원칙 준수 여부를 지속적으로 평가합니다.

데이터 품질 및 품질 보증

기준선 연구에는 연구의 일부가 아닌 지역 사회에서 훈련 중에 수행될 파일럿이 포함됩니다. 파일럿은 (i) 데이터 수집 도구의 내용을 평가 및 검증하고, (ii) 연구와 관련된 윤리적 측면을 준수하는지 확인하는 다음 목표를 갖습니다. 조종사는 설문지에서 어려움과 누락을 식별하는 데 도움을 줄 것입니다. 파일럿은 모든 활동을 완료하는 데 필요한 현장 작업 전략, 팀 구성, 직원 책임 및 시간을 분석합니다.

현장 코디네이터는 CIOB로 보내지기 전에 이루어진 질의에 대한 품질 관리를 수행하며, 현장 코디네이터가 수행하는 품질 관리 외에도 주 조사관은 데이터의 품질을 보장하기 위한 감독도 수행합니다.

데이터 저장

데이터는 CIOB에 저장됩니다. 연구 문서 및 데이터 수집 도구(물리적 형식의 정보에 입각한 동의 포함)는 파일 폴더에 보관되고 잠금 상태로 유지되며 연구원의 접근이 제한됩니다. 연구와 관련된 모든 서류는 법령의 규정에 따라 정리하고 CIOB에 5년간 보관합니다.

생물학적 시료 보관

혈액 및 모기 샘플의 일부는 포르투갈의 IHMT-NOVA 실험실에서 처리되며, 이를 위해 CIOB와 포르투갈의 IHMT-NOVA 간에 물질 이전 계약(MTA)이 체결되었습니다. 혈액 샘플의 일부는 명시적으로 현재 프로젝트를 참조하여 PhD 및/또는 석사 프로그램 범위에서 향후 분석을 위해 CIOB에 보관됩니다. 샘플은 연구가 종료된 후 5년 동안 -80°C에서 CIOB의 냉동고에 보관됩니다. 추가 분석에 사용되지 않는 생물학적 샘플은 연구 내에서 분석 종료 시 파기됩니다.

윤리적 검토

이 연구 프로토콜은 국립 보건원(CIBS-INS)의 건강 생명 윤리 기관 위원회와 건강 생명 윤리 위원회(CNBS)에 윤리적 승인을 위해 제출되었습니다. 63/CNBS/20 및 부록 참조. 11/CNBS/21. 이 연구는 제64회 총회에서 "우수한 임상 관리(GCP)", "우수한 임상 및 검사실 관리(GCLP)"의 규칙 및 2013년 헬싱키 선언과 같은 모든 적용 가능한 규제 요건에 따라 수행될 것입니다. .

동의

교육을 받은 면접관이 연구 대상으로 선정된 아동 및 의료 전문가의 세대주, 부모 또는 법적 대리인의 동의를 얻습니다. 이들은 현지 언어(Sena 및 Ndau)에 능통하거나 정보에 입각한 동의 및 인터뷰 요청 시 통역사와 동행합니다. 모든 참가자는 연구의 목적, 연구 중에 수행할 절차 및 잠재적인 관련 불편에 대해 알릴 뿐만 아니라 사전 동의서에 서명한 후에도 아무런 영향 없이 연구를 떠날 가능성에 대해 알릴 것입니다.

참가자는 인터뷰 중에 프라이버시를 지킬 권리가 있으며, 참가자가 편안하게 느끼는 장소에서 진행되며, 제공한 모든 정보는 비밀이 보장됨을 설명하고, 인터뷰 오디오 녹음에 대한 권한은 구체적으로 요청했습니다. 6-59개월 된 가정의 어린이로부터 손가락 채혈 혈액 샘플을 채취하려면 집주인의 허가를 받아야 합니다. 아동의 법정대리인이 세대주와 다른 경우에도 동의를 받습니다. 미성년자의 부모/법적 보호자가 18세 미만인 경우 미성년자의 참여를 승인하기 위해 정보에 입각한 동의가 이루어집니다.

다음에 대한 절차의 중요성을 설명하면서 연구 전반에 걸쳐 정기적인 방문에 대한 승인이 요청됩니다.

• 집(실내 및 실외)에 모기 구충제를 뿌립니다(매월). Tambai Q2 및 Q6에서만;
• 두 지역의 집 내부와 외부에서 모기 수집(한 달에 두 번).

지망생과 각 참가자는 정보에 입각한 동의서 사본 2부에 서명하며, 한 부는 참가자에게 남고 다른 한 부는 나중에 연구 폴더에 보관할 수 있도록 지망생에게 남습니다. 연구 책임자의 연락처는 문서의 필수적인 부분입니다. 정보에 입각한 동의서 양식은 참가자가 자신의 자유 의지에 따라 연구 참여를 수락했다는 증거로 사용됩니다. 기밀을 보장하기 위해 각 참가자에게 설문지 식별 코드가 할당됩니다. 작성된 각 설문지에는 동의에 해당하는 코드가 있습니다.

참여 위험

참여의 위험성은 미미하나, 어떤 질문이든 인터뷰 중에 참여자가 불편함을 느끼는 경우 질문을 전달하도록 요청할 수 있습니다. 혈액 샘플을 채취하는 동안 채혈 부위에서 동일한 출혈이나 염증의 위험이 있을 수 있습니다. 특정 활동에 대해 교육을 받은 의료 전문가를 통해 모세혈관 혈액(멸균 란셋 및 일회용 장갑)을 수집하기 위한 적절한 재료가 제공되는 것을 최소화합니다. 방충제 살포와 관련하여 참가자는 잠재적인 드문 부작용에 대해 알립니다. 분무가 수행된 거주지의 누군가가 제품과 관련된 것으로 의심되는 반응을 보이는 경우 해당 거주지에서 분무가 중단되고 해당 개인은 보건 서비스에 회부됩니다.

참여 혜택

종종 인터뷰를 수행한 후 커뮤니티에서 지식이 증가하는 것으로 나타났습니다. 이것은 설문지를 적용하는 사람들이 종종 모범 사례에 대해 경고할 수 있고, 이는 지역 사회의 건강 개선에 기여할 수 있다는 사실 때문입니다. 혜택 중 하나는 귀하가 말라리아에 걸렸는지 여부를 아는 것입니다. 또한 말라리아 진단을 받은 어린이는 치료를 통해 혜택을 받을 수 있습니다.