만성간질환 환아의 근육감소증에 대한 가지사슬 아미노산 치료의 효과.

연구 설계: 단일 센터 무작위 이중 맹검 위약 대조 시험.

기본 목표:

CLD 및 근감소증(MAMA <2 SD)이 있는 소아에서 BCAA 요법 12주 후 팔 중간 근육 영역(MAMA)의 증가를 평가합니다.

보조 목표:

공부하기 위해

• 간경변이 있는 어린이의 나이에 대한 MAMA <2SD로 정의된 근감소증의 유병률.
• 간경변이 있는 소아에서 USG 근육 크기(이두박근 및 대퇴사두근)에 기반한 근감소증의 유병률.
• 근감소증이 있거나 없는 CLD 소아의 폴리스타틴 수치.
• BCAA 치료 7일 후 mTOR 유전자 발현 수준의 변화.
• BCAA 치료 12주 후 크레아티닌 높이 지수의 변화.
• BCAA 요법 6개월 후 MAMA(근육 크기)의 변화.
• 3개월 및 6개월에 초음파를 사용한 근육 크기(이두박근 및 대퇴사두근)의 변화.
• HE, UGI 출혈, SBP, AKI, 복수의 새로운 발병 또는 증가, BCAA 그룹에서 위약 대비 3개월 및 6개월에서의 입원 및 사망률을 포함하는 중요한 사건의 발생.
• 3개월 및 6개월에 걸친 알부민 요구량.

연구 인구:

포함 및 제외 기준에 따른 조건을 충족하는 근감소증(6개월 - 12세)이 있는 간경변이 있는 어린이.

기록될 기본 매개변수:

임상 변수: 황달, 기관비대, HE(현성 및 미미), 복수, SBP, 담관염, 상부 위장관 출혈, AKI 검사 변수: 전혈구수, LFT, KFT, PT-INR, 암모니아, mTOR 유전자 발현, 혈청 폴리스타틴 수치, 24시간 소변 크레아티닌 이미징 매개변수: USG의 비장 크기, 비장 Z-점수, PV 직경, USG 근육 - 이두박근 및 대퇴사두근

인체 측정 매개변수:

연령별 체중 연령별 신장 삼두근 피부 주름 두께 견갑하 피부 주름 두께 중앙 팔 둘레 MAMC MUAC-(TSF*3.14)로 계산 MAMA는 (MUAC-(〖3.14*TSF)〗^2)/(4*3.14)로 계산됩니다.

근감소증 컷오프 계산:

근감소증에 대한 컷오프는 Addo OY 등이 연구한 정상 건강한 미국 어린이의 MAMA 센타일을 기준으로 2 SD 미만의 중간 팔 근육 영역으로 정의됩니다.

근육 두께에 대한 USG 방법론:

기준선과 후속 조치 모두에서 초음파 스캔은 참가자가 무릎을 완전히 펴고 누운 자세로, 엉덩이는 중립 위치에, 발목은 하지와 팔에 대해 약간의 저측 굴곡으로 이완된 상태에서 동일한 설정에서 수행됩니다. 상지까지 완전히 확장됩니다.

근육 측정 부위 근육 두께의 정의 상완이두근 견봉에서 전주근 주름까지 거리의 2/3 상완골과 이두근의 복부 근막 사이의 거리

대퇴사두근 ASIS와 슬개골 상방 사이 거리의 절반 대퇴직근의 대퇴골과 복부 근막 사이의 거리

측정 부위는 다음과 같습니다.

스캐닝 부위는 스킨 마킹 펜으로 표시됩니다. 변환기는 충분한 양의 초음파 수성 전송 젤로 코팅되고 가장 가벼운 접촉 압력을 적용하여 피부에 수직으로 배치되어 기본 조직이 압축되지 않도록 합니다. 스캐너 매개변수는 모든 측정에 대해 동일하게 유지되어 기본 측정 절차에 대한 균일성을 보장합니다. 3개의 연속 판독값이 기록됩니다.

정상적인 근육 두께에 대한 컷오프는 Scholten RR 등이 제공한 다음 공식에서 가져옵니다.

정상 상완이두근 두께(cm) = 0.77+0.028*무게 (SD 0.16) 정상 대퇴사두근 두께(cm) = 1.63+0.042* weight(SD 0.34) 초음파에서 근육 크기를 평가할 때 관찰자 간 변동을 찾기 위해 연구에서 관찰의 약 50%에 대해 2명이 수행합니다.

전체 혈구 수, 간 기능 및 신장 기능 검사, PT-INR, 혈청 암모니아를 포함한 일상적인 조사와 함께 다음 조사도 수행됩니다.

베이스라인에서 혈청 폴리스타틴 수준: 이는 키트 기반 ELISA로 수행됩니다.

기준선 및 7일째 mTOR 유전자 발현: EDTA 바이알에서 1ml 혈액을 채취합니다. 총 RNA는 Trozol RNA 분리 프로토콜에 의해 분리됩니다. 또한 이러한 분리된 RNA는 CDNA 키트에 의해 역전사됩니다. 이후 Real time PCR은 SYBER Green 형광 염료가 있는 상태에서 수행됩니다. mTOR 경로의 표적 유전자의 역방향 프라이머에는 p-mTOR(Ser2448), mTOR, p-Akt(Thr308), Akt, Nrf2, UCP-2(C-말단) p-AMPK(Thr172 또는 Ser485/491) 및 AMPK가 포함됩니다. , p-p65. 하우스키핑 유전자인 GAPDH는 정규화 컨트롤로 사용됩니다. 열 순환 조건은 95°C에서 10분, 이어서 95°C에서 15초, 60°C에서 1분의 40주기입니다. 각 측정은 3중으로 수행되며 상대 유전자 발현은 ∆CT 방법으로 결정됩니다. BCAA 치료 7일 후에 채취한 혈액 샘플에서도 동일한 과정이 수행됩니다.

기준선 및 12주에서의 크레아티닌 높이 지수: 이것은 다음 공식에 따라 계산됩니다(24시간 소변 크레아틴)/(동성 및 키에 대한 예상 24시간 소변 크레아티닌)

등록 및 포함 기준을 충족한 환자는 블록 무작위화 방법에 따라 BCAA 또는 위약 그룹에 할당되며 봉인된 4자리 코드 봉투로 할당-은폐됩니다. BCAA 또는 플라시보가 12주 동안 보충됩니다. 환자는 12주 동안 후속 조치를 받게 됩니다. 12주가 끝나면 중간 팔 근육 둘레가 반복됩니다. USG 근육 두께, 일상적인 혈액 조사, 크레아티닌 높이 지수도 반복됩니다. mTOR 유전자 발현은 7일에 반복될 것입니다.

새로운 발병 복수, AKI, 간성 뇌병증, 상부 위장관 출혈 및 전반적인 입원뿐만 아니라 12주 및 6개월에 걸친 사망률을 포함한 임상적 사건의 발생은 이 기간 동안 두 그룹 모두에서 기록되고 치료 표준에 따라 치료됩니다. 이러한 이벤트는 다음과 같이 정의됩니다. 급성 신장 손상

KDIGO 지침에 따라:

48시간 이내에 혈청 크레아티닌이 0.3mg/dl 이상 증가하거나, 소변량이 6시간 이상 동안 0.5ml/kg/시간 미만이거나, 또는 발생한 것으로 추정/알려진 기준선의 1.5배 이상 혈청 크레아티닌 증가 이전 7일 이내.

간성 뇌병증: Modified West-Haven의 기준에 따름.

복수의 등급 1등급 - 초음파로만 확인되는 복수 2등급 - 변화하는 둔감함과 함께 복부 팽창이 분명한 중간 정도의 복수

연구 기간: 2년

근거가 있는 샘플 크기:

관찰 부분: 만성 간질환 소아의 근육감소증 유병률을 40%, 알파 5%, 허용오차 10%로 가정하여 CLD 소아의 근육감소증 유병률을 추정하기 위해 96건을 등록해야 합니다.

Interventional(RCT 부분): BCAA와 대조군의 기준선 MAMC 값이 동일하다고 가정하고, 3개월 추적 후 BCAA의 MAMC 값은 4.6cm 값(18% 변화, 30.5 vs 25.9cm)(Ruiz- Margain A et al, Rev de Gastroenterol de Mexico 2018) 알파 -5% 및 검정력 90%로 총 40건의 사례를 등록해야 합니다. 탈락률을 10%로 가정하여 4개의 블록 크기를 갖는 블록 무작위화 방법에 의해 무작위로 2개 그룹으로 할당된 44개의 사례를 등록하기로 결정하였다.

간섭:

약 0.35g/kg 용량의 가지 사슬 아미노산을 12주 동안 2회 분할 투여 그룹으로 보충합니다. 투여를 위해 다음 체중 밴드 범주에 따라 처방됩니다.

<5kg 2gm 5-10kg 4gm 10-20kg 8gm 20-40kg 12gm 40-60kg 24gm 위약은 색상, 맛 및 일관성이 비슷합니다. 두 그룹 모두 동일한 복용량을 받게 됩니다.

두 그룹 모두 150cal/kg/일의 칼로리 섭취량과 2-2.5gm/kg/일의 단백질 섭취량을 권고받게 되며, 이는 소아 간장과에서 개발한 표준 진료로 정기적인 추적 관찰을 통해 보장됩니다. .

모니터링 및 평가:

환자는 최소 6개월 동안 추적 관찰됩니다. 새로운 발병 복수, AKI, 간성 뇌병증, 상부 위장관 출혈, 중대한 감염을 포함한 임상적 사건의 발생은 이 기간 동안 두 그룹 모두에서 기록될 것이며 치료 표준에 따라 치료될 것입니다.

12주가 끝나면 중간 팔 근육 둘레 및 기타 인체 측정 매개 변수, 초음파 촬영의 근육 두께 및 크레아티닌 높이 지수도 반복됩니다. mTOR 유전자 발현은 7일 말에 반복될 것입니다. 중간 팔 근육 둘레 및 기타 인체 측정 매개변수, 초음파에서 근육 두께는 6개월에 다시 반복됩니다.

통계 분석 모든 범주형 변수는 빈도로 표현되는 반면 연속형 변수는 평균 또는 중앙값 ± SD로 표현됩니다. 인과관계 평가를 위해 카이제곱 검정과 스튜던트 t 검정(Fisher's exact test)을 적용한다. Kaplan-Meyer 통계는 생존 및 간 관련 이환율에 대해 수행됩니다. 유의성은 p-값 <0.05의 형태와 Odd's ratio 및 95% 신뢰 구간으로 언급될 것입니다.

부작용:

이전 연구에서 볼 수 있듯이 가지 사슬 아미노산의 예상되는 부작용은 없습니다.

학습 규칙 중지:

비준수 또는 임상 사건으로 인한 연속 15일 동안의 보충 중단.

배제 기준으로의 진행, 즉 악성 종양의 발달, AKI, 1개월 이내에 잠재적인 간 이식.