Korai perkután transzluminális angioplasztika diabéteszes láb szindrómában (PTA-DFS) (PTA-DFS)

A tervezett vizsgálat egy monocentrikus, randomizált és kontrollált klinikai vizsgálat. A vizsgálatban résztvevőket 1:1 arányban randomizálják egy korai PTA-val ("azonnali PTA", 48 órán belül) és egy elektív PTA-val (standard ellátás) rendelkező csoportba. A kiindulási és az összes követési vizsgálatot mindkét csoportban azonos módon végzik el, kivéve a PTA-t. A vizsgálat nem vak a betegek és az orvosok, azaz az orvosok számára. e., a vizsgálók nem terveznek kontroll beavatkozást a PTA-ra. Azonban minden ezt követő laboratóriumi vizsgálat, különösen a gyulladás biomarkereinek mérése, úgy van megtervezve, hogy vakok legyenek, pl. pl. anélkül, hogy a PTA-ra vonatkozó információkat továbbítanák a laboratóriumnak. Az alap- és nyomon követési vizsgálatok a lábfekély súlyosságára és gyógyulási folyamatára összpontosítanak. Ha az elektív karban lévő betegek sebgyógyulásában jelentős romlást tapasztalnak, akkor átkerülnek az "azonnali" karba. Így minden páciensünk esetében a pAVD kezelése követi azokat az irányelveket, amelyeket a klinikai haladás ellenőrzésére és a vizsgálat során tett látogatásokra szakorvosok ellenőriznek és dokumentálnak. A vizitek során a vizsgálók nemcsak a diabéteszes lábfekélyekre figyelnek, hanem az összképben minden pácienst kritikus állapotú betegként látnak. Így a vizsgáló először megpróbálta a vese-retenciós paramétereket megfelelő hidratálással javítani, figyelembe véve a szívműködést. Súlyos veseelégtelenség esetén iránymutató alapú szelektív angiográfia lehetséges PTA készenlétben CO2 angiográfiával, amely nem érinti a vesét.

Kiindulási jellemzés A páciens teljes kórtörténetét, valamint a jelenlegi és korábbi gyógyszeres kezelést a kezdeti klinikai értékelés során szerezzük be. A kórlapon kívül az életmóddal kapcsolatos kérdéseket (dohányzás, alkoholfogyasztás) és a társadalmi helyzetet (családi állapot, iskolai végzettség/társadalmi státusz) is felhívják.

Fizikális vizsgálatot végeznek, amely magában foglalja annak meghatározását, hogy a fekélyek ischaemiás etiológiája mellett vénás vagy neuropátiás kiváltó tényezőket is figyelembe kell venni. A krónikus vénás elégtelenség (CVI) bizonyítására a vizsgálók duplex ultrahangvizsgálatot végeznek a perifériás lábvénákon. Ha bizonyíték van a krónikus vénás elégtelenségre, a súlyosságot a klinikai (C), etiológiai (E), anatómiai (A) és patofiziológiai (P) (CEAP) osztályozással értékelik. Rutin laboratóriumi kémiai vizsgálatokat is végeznek vérminták felhasználásával. Ezenkívül a diabetes mellitus időtartamát rögzítik.

Sebdokumentáció A sebdokumentáció a meglévő fekélyek dokumentálására szolgál. Az érintett területeket, azok mélységét és térfogatát rögzítjük. Ezt a fotódokumentációt mindig ugyanabban a szögben, azonos pozícióban és távolságban, valamint lehetőség szerint azonos fényviszonyok mellett kell elkészíteni. A sebet a jelenlegi interdiszciplináris irányelvek által javasolt WIfI és Wagner (Armstrong) besorolási kritériumok szerint értékelik.

Perfúzió mérés

A következő vizsgálatokat végzik:

• A láb artériáinak duplex/doppler ultrahangja Doppler-frekvenciaanalízissel és boka-kar és lábujj-boka index méréssel. Az ezt követő duplex ultrahang során a perifériás artériák anatómiáját határozzuk meg. A későbbiekben ezek a vizsgálatok meghatározzák a revascularizált érszakasz átjárhatóságát, a szűkület mértékét csúcsáramlási sebesség meghatározásával és az intima hyperplasiát. Továbbá az arteria femoralis áramlásfüggő dilatációját is vizsgálják duplex sonográfiával.
• A láb oxigéntelítettségét spektroszkópiai kamera segítségével elemzik; ellenőrző mérése a kezek mérésével történik.
• Szegmentális pulsoscillográfia
• Nyugalmi artériás perfúzió és perfúziós tartalék mérése okklúziós pletizmográfiával.
• Hemodinamika (vérnyomás és pulzusszám)
• Fájdalom nyugalomban. Az aktuális klinikai tünetek és fájdalom kérdőív rögzítése McGill szerint.
• A perifériás neuropátia a vizsgálat hatókörébe tartozik; a résztvevő betegeket perifériás polyneuropathia szempontjából is megvizsgálják, az Országos Egészségügyi Irányelv (NVL) "Neuropathia cukorbetegségben felnőttkorban" alapján. A perifériás idegfunkciós tesztek közé tartozik a klinikai neuropátia pontszám felmérése a diabéteszes szenzomotoros polyneuropathia (DSNP) diagnosztizálására. Részletesen rögzítjük a neuropathia tünet pontszámát (NSS) és a neuropathia deficit pontszámát (NDS).

Tamponos seb A minták gyűjtése a "Levine" módszer szerint történik, a kereskedelemben beszerezhető bolyhos tampon (FLOQSwab®, COPAN Diagnostics Inc, Murrieta USA) segítségével. A projektben részt vevő egyes betegektől egyidejűleg összesen 3 tampont vesznek, hogy a mikrobiom meghatározásához szükséges anyagot és a megfelelő rezisztogramot lehessen levonni (a folyamattól függően specifikus szállítóközegeket használnak). A tamponokat alapos sebtisztítás után gyűjtik, az elsőt a kezdeti sebkezelés után, a másodikat négy héten, a harmadikat a nyolc héten, a negyediket a 12. héten, az ötödiket a 24. héten, az utolsót a 48. héten.

A sebmintákon alapuló filogenetikai összetétel mérése a kezdeti időpontban a düsseldorfi Heinrich Heine Egyetem Orvosi Mikrobiológiai és Kórház-higiéniai Intézetével együttműködve teljes genom szekvenálás segítségével meghatározza a különböző baktériumfajokat a sebmintákban. A mikrobiom összetételét nanopórusos technológiával vizsgálják, aminek számos előnye van. Az adatok elemzése egyedi bioinformatikai szkriptek segítségével történik.

A vérvételt reggel, éhgyomorra kell elvégezni. A vérvételt i.d. klinikai rutinban a PTA előtt és a DFS utánkövető vizitjei során, és nem jelentenek egy tanulmányhoz kapcsolódó gyűjteményt. Ebből az alkalomból további vérmintákat lehet venni további vizsgálatokhoz kapcsolódó szúrások nélkül. A vért úgynevezett stretch kádakba gyűjtik a sejtmentes (cf)DNS vizsgálata céljából. Az időpontok közé tartoznak a rutinkövető vizsgálatok a vizsgálat első napján (V0), az 1. napon (V1), egy hónapon (V2), két hónapon (V3), három hónapon (V4), hat hónapon (V5), 12 hónappal (V6) a PTA után. A vizsgálat időtartama alatt betegenként kevesebb mint 500 ml vért kell venni.

A cfDNS vizsgálata A revaszkularizált szövetekből származó mikrobiális komponensek beépülésének felmérésére a kutatók a mikrobiális cfDNS mennyiségét szeretnék meghatározni. Az összegyűjtött anyag megfelelő mennyiségét legfeljebb három évig vizsgálják.

Statisztikai elemzés A sebmikrobióm teljes genom szekvenálási adatainak taxonómiai profilalkotása a HHU Algoritmikus Bioinformatikai Tanszékének bioinformatikai szkriptjei segítségével történik, a korábban leírtak szerint. Az Oxford Nanopore platformmal generált sebmikrobióm teljes genom szekvenálási adatait a Kraken2 rendszerrel történő taxonómiai profilalkotáshoz és a protozoon-, gomba-, vírus- és növényi szekvenciák átfogó egyedi adatbázisához fogják használni. A metagenomikus összetétel különböző taxonómiai szinteken történő összehasonlítását lehetővé tevő vizualizációk egyéni szkriptek segítségével jönnek létre. A minták csoportosításának értékelése érdekében a kutatók a Bray-Curtis távolságon alapuló főkoordináta-analízist végeztek. A Conda verziókezelő rendszer segítségével a teljes munkafolyamat reprodukálható Snakemake munkafolyamatként érhető el. A seb mikrobiom összetételének és a metabolikus fenotípusok társítását omnibus, blokk és vonás szerinti statisztikai modellek segítségével hajtjuk végre. A változókat a Wilcoxon illesztett párok előjeles rangpróbával, a páratlan kétoldali Student t-próbával és a kétoldalas Mann-Whitney U-próbával fogják összehasonlítani az időbeli és a csoportok közötti különbségek kimutatására. A névleges változókat a khi-négyzet teszttel és a Fisher-féle egzakt teszttel hasonlítjuk össze. A változók közötti kapcsolatokat (például a mikrobiom összetételében bekövetkezett változások és a sebgyógyulás vagy szövődmények közötti összefüggéseket) részleges Pearson-korrelációs együtthatók segítségével értékelik (a zavaró tényezők kiigazításával és a Bonferroni-módszerrel végzett többszörös teszteléssel és anélkül). A teljesítményelemzésekhez standardizált átlagkülönbséget (Cohen d) használtunk, mivel a szakirodalomban nem álltak rendelkezésre előzetes becslések a PTA utáni sebmikrobiom változás átlagának átlagára és standard hibájára. Minden statisztikai elemzés az SPSS for Windows 23.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) segítségével történik. Minden grafikon a GraphPad Prism 7.01-es verziójával (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA) készült.