비인두암의 조기 선별 및 진단을 위한 메틸화 특이적 PCR 검사
비인두암종은 우리나라에서 가장 흔한 악성종양 중 하나로 방사화학적 종합치료가 진행되면서 초기 비인두암의 5년 생존율이 95% 이상이다. 그러나 비인두암은 숨겨진 부위가 있고 뚜렷한 초기 임상 증상이 없기 때문에 매년 새로 진단되는 87,000명 중 70% 이상이 진행성 비인두암에 속하며, 진행성 비인두암의 5년 생존율은 매우 낮다. 암종은 약 70%에 불과합니다. 따라서 비인두암 환자의 생존율을 높이기 위해서는 조기 검진과 진단, 조기 치료가 관건이다. 비인두암에 대한 민감하고 정확한 바이오마커를 선택하고, 샘플링 검출을 위한 간단하고 실행 가능한 검사 방법에 의존한다면 비인두암의 조기 진단율을 크게 향상시킬 수 있습니다.
DNA 메틸화는 유전자 발현에서 DNA 서열 변화를 변경하지 않고 수행될 수 있는 DNA의 화학적 변형의 한 형태입니다. DNA 메틸화의 주요 역할은 유전자 발현을 조절하는 것입니다. 종양 억제 유전자는 세포 분화, 성숙 및 예정된 사망을 조절하는 기능을 합니다. 그러나 프로모터 영역의 메틸화가 일어나면 종양억제유전자의 발현이 억제되어 기능이 상실되어 세포가 저분화증식 단계에 머물게 되고, 세포사멸의 억제, 군집세포에 의한 혈관 형성, 세포의 소실 등이 발생하게 된다. 세포 부착 및 종양 형성. DNA 메틸화가 종양의 초기 단계에서 발생한다는 것을 알 수 있으며, 이러한 생물학적 특징으로 인해 조기 종양 선별에 대한 강력한 응용 가능성이 있습니다.
DNA 메틸화를 검출하는 방법에는 여러 가지가 있으며, 그 중 메틸화 특이적 PCR(MSP)은 특정 유전자의 메틸화 상태를 쉽고 빠르게 확인할 수 있어 스크리닝 테스트에 필요한 저렴하고 편리하며 일반화하기 쉬운 특성을 충족할 수 있습니다. 이전 MSP 실험 및 이전 보고서와 결합하여 비 인두 암종 조직에서 H4C6, Septin9 및 RASSF1A 유전자의 프로모터 단편의 메틸화 수준이 건강한 인간 비 인두 조직의 수준보다 유의하게 높다는 것을 발견했습니다. 이는 이들 세 유전자의 메틸화가 비인두암의 조기 선별 및 진단을 위한 바이오마커로 활용될 수 있음을 시사한다.
따라서 본 연구에서는 간단한 조작과 저렴한 비용으로 MSP 방법을 기반으로 H4C6, Septin9 및 RASSF1A 유전자의 메틸화 상태를 검출하고자 합니다. 임상병리학적 진단을 표준으로 삼아 비인두암의 조기 선별 및 조기진단에 있어 이러한 유전자 메틸화 지수의 가치를 검증하여 비인두암의 조기 진단율을 향상시킬 수 있는 새로운 검출지표 및 방법을 제시하였습니다.
연구 개요
연구 유형
등록 (실제)
연락처 및 위치
연구 장소
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Guangdong
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Guangzhou, Guangdong, 중국, 510060
- Sun Yat-sen University Cancer Center
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
- 성인
- 고령자
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
샘플링 방법
연구 인구
설명
포함 기준:
- 증례군(비인두암종군) : 조직검사 또는 세포검사로 확인된 비인두암종. 대조군(비인두암종군): 비인두암종 대상자는 없었다.
- 연령 ≥18세 및 ≤70세.
- 다른 종양의 이전 병력이 없으며 현재 종양도 없습니다.
제외 기준:
- Karnofsky 점수는 70점 이하이거나 Zubrod 점수는 2점 이상입니다.
- 심각한 의학적 합병증, 중요한 기관(심장, 폐, 간, 신장)의 기능 장애 또는 신경정신 질환이 있습니다.
- 주치의가 포함하기에 부적합하다고 간주하는 기타 환자 또는 지원자.
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
개입 / 치료 |
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환자군
비인두 면봉 표본과 말초 혈액 표본을 샘플링합니다.
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메틸화 특이적 PCR은 메틸화 상태를 정성적으로 검출하는 가장 간단하고 빠른 방법입니다. 메틸화되지 않은 C 염기는 중아황산염 변환에 의해 U로 변환되며, 이는 이후 프라이머(메틸화 특이적 및 비메틸화 특이적 프라이머)를 사용하여 PCR에 의해 증폭되고 이어서 아가로스 겔 전기영동 또는 프로브에 의해 검출됩니다. MSP의 핵심은 특정 유전자 영역에 대한 PCR 프라이머를 디자인하는 것입니다. 본 프로젝트 연구팀은 이전에 메틸화 시퀀싱을 통해 비인두암종 조직에서 H4C6, Septin9 및 RASSF1A 유전자의 메틸화 서열 위치를 찾아내고 이에 따라 특정 MSP 증폭 프라이머 및 프로브를 설계하여 쉽고 빠르게 메틸화 검출을 수행할 수 있었습니다. |
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비환자군
비인두 면봉 표본과 말초 혈액 표본을 샘플링합니다.
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메틸화 특이적 PCR은 메틸화 상태를 정성적으로 검출하는 가장 간단하고 빠른 방법입니다. 메틸화되지 않은 C 염기는 중아황산염 변환에 의해 U로 변환되며, 이는 이후 프라이머(메틸화 특이적 및 비메틸화 특이적 프라이머)를 사용하여 PCR에 의해 증폭되고 이어서 아가로스 겔 전기영동 또는 프로브에 의해 검출됩니다. MSP의 핵심은 특정 유전자 영역에 대한 PCR 프라이머를 디자인하는 것입니다. 본 프로젝트 연구팀은 이전에 메틸화 시퀀싱을 통해 비인두암종 조직에서 H4C6, Septin9 및 RASSF1A 유전자의 메틸화 서열 위치를 찾아내고 이에 따라 특정 MSP 증폭 프라이머 및 프로브를 설계하여 쉽고 빠르게 메틸화 검출을 수행할 수 있었습니다. |
연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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감광도
기간: 연구 완료를 통해 평균 1년
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비인두암의 병리학적 진단을 받고 메틸화 지수가 양성인 환자의 비율.
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연구 완료를 통해 평균 1년
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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특성
기간: 연구 완료를 통해 평균 1년
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메틸화지수가 음성인 비인두암종 환자의 비율.
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연구 완료를 통해 평균 1년
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공동 작업자 및 조사자
협력자
수사관
- 수석 연구원: Yi-Jun Hua, Phd, Sun Yat-sen University
간행물 및 유용한 링크
일반 간행물
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