Varhainen perkutaaninen transluminaalinen angioplastia diabeettisessa jalkaoireyhtymässä (PTA-DFS) (PTA-DFS)

Suunniteltu tutkimus on yksikeskinen, satunnaistettu ja kontrolloitu kliininen tutkimus. Tutkimukseen osallistujat satunnaistetaan suhteessa 1:1 ryhmään, jolla on varhainen PTA ("välitön PTA", 48 tunnin sisällä) ja ryhmään, jolla on elektiivinen PTA (hoidon standardi). Perustutkimukset ja kaikki seurantatutkimukset suoritetaan samalla tavalla molemmissa ryhmissä PTA:ta lukuun ottamatta. Tutkimus on sokeamaton potilaille ja lääkäreille, ts. eli tutkijat eivät suunnittele PTA:n valvontatoimenpiteitä. Kaikki myöhemmät laboratoriokokeet, erityisesti tulehduksen biomarkkerien mittaus, on kuitenkin suunniteltu sokkoutetuiksi, ts. e. välittämättä PTA:ta koskevia tietoja laboratorioon. Perus- ja seurantatutkimukset keskittyvät jalkahaavan vaikeusasteeseen ja paranemisprosessiin. Jos elektiivisessä käsivarressa olevien potilaiden haavan paraneminen heikkenee merkittävästi, heidät siirretään "välittömään" käsivarteen. Siten jokaisen potilaamme kohdalla pAVD:n hoito noudattaa ohjeita, joita valvovat ja dokumentoivat asiantuntijat kliinisen edistymisen kontrollissa ja tutkimuksen aikana käynneissä. Vierailujen aikana tutkijat eivät kiinnitä huomiota vain diabeettisiin jalkahaavoihin, vaan näkevät jokaisen potilaan kokonaiskuvassa kriittisesti sairaana. Siten tutkija yritti ensin parantaa munuaisretentioparametreja riittävällä nesteytyksellä ottaen huomioon sydämen toiminnan. Vaikeassa munuaisten vajaatoiminnassa ohjeisiin perustuva selektiivinen angiografia PTA-valmiustilassa CO2-angiografialla on mahdollista, mikä ei vaikuta munuaisiin.

Lähtötilanteen karakterisointi Potilaan täydellinen sairaushistoria sekä nykyiset ja aiemmat lääkkeet saadaan alustavan kliinisen arvioinnin yhteydessä. Sairauskertomuksen lisäksi nostetaan esille elämäntapakysymyksiä (tupakointi, alkoholi) ja sosiaalista asemaa (siviilisääty, koulutustaso/sosiaalinen asema).

Suoritetaan fyysinen tutkimus, jossa määritetään, tulisiko haavaumien iskeemisen etiologian lisäksi ottaa huomioon laskimo- vai neuropaattiset laukaisevat tekijät. Kroonisen laskimoiden vajaatoiminnan (CVI) osoittamiseksi tutkijat suorittavat perifeeristen säärilaskimoiden dupleksisonografian. Jos on näyttöä kroonisesta laskimoiden vajaatoiminnasta, sen vakavuus arvioidaan käyttämällä kliinistä (C), etiologista (E), anatomista (A) ja patofysiologista (P) (CEAP) luokittelua. Rutiininomaisia ​​laboratoriokemiallisia kokeita tehdään myös verinäytteillä. Lisäksi kirjataan diabetes mellituksen kesto.

Haavan dokumentointi Haavadokumentaatio tehdään olemassa olevien haavaumien dokumentoimiseksi. Vaikuttavat alueet, niiden syvyys ja tilavuus tallennetaan. Tämä valokuvadokumentaatio tulee aina tehdä samassa kulmassa, samassa paikassa ja etäisyydellä sekä samoissa valaistusolosuhteissa mahdollisimman pitkälle. Haava arvioidaan nykyisten poikkitieteellisten ohjeiden suosittelemien WIfI- ja Wagnerin (Armstrong) luokituskriteerien mukaan.

Perfuusion mittaus

Seuraavat tutkimukset suoritetaan:

• Jalkojen valtimoiden Duplex/Doppler-ultraääni Doppler-taajuusanalyysillä ja nilkka-olkavarren ja varvas-nilkkaindeksin mittauksella. Seuraavassa kaksisuuntaisessa ultraäänessä perifeeristen valtimoiden anatomia määritellään. Myöhemmin kurssin aikana nämä tutkimukset määrittävät revaskularisoidun suonen segmentin läpinäkyvyyden, ahtauman asteen huippuvirtausnopeuden määrityksellä ja sisäkalvon liikakasvun. Lisäksi reisivaltimon virtauksesta riippuvaista laajentumista tutkitaan myös dupleksisonografialla.
• Jalan happisaturaatio analysoidaan spektroskooppisella kameralla; sen ohjausmittaus tehdään mittaamalla käsiä.
• Segmentaalinen pulsoskillografia
• Valtimoperfuusion levossa ja perfuusioreservin mittaus okkluusiopletysmografialla.
• Hemodynamiikka (verenpaine ja syke)
• Kipu levossa. Nykyisten kliinisten oireiden ja kipukyselyn tallentaminen McGillin mukaan.
• Perifeerinen neuropatia kuuluu tutkimuksen piiriin; osallistuvat potilaat tutkitaan myös perifeerisen polyneuropatian varalta kansallisen terveydenhuollon ohjeen (NVL) "Neuropatia aikuisiän diabeteksessa" mukaisesti. Ääreishermojen toimintatestit sisältävät kliinisen neuropatian pisteytyksen diabeettisen sensomotorisen polyneuropatian (DSNP) diagnosoimiseksi. Yksityiskohtaisesti neuropatiaoireiden pisteet (NSS) ja neuropatiapuutospisteet (NDS) kirjataan.

Vanupuikkohaava Näytteiden keräys suoritetaan "Levine"-menetelmän mukaisesti käyttäen kaupallisesti saatavilla olevaa flokoitua vanupuikkoa (FLOQSwab®, COPAN Diagnostics Inc, Murrieta USA). Jokaiselta projektin potilaalta otetaan yhteensä 3 vanupuikkoa samanaikaisesti, jotta saadaan materiaalia mikrobiomin määrittämiseen ja vastaava resistogrammi (spesifisiä kuljetusvälineitä käytetään jatkoprosessin mukaan). Vanupuikko otetaan perusteellisen haavan puhdistuksen jälkeen, ensimmäinen haavan alustavan hoidon jälkeen, toinen neljän viikon kuluttua, kolmas kahdeksan viikon kuluttua, neljäs 12 viikon kuluttua, viides 24 viikon kuluttua ja viimeinen 48 viikon kuluttua.

Haavanäytteisiin perustuvat fylogeneettisen koostumuksen mittaukset lähtötilanteessa määrittävät haavanäytteissä olevat eri bakteerilajit käyttämällä koko genomin sekvensointia yhteistyössä Düsseldorfin Heinrich Heinen yliopiston lääketieteellisen mikrobiologian ja sairaalahygienian instituutin kanssa. Mikrobiomin koostumusta tutkitaan nanohuokosteknologialla, jolla on useita etuja. Tiedot analysoidaan mukautetuilla bioinformatiikan skripteillä.

Verenotto suoritetaan aamulla tyhjään vatsaan. Verinäytteet suoritetaan i.d. kliinisessä rutiinissa ennen PTA:ta ja DFS:n seurantakäyntien aikana eivätkä edusta tutkimukseen liittyvää kokoelmaa. Tällöin voidaan ottaa lisää verinäytteitä ilman ylimääräisiä tutkimukseen liittyviä pistoskohtia. Veri kerätään niin kutsuttuihin venytysaltaisiin soluttoman (cf)DNA:n testaamiseksi. Aikapisteisiin kuuluvat rutiiniseurantatutkimukset ensimmäisenä tutkimuspäivänä (V0), päivänä 1 (V1), yksi kuukausi (V2), kaksi kuukautta (V3), kolme kuukautta (V4), kuusi kuukautta (V5), 12 kuukautta (V6) PTA:n jälkeen. Tutkimuksen keston aikana potilasta kohden tulee ottaa alle 500 ml verta.

cfDNA:n tutkiminen Arvioidakseen mikrobikomponenttien liittymistä revaskularisoiduista kudoksista tutkijat haluaisivat määrittää mikrobisen cfDNA:n määrän. Riittävä määrä kerättyä materiaalia analysoidaan enintään kolmen vuoden ajan.

Tilastollinen analyysi Haavan mikrobiomin koko genomin sekvensointitietojen taksonominen profilointi suoritetaan käyttämällä HHU:n algoritmisen bioinformatiikan laitoksen bioinformatiikan skriptejä, kuten aiemmin on kuvattu. Oxford Nanopore -alustalla luotuja haavan mikrobiomin koko genomin sekvensointitietoja käytetään taksonomiseen profilointiin Kraken2:n ja kattavan mukautetun alkueläin-, sieni-, virus- ja kasvisekvenssejä sisältävän tietokannan avulla. Visualisaatiot, jotka mahdollistavat metagenomisen koostumuksen vertailun eri taksonomisilla tasoilla, luodaan mukautetuilla skripteillä. Arvioidakseen näytteiden ryhmittymistä tutkijat suorittivat pääkoordinaattianalyysin, joka perustui Bray-Curtisin etäisyyteen. Conda-versionhallintajärjestelmän avulla koko työnkulku tarjotaan toistettavana Snakemake-työnkulkuna. Haavan mikrobiomikoostumuksen assosiointi metabolisten fenotyyppien kanssa suoritetaan käyttämällä omnibus-, lohkokohtaisia ​​ja ominaisuuskohtaisia ​​tilastollisia malleja. Muuttujia verrataan käyttämällä Wilcoxonin sovitettujen parien etumerkkitestiä, paritonta kaksipuolista Studentin t-testiä ja kaksipuolista Mann-Whitneyn U-testiä erojen havaitsemiseksi ajan ja ryhmien välillä. Nimellisiä muuttujia verrataan käyttämällä khin neliötestiä ja Fisherin tarkkaa testiä tarpeen mukaan. Muuttujien väliset suhteet (esim. mikrobiomin koostumuksen muutosten ja haavan paranemisen tai komplikaatioiden väliset yhteydet) arvioidaan käyttämällä osittaisia ​​Pearson-korrelaatiokertoimia (mukana ja ilman sekoitustekijöiden säätöä ja moninkertaista testausta Bonferroni-menetelmällä). Tehoanalyyseissä käytettiin standardisoitua keskimääräistä eroa (Cohenin d), koska alustavia arvioita haavan mikrobiomin muutoksen keskiarvon keskiarvosta ja standardivirheestä PTA:n jälkeen ei ollut saatavilla kirjallisuudesta. Kaikki tilastolliset analyysit suoritetaan käyttämällä SPSS for Windows 23.0:aa (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Kaikki kaaviot on luotu käyttämällä GraphPad Prism -versiota 7.01 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA).