Evaluering av IR3535 som et romlig frastøtende middel for malariakontroll. (REPELMALARIA)

Studieområde og befolkning

Studien vil bli utført i samfunnene i Tambai, lokaliteten Bebedo, distriktet Nhamatanda, Sofala-provinsen, Mosambik. Samfunnet er dekket av Mutondo Health Center.

Studere design

En prospektiv eksperimentell før-etter-kontroll-intervensjon-test vil bli utført med to grupper: a) Intervensjon (fellesskap av Tambai kvartal 2 (Q2) og 6 (Q6)): med innendørs og utendørs sprøyting med IR3535 (3-(N) -acetyl-N-butyl) aminopropionsyre etylester) og b) Kontroll (fellesskap av Tambai kvartal 3 (Q3) og 4 (Q4)): uten sprøyting. Denne longitudinelle studien vil vare i 2 år. Mygg vil bli fanget innendørs og utendørs for å bestemme entomologiske indikatorer som er relevante for overføring. Myggoppdrettsplasser i samfunnene skal kartlegges ved hjelp av «Deltagende kartlegging». Prevalensen av malaria hos barn under fem år vil bli bestemt i kontrollen og i intervensjonsmiljøene, i begynnelsen, midten og slutten av studien. En KAP-undersøkelse om malaria til huseiere i Tambai (Q2, Q3, Q4; Q6) og helsepersonell og sentrale samfunnsaktører.

Befolkningsintervensjoner og prosedyrer

Opprinnelig, Beira Operational Research Center (CIOB) og Institute of Hygiene and Tropical Medicine ved Nova University Lisboa (IHMT-NOVA), i samarbeid med Mutondo helsesenter, Provincial Directorate of Health of Sofala og Directorate District Health District of Nhamatanda og Gorongosa nasjonalpark vil presentere intervensjonen på en deltakende måte og forklare tilnærmingen som er rettet mot samfunnet for å garantere at den tilegnes av samfunnet fra begynnelsen av studien. Før studien gjennomføres, vil lokalsamfunn bli informert, og de lokale strukturene vil bli orientert for at samfunnet skal forstå målene med studien.

Undersøkelser om samfunnskunnskap, holdninger og praksis (KAP).

Det skal gjennomføres tre KAP-undersøkelser, ved start (baseline), ved slutten av første år og ved slutten av andre år. Studiepopulasjonen vil omfatte alle husholdninger fra Q2, Q3, Q4 og Q6 i Tambai. Husholdningsdata vil bli samlet inn ved hjelp av et spørreskjema designet for nettbrett, med Android-system, gjennom ODK-applikasjonen. Intervjuer med overhodet vil finne sted hjemme hos dem eller på et sted de foreslår. KAP om malaria og de ulike aspektene knyttet til aksept av bruk av repellenter vil bli supplert med fokusgrupper og intervjuer med lokale nøkkelaktører. Innsamlingen av dataene vil bli utført basert på to teknikker: a) semistrukturerte intervjuer (Flick, 2006) med helsepersonell ved Vinho helsesenter (en mødre- og barnehelsesøster og en forebyggende medisiner), to aktivister og lokale ledere; b) fokusgrupper (Flick, 2006) med matroner og utøvere av tradisjonell medisin fra de to samfunnene som studeres. Alle deltakere i denne komponenten av studien vil bli valgt med vilje (Hancock, Ockleford og Windridge, 2009). Deltakelse vil skje ved å signere det informerte samtykket.

Malariaprevalens

Malariaprevalensen vil bli bestemt hos barn under 5 år på begge stedene Tambai Q2 og Q6 (intervensjon) og Tambai Q3 og Q4 (kontroll) ved begynnelsen av studien, ved begynnelsen av det andre året og ved slutten av studien. det andre året (prosjektslutt). Det vil bli bedt om samtykke til den juridiske vergen. Kapillærblod vil bli samlet inn ved hjelp av en steril pipette og individuell lansett fra alle barn i studien i alderen 6-59 måneder for: a) Rapid Diagnostic Test (RDT) for Plasmodium falciparum; b) bloddråpeutstryk og c) filterpapir for utvinning av nukleinsyrer (FTA Cards ThermoFisher). Prøvene vil bli kodet, og informasjon om koordinatene til den tilknyttede husstanden vil bli registrert. Den innledende prøvebehandlingen vil bli utført ved laboratoriet til helsesenteret i Ponta Gea - Beira, og de molekylære analysene ved IHMT-NOVA - Lisboa, som definert i MTA. Identifikasjon av Plasmodium vil skje ved PCR og genotyping ved helgenomsekvensering (Ocholla et al. 2014). Barn som blir diagnostisert med malaria av RDT under studien vil bli henvist til Mutondo Health Center for behandling.

Husspraying med repellent

Sprøytingen med IR3535 vil starte ved begynnelsen av studien og vil bli utført månedlig i løpet av de første 3 månedene, annenhver måned i løpet av de neste 6 månedene og deretter kvartalsvis. Sprøytingen vil foregå i og utenfor husene i løpet av formiddagen. Sprøyting vil kun foregå i intervensjonskvarter, mens det ikke vil være sprøyting i kontrollkvarter.

Entomologi

For entomologiske studier vil husholdninger bli valgt tilfeldig. Ved svikt i satellittbilder og geografisk analyse (Wampler et al. 2013, Escamilla et al. 2014), vil en klassisk tilnærming basert på husholdningsinventar i hvert samfunn bli brukt manuelt. Ved hjelp av lokal kartlegging og nummerering vil det lages to lister over nummererte husstander. Etter en tilfeldig tallgenerator (f.eks. Random.org) vil bli brukt til å tilfeldig velge husstandene fra hver liste (Wampler et al. 2013). Mygg vil bli samlet inn to ganger i måneden i og utenfor husene ved de utvalgte husstandene i 2 år i intervensjon og kontrollkvarter. Inne i hver husstand vil hvilemygg som matet natten før, samles ved hjelp av en Prokopak aspirator. Utenfor boligene vil CDC-lysfeller bli plassert tidlig på kvelden og hentet neste morgen. Fellene skal plasseres utendørs, på steder like langt fra bygningene (husene) som utgjør husholdningen. Myggens fysiologiske tilstand vil bli bestemt, og hunnene klassifiseres som umatede, delvis matede, fôrede, semi-gravide eller gravide (Detinova, 1962). Mygghunner vil bli identifisert morfologisk og bekreftet av PCR (Abilio et al. 2015). Tettheten av mygg fanget i kontroll- og intervensjonssamfunnene vil bli estimert ved å bruke Williams' geometriske gjennomsnitt. GEE og LMM vil bli utforsket for å sammenligne de to gruppene over tid. Infeksjonshastigheten vil bli bestemt ved å oppdage og kvantifisere sporozoitter i mygg. Myggenes hoder og thorax vil bli fjernet og klargjort for å isolere DNA (Abilio et al. 2011). Sporozoitter vil bli oppdaget og kvantifisert ved kvantitativ PCR (qPCR) som beskrevet i (Marie et al. 2013).

Kartlegging av hekkeplasser

Mygghekkestedene vil bli kartlagt ved hjelp av «participatory mapping»-tilnærmingen (Dickin et al. 2014). Metoden vil bli brukt til å identifisere den romlige oppfatningen av malariarisiko i samfunnet, basert på romlig identifikasjon av eksisterende hekkesteder. Intervjudeltakere og fokusgrupper vil bli invitert til å tegne et kart over områdene de forbinder med avl i lokalsamfunn og beskrive viktige trekk ved kartet. Disse kartene kan deretter digitaliseres på et geografisk informasjonssystem (GIS) for å lage et georeferert kart over samfunnskunnskap.

Malariatilfeller i samfunnet

I løpet av studien vil tilfeller av malaria i Tambai bli overvåket gjennom pasienter som besøker Mutondo Health Center. Pasienter i alle aldre fra samfunnene med mistanke om malaria vil bli rekruttert. Et spørreskjema vil bli administrert. En RDT, en tykk dråpe og blodutstryk vil bli utført, og en dråpe blod samles inn for påfølgende molekylær diagnose ved PCR (som beskrevet ovenfor). Innmelding og samtykke vil bli spurt etter at pasientene har fått all pleie de trenger i helseenheten. Skriftlig informert samtykke vil bli innhentet fra deltakerne eller deres juridiske representanter for pasienter under 18 år.

Studer variabler

Studievariablene kan deles inn i variabler fra undersøkelsen (spørreskjema) og semistrukturerte intervjuer. Variabler kan grupperes i følgende kategorier:

• Sosiodemografiske variabler: Alder; Kjønn; Sivilstatus; Yrke; Utdanningsnivå; Grad av slektskap til husmannen; Husholdningsstørrelse (antall hus, areal); Antall rom i huset; antall personer per divisjon; Type konstruksjon.
• Eierskap og bruk av myggnett: Eierskap til myggnett; Bruk av myggnetting; Mobilitet og aktiviteter for husstandsmedlemmer.
• Malariakunnskap, holdninger og praksis: Malariakunnskapsnivå; Malaria holdninger; Myggkontroll og bitt; Eierskap, bevaring og bruk av myggnetting; Kunnskap om repellenter; Etter å ha analysert spørreskjemadataene, utledes variablene; Nivå av kunnskap, holdning og praksis om malaria (score kategorisert som: dårlig (> 50%), middels (50% -74%) og høy (≥75%)).

Variabler av studien vil også være de som er et resultat av innsamling av biologisk materiale (perifert blod og mygg):

• Malariatilfeller hos barn under fem år (RDT, optisk mikroskopi og PCR);
• Malariatilfeller på Vinho helsesenter;
• Myggtetthet i og utenfor boliger; Andel infiserte mygg; Distribusjon av myggarter i og utenfor hjem;
• Hekkested (deltakende kartlegging)

Prøvestørrelse for KAP

Omtrent 126 husholdninger vil bli undersøkt (i henhold til National Institute of Statistics of Moçambique (INE) rapport, 2017) tilsvarende det totale antallet husholdninger i lokalsamfunnene som studeres. De valgte stedene består av kun 126 husstander, derfor vil alle som kontaktes bli inkludert for å delta for å garantere maksimal effekt for studien.

Prevalens av malaria i intervensjons- og kontrollsamfunnet

I følge INE-rapporten, 2017, er det totale antallet av befolkningen i de to studieområdene 630 innbyggere. For å beregne antall barn under 5 år ble den totale befolkningen multiplisert med 17,5 %, så utvalget vil bestå av ca 110 barn. Forsøket på å inkludere alle barn har som mål å prøve å få en prøvestørrelse som garanterer oss høyest mulig kraft.

Prøvestørrelse og statistisk kraft for entomologiske indikatorer

Ulike scenarier og programmer ble utforsket for å beregne utvalgsstørrelsen. I utgangspunktet ble et scenario tilsvarende en utvalgsstørrelse på 40 husstander (20 i hvert lokalsamfunn) fulgt i 48 øyeblikk ansett som mulig. Den statistiske kraften ble beregnet ved hjelp av programmet G * Power v.3.2 (Faul et al. 2007, 2009), med en korrelasjon mellom målinger gjort til forskjellige tidspunkter 0,2; med effekt av størrelse f = 0,25; en type I feilsannsynlighet lik 0,05. En statistisk styrke på 91,1 % ble estimert. Motsatt, for de samme parameterverdiene, ved å fikse kraften til 95 %, i perspektivet av å bruke ANOVA for gjentatte målinger, ble det oppnådd 24 aggregater i hvert fellesskap. Men hvis forutsetningene til ANOVA for gjentatte målinger mislykkes, vil LMM- eller GEE-modeller bli brukt, så det er viktig å ha en ide om den statistiske kraften for disse modellene. Ved å bruke Longpower-pakken (https://www.rdocumentation.org/packages/longpower/versions/1.0-19/topics/longpower-package) til R-programvaren, kraften knyttet til GEE- og LMM-modellene, for det forrige scenariet (24 husstander), ville ikke være tilfredsstillende. Med tanke på muligheten for manglende verdier (opptil 20 % ved siste besøk), en mer realistisk autoregressiv korrelasjonsmatrise for målinger i hvert besøk, ble flere scenarier utforsket i Longpower for å garantere minst potenser på 80 %, for de ulike modellene . For å holde budsjettet og menneskelige ressurser tilgjengelig, har vi 40 husstander på hvert sted (80 husstander totalt), med et enkelt månedlig besøk til hver husstand.

Dataanalyse

Dataene vil bli analysert med SPSS versjon 25.0 og R-pakken. I første omgang vil det bli utført deskriptiv statistikk og eksplorativ analyse. Parametriske og ikke-parametriske tester vil bli brukt, enten for uavhengige prøver (for eksempel å sammenligne de to fellesskapene på et gitt tidspunkt), eller for sammenkoblede prøver (sammenlikne hvert fellesskap i begynnelsen, midten og slutten av studien). Chi-kvadrat- eller Fisher-testen vil bli brukt til å teste sammenhengen mellom kvalitative variabler eller for å sammenligne proporsjoner mellom uavhengige grupper. For sammenkoblede kvalitative data vil McNemar-testen og Cochrans Q-test (for binære data) bli brukt. For kvantitative variabler vil sammenligningen av to uavhengige grupper utføres ved bruk av T-Student-testen, i tilfelle samsvar med antakelsene om normalitet og homogenitet av varianser, eller alternativt Mann-Whitney-Wilcoxon-testen. ANOVA eller Kruskal-Wallis test vil bli brukt for mer enn to grupper. Tegn, Wilcoxon og Friedman tester vil bli brukt til å sammenligne to eller flere sammenkoblede prøver. Hvis prøvestørrelsene tillater det, kan generaliserte lineære modeller brukes til å analysere flere forklaringsvariabler i fellesskap for enkelte hendelser av interesse (for eksempel bruk av frastøtende middel). For den longitudinelle sammenligningen mellom intervensjons- og kontrollgruppene, som for entomologiske indekser, vil blandede lineære modeller og generalisert estimeringslikningsmodell eller en ikke-parametrisk analyse av longitudinelle data i faktoreksperimenter (nparLD) tilnærming bli brukt, ved bruk av flere pakker av R.-programvaren . (CONsolidated Standards of Reporting Trials) CONSORT2010-standardene, en intention-to-treat (IT) analyse vil bli brukt, og det kan være behov for å gå videre med en behandling for manglende verdier tidligere. Forskjeller og assosiasjoner vil bli vurdert som statistisk signifikante når s

Sporozoittraten (% av mygg med sporozoitter i spyttkjertlene) vil sammenlignes mellom kontroll- og intervensjonssamfunnet og prosentvis reduksjon som er bestemt. Den tidsmessige og romlige fordelingen av de forskjellige myggartene og deres tettheter vil bli utforsket ved hjelp av ArcGIS 10 med romlig analyse og statistiske verktøy) og sammenlignet mellom de 2 stedene (kontroll x intervensjon).

I den kvalitative komponenten, etter opptak av intervjuene, vil deres fulle transkripsjon bli utført. Databehandling og analyse vil være manuell, ved bruk av innholdsanalyseteknikk.

Datahåndtering - Spørreskjemaer

Open Data Kit (ODK) vil bli brukt til datainnsamling og kvalitetskontroll. Veilederen vil gjennomgå intervjuene på daglig basis, før de sendes til den sikre serveren på CIOB for lagring. Serveren vil kun være tilgjengelig for dataansvarlig og teamet av forskere. De overførte dataene inkluderer ikke navnene på deltakerne, kun kodene deres. Dataansvarlig vil rense og validere dataene daglig og gi tilbakemelding til feltpersonalet. Alle fysiske dokumenter som informerte samtykker, datainnsamlingsskjemaer og elektroniske enheter (GPS og nettbrett) vil bli lagret og kun tilgjengelig for CIOB Principal Investigator. Papirdokumentene vil bli oppbevart i 5 år etter at studien er fullført og deretter destruert.

Datahåndtering - Prevalens og entomologi

Dataene vil bli samlet inn gjennom et datainnsamlingsskjema på papir. Hver dag må hver datainnsamler legge inn alle data i en database som er tilgjengelig på en datamaskin og sende den til dataansvarlig, etter en nøye revisjon av ansvarlig i teamet. Etter at databehandleren mottar dataene, kan hun/han opprette en passordbeskyttet mappe for å arkivere dataene på daglig basis.

Kvalitetskontroll og overvåking - Opplæring av personalet

Studiepersonell vil få riktig opplæring av studiens forskerteam. Feltteamet vil bli delt inn i tre (3) grupper:

• Samle blodprøver og administrere undersøkelsen til huseiere og gjennomføre intervjuer med helsepersonell. Teamet vil bestå av 3 helseteknikere med erfaring innen forskning.
• Mygginnsamling og kartlegging av hekkesteder. Teamet vil bestå av 2 entomologiteknikere.
• Sprøyter som skal sprøyte hus med avstøtende middel. Teamet vil bestå av 4 personer.

Opplæringen vil være fokusert på etiske aspekter, valg av husholdninger, barn i alderen 6-59 måneder, gjennomføring av intervjuer, blodprøveprosedyrer, god klinisk og laboratoriepraksis, mygginnsamling, manipulering, identifisering, prosessering og lagring, avlskartlegging og sprøyteteknikker og sikkerhet.

Kvalitetskontroll og overvåking - Veiledning av feltarbeid

Teamene vil ha en feltkoordinator som skal ha ansvar for å overvåke feltarbeidet og sikre datakvalitet. I løpet av studiet vil et team av veiledere periodisk besøke feltteamene for å sikre riktig praksis. Kvalitetskontrollen (QC) av dataene vil starte i pilotfasen, med identifisering og utskifting av uklare termer og studiespørsmål. Feltkoordinatoren vil også fortløpende vurdere overholdelse av standard driftsprosedyrer (SOP) og etiske prinsipper.

Datakvalitet og kvalitetssikring

Grunnstudien vil inkludere en pilot som vil bli gjennomført under opplæring i et samfunn som ikke er en del av studien. Piloten vil ha følgende mål (i) å evaluere og validere innholdet i datainnsamlingsinstrumentene, (ii) å sikre samsvar med de etiske aspektene knyttet til studien. Piloten vil bidra til å identifisere vanskelighetene og utelatelsene under spørreskjemaet. Piloten vil analysere feltarbeidsstrategi, teamsammensetning, personalansvar og tid som kreves for å fullføre alle aktiviteter.

Feltkoordinator vil foreta kvalitetskontrollen av henvendelsene før de sendes til CIOB og i tillegg til kvalitetskontrollen utført av feltkoordinatoren, vil hovedetterforskerne også gjøre tilsynet for å garantere kvaliteten på dataene.

Lagring av data

Dataene vil bli lagret på CIOB. Studiedokumenter og datainnsamlingsinstrumenter, inkludert informert samtykke i fysisk format, som vil bli plassert i arkivmapper og oppbevart låst, med begrenset tilgang til forskere. Alle dokumenter knyttet til forskningen vil bli arkivert i henhold til lovens regler og vil oppbevares hos CIOB i en periode på 5 år.

Lagring av biologiske prøver

En del av blod- og myggprøven vil bli behandlet i laboratoriet til IHMT-NOVA, Portugal, for det formålet er det signert en materialoverføringsavtale (MTA) mellom CIOB og IHMT-NOVA, Portugal. En del av blodprøven vil bli oppbevart i CIOB for fremtidig analyse i omfanget av PhD-er og/eller masterprogrammer, eksplisitt med henvisning til dette prosjektet. Prøvene vil bli oppbevart i en fryser ved CIOB ved -80 ° C, i 5 år etter slutten av studien. Biologiske prøver som ikke vil bli brukt til videre analyse vil bli destruert på slutten av analysen i studien.

Etisk gjennomgang

Denne studieprotokollen har blitt sendt inn for etisk godkjenning til Institutional Committee on Bioethics for Health ved National Institute of Health (CIBS-INS) og til National Committee on Bioethics for Health (CNBS) - Clearance Ref. 63/CNBS/20 og tilleggsref. 11/CNBS/21. Studien vil bli utført i samsvar med reglene for "god klinisk praksis (GCP)", "god klinisk og laboratoriepraksis (GCLP)" og alle gjeldende regulatoriske krav, slik som Helsinki-erklæringen 2013, på den 64. generalforsamlingen. .

Informert samtykke

Samtykket fra husholdningsoverhodene, foreldre eller juridiske representanter for barna og helsepersonell som er valgt ut til studien vil innhentes av trente intervjuere. De vil være flytende i de lokale språkene (Sena og Ndau) eller ledsaget av en tolk under forespørselen om informert samtykke og intervjuer. Alle deltakere vil bli informert om målene for studien, prosedyrer som skal utføres under studien og potensielle tilknyttede ulemper, samt muligheten for å forlate studien selv etter å ha signert det informerte samtykket uten noen implikasjoner for dem.

Deltakeren vil ha rett til privatliv i øyeblikket av intervjuet, det vil bli holdt på et sted hvor deltakeren føler seg komfortabel, forklarer at all informasjon gitt av ham vil være konfidensiell, autorisasjon for lydopptak av intervjuet vil være spesifikt Forespurt. Det vil bli bedt om tillatelse fra huseieren for å ta en fingerstikkblodprøve fra barna i husstanden i alderen 6-59 måneder. Hvis barnets juridiske representant er en annen enn husstandens overhode, vil informert samtykke også gis til barnet. Hvis barnets forelder/verge er under 18 år, vil informert samtykke gis for å gi barnet tillatelse til å delta.

Det vil bli bedt om autorisasjoner for periodiske besøk gjennom hele studien samtidig som viktigheten av prosedyrene for:

• sprøyting av hjemmene deres (innendørs og utendørs) med myggmiddel (månedlig). Bare i Tambai Q2 og Q6;
• samling av mygg fra innsiden og utsiden av husene deres (to ganger i måneden) på to lokaliteter.

Spørre og hver deltaker vil signere 2 kopier av skjemaet for informert samtykke, hvor den ene kopien blir liggende hos deltakeren og den andre blir værende hos spørren for senere innlevering i studiemappen. Kontakten til hovedetterforskeren av studien er en integrert del av dokumentet. Skjemaet for informert samtykke vil tjene som bevis på at deltakeren godtok å være en del av studien av egen fri vilje. For å garantere konfidensialitet vil hver deltaker bli tildelt en identifikasjonskode for spørreskjemaet. Hvert spørreskjema som lages vil ha en kode som tilsvarer samtykke.

Deltakelsesrisiko

Risikoen for deltakelse er minimal, men i tilfelle en deltaker føler seg ukomfortabel under intervjuet med et spørsmål, kan de be om å sende spørsmålet videre. Under blodprøvetakingen kan det være samme risiko for blødning eller betennelse fra innsamlingsstedet. For å minimere at tilstrekkelig materiale vil bli gitt til å samle kapillærblod (steriliserte lansetter og engangshansker) gjennom helsepersonell som er opplært for den spesifikke aktiviteten. Når det gjelder sprøyting av hus med avstøtende middel, vil deltakerne bli informert om potensielle sjeldne bivirkninger. Dersom noen i boligen hvor sprøytingen ble utført, får en reaksjon som mistenkes å ha sammenheng med produktet, vil sprøytingen bli avbrutt i den boligen og den enkelte henvist til helsevesenet.

Fordeler med deltakelse

Etter å ha gjennomført intervjuer observeres det ofte en økning i kunnskapen i lokalsamfunnene. Dette skyldes det faktum at de som bruker spørreskjemaet ofte kan varsle om beste praksis, som kan bidra til forbedringer i helsen til samfunnet. En av fordelene vil være å vite om du har malaria eller ikke, pluss at barn diagnostisert med malaria vil kunne dra nytte av behandling.