당뇨병성 발 증후군(PTA-DFS)의 조기 경피 경혈관 혈관성형술 (PTA-DFS)

계획된 연구는 단일 중심, 무작위 및 대조 임상 시험입니다. 연구 참가자는 1:1 비율로 초기 PTA 그룹("즉시 PTA", 48시간 이내)과 선택적 PTA(표준 치료) 그룹으로 무작위 배정됩니다. 기준선 검사와 모든 후속 검사는 PTA를 제외하고 두 그룹에서 동일하게 수행됩니다. 이 연구는 환자와 의사에게 공개되지 않습니다. 즉, 조사관은 PTA에 대한 통제 개입을 계획하지 않습니다. 그러나 이후의 모든 실험실 테스트, 특히 염증 바이오마커 측정은 눈가림 방식으로 설계되었습니다. 즉, PTA에 대한 정보를 실험실에 전달하지 않고. 기본 및 후속 검사는 발 궤양의 심각도와 치유 과정에 중점을 둘 것입니다. 선택 부문의 환자가 상처 치유가 크게 악화되는 경우 "즉시" 부문으로 넘어갑니다. 따라서 각 환자에 대해 pAVD 치료는 임상 진행 관리 및 연구 기간 동안 방문에 대해 전문가가 관리하고 문서화한 지침을 따릅니다. 방문 시 연구자들은 당뇨병성 족부궤양에만 주의를 기울이는 것이 아니라 전체적인 그림에서 각 환자를 중환자로 본다. 이에 연구자는 먼저 심장 기능을 고려하여 충분한 수분공급을 통해 신장정체 지표를 개선하고자 노력하였다. 중증 신부전증에서는 가이드라인 기반의 PTA 대기 상태에서 CO2 혈관조영술을 이용한 선택적 혈관조영술이 가능하며, 이는 신장에 영향을 주지 않습니다.

기본 특성화 환자의 완전한 병력과 현재 및 이전 약물은 초기 임상 평가 중에 얻어집니다. 의료 기록 외에도 생활 양식 질문(흡연, 음주) 및 사회적 지위(결혼 여부, 교육 수준/사회적 지위)가 도출됩니다.

궤양의 허혈성 원인 외에 정맥 또는 신경병증 유발 요인을 고려해야 하는지 결정하는 것을 포함하는 신체 검사가 수행됩니다. 만성정맥부전(CVI)의 증거를 찾기 위해 연구자들은 말초 다리 정맥에 대한 이중 초음파 검사를 실시할 것입니다. 만성 정맥 부전의 증거가 있는 경우 임상적(C), 병인학적(E), 해부학적(A) 및 병리생리학적(P)(CEAP) 분류를 사용하여 중증도를 평가합니다. 정기적인 실험실 화학 테스트도 혈액 샘플을 사용하여 수행됩니다. 또한 당뇨병 기간도 기록됩니다.

상처 기록 상처 기록은 기존 궤양을 기록하기 위해 수행됩니다. 영향을 받은 부위, 깊이, 부피가 기록됩니다. 이 사진 기록은 항상 동일한 각도, 동일한 위치 및 거리에서 가능한 한 동일한 조명 조건 하에서 수행되어야 합니다. 현재 학제간 지침에서 권장하는 WIfI 및 Wagner(Armstrong) 분류 기준에 따라 상처를 평가합니다.

관류 측정

다음 검사가 수행됩니다.

• 도플러 주파수 분석과 발목 상완 및 발가락 발목 지수 측정을 통한 다리 동맥의 이중/도플러 초음파. 후속 이중 초음파에서는 말초 동맥의 해부학이 정의됩니다. 과정 후반에 이러한 검사를 통해 혈관 재생된 혈관 부분의 개통성, 최고 유속 측정을 통한 협착 정도 및 내막 증식을 확인합니다. 또한, 이중 초음파 검사를 사용하여 대퇴 동맥의 흐름 의존적 확장도 검사합니다.
• 발의 산소 포화도는 분광 카메라를 사용하여 분석됩니다. 제어 측정은 손을 측정하여 수행됩니다.
• 분절 맥동조영술
• 폐색혈량측정법을 이용한 휴식시 동맥 관류 및 관류 예비량 측정.
• 혈역학(혈압 및 심박수)
• 휴식 시 통증. McGill에 따른 현재 임상 증상 및 통증 설문지를 기록합니다.
• 말초 신경병증은 연구 범위 내에 있을 것입니다. 참여 환자는 또한 국립 건강 관리 지침(NVL) "성인 당뇨병의 신경병증"에 따라 말초 다발신경병증에 대한 검사를 받게 됩니다. 말초신경 기능 검사에는 당뇨병성 감각운동성 다발신경병증(DSNP)을 진단하기 위한 임상 신경병증 점수 조사가 포함됩니다. 구체적으로 신경병증 증상 점수(NSS)와 신경병증 결핍 점수(NDS)를 기록한다.

면봉 상처 표본 수집은 시판되는 플록 면봉(FLOQSwab®, COPAN Diagnostics Inc, Murrieta USA)을 사용하여 "Levine" 방법에 따라 수행됩니다. 미생물군집과 해당 저항도를 결정하기 위한 재료를 얻기 위해 프로젝트의 각 환자로부터 동시에 총 3개의 면봉을 채취합니다(하류 공정에 따라 특정 운반 매체가 사용됩니다). 면봉은 철저한 상처 세척 후, 첫 번째는 초기 상처 치료 후, 두 번째는 4주차, 세 번째는 8주차, 네 번째는 12주차, 다섯 번째는 24주차, 마지막은 48주차에 수집됩니다.

기준선에서 상처 샘플을 기반으로 한 계통 발생 구성의 측정은 뒤셀도르프 하인리히 하이네 대학의 의료 미생물학 및 병원 위생 연구소와 협력하여 전체 게놈 시퀀싱을 사용하여 상처 샘플의 다양한 박테리아 종을 결정합니다. 미생물군집의 구성은 몇 가지 장점이 있는 나노기공 기술을 사용하여 연구됩니다. 데이터는 맞춤형 생물정보학 스크립트를 사용하여 분석됩니다.

채혈은 아침 공복에 실시합니다. 혈액 수집은 i.d.로 수행됩니다. PTA 이전 임상 루틴과 DFS 후속 방문 중이며 연구 관련 수집물을 대표하지 않습니다. 이 경우, 추가적인 연구 관련 천자 없이 추가 혈액 샘플을 채취할 수 있습니다. 무세포(cf)DNA 검사를 위해 혈액을 소위 스트레치 욕조에 수집합니다. 시점에는 검사 첫날(V0), 1일(V1), 1개월(V2), 2개월(V3), 3개월(V4), 6개월(V5), PTA 후 12개월(V6). 연구 기간 동안 환자당 500ml 미만의 혈액을 채취해야 합니다.

cfDNA 검사 혈관 재생된 조직에서 미생물 성분의 통합을 평가하기 위해 연구자는 미생물 cfDNA의 양을 결정하려고 합니다. 수집된 물질의 충분한 양이 최대 3년 동안 분석됩니다.

통계 분석 상처 미생물군집의 전체 게놈 시퀀싱 데이터의 분류학적 프로파일링은 이전에 설명한 대로 HHU의 알고리즘 생물정보학과의 생물정보학 스크립트를 사용하여 수행됩니다. Oxford Nanopore 플랫폼으로 생성된 상처 미생물군집의 전체 게놈 시퀀싱 데이터는 Kraken2 및 원생동물, 곰팡이, 바이러스 및 식물 서열의 포괄적인 맞춤형 데이터베이스를 사용한 분류학적 프로파일링에 사용됩니다. 다양한 분류 수준에서 메타게놈 구성을 비교할 수 있는 시각화는 사용자 정의 스크립트를 사용하여 생성됩니다. 샘플의 클러스터링을 평가하기 위해 조사관은 Bray-Curtis 거리를 기반으로 주요 좌표 분석을 수행했습니다. Conda 버전 관리 시스템을 사용하여 전체 워크플로우가 재현 가능한 Snakemake 워크플로우로 제공됩니다. 상처 미생물군집 구성과 대사 표현형의 연관성은 옴니버스, 블록별 및 특성별 통계 모델을 사용하여 수행됩니다. 변수는 Wilcoxon 일치쌍 부호 순위 테스트, 짝이 없는 양면 스튜던트 t-테스트, 양면 Mann-Whitney U-테스트를 ​​사용하여 비교되어 시간 경과에 따른 그룹 간 차이를 감지합니다. 명목변수는 카이제곱 검정과 Fisher 정확 검정을 적절하게 사용하여 비교됩니다. 변수 간의 관계(예: 미생물군집 구성의 변화와 상처 치유 또는 합병증 사이의 연관성)는 부분 Pearson 상관 계수를 사용하여 평가됩니다(교란 변수에 대한 조정 및 Bonferroni 방법을 사용한 다중 테스트 포함). PTA 후 상처 미생물군집 변화 평균의 평균 및 표준 오차에 대한 예비 추정치가 문헌에서 이용 가능하지 않았기 때문에 표준화된 평균 차이(Cohen's d)가 검정력 분석에 사용되었습니다. 모든 통계 분석은 Windows 23.0용 SPSS(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 사용하여 수행되었습니다. 모든 그래프는 GraphPad Prism 버전 7.01(GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA)을 사용하여 생성되었습니다.